DB42T 1257-2017蓝莓组织培养育苗技术规程

ICS65.020.20B05备案： DB42B05湖 北 省 地 方 标 准DB42/T1257—2017蓝莓组织培养育苗技术规程Technicalregulationsforinvitropropagationofblueberry(报批稿)2017-04-12发布 2017-06-01实施湖北省质量技术监督局 发布目 次前言 1范引文件 1语定义 1植的集处理 1母的择 1外体集 1外体标与输 2外体毒 2莓织养 2初培养 2继培养 2壮培养 2根养 3生设施 3生基质 3扦时间 3扦炼苗 3扦插 3插的理 3温度 3光照 3湿度 3施肥 3病害治 334装标、输贮存 4包装 4标志 4运输 4贮存 4附A（资性录）莓茎组培的养配方 5前 言本标照GB/T1.1—2009《准工导则 第1部分标的构编写》给的则草请注本件某内可能及利本件发布构承识这专利责。本标准由湖北省农业科学院提出。本标准由湖北省农业科学院归口管理。本标准起草单位：湖北省农业科学院果树茶叶研究所、湖北省鑫民生态农业开发有限公司。本标准起草人：秦仲麒、涂俊凡、李先明、杨夫臣、伍涛、朱红艳、刘政、叶小伍。蓝莓组织培养育苗技术规程范围本标准规定了蓝莓组织培养育苗外植体的采集与处理、蓝莓组织培养、生根培养、扦插后的管理、移栽、出圃以及包装、标志、运输和贮存。本标准适用于湖北省蓝莓主栽品种组培苗的生产。GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则NY/T496 下列术语和定义适用于本标准。蓝莓培苗 buleberrytissueculturedplantlets利用蓝莓芽或带芽茎段作为外植体，采用组织培养技术生产的苗木。蓝莓植体 blueberryexplants用于蓝莓无菌培养的器官或组织，如一年生嫩枝。壮苗养 strongseedlingculture将增殖的蓝莓丛芽剪成单芽茎段接种到壮苗培养基中培养使其长高长粗。选取生长健壮和无病虫害的蓝莓作为外植体采集的母株。4月-7月份晴天午后或叶片表面露水干后采集外植体。剪取生长健壮且无病虫害的当年生嫩枝，去掉叶片并留1mm～2mm叶柄。2d～3d用洗洁精将外植体清洗干净，流水冲洗10min～20min。在超净台上，将外植体剪成4cm～5cm的茎段，用75%酒精浸泡处理10s～30s，无菌水冲洗3次，再用0.1%砷汞溶液消毒6min～8min，无菌水冲洗5次，无菌滤纸吸干水分。用无菌的手术刀和镊子将嫩枝均匀分割成0.5cm～0.8cm的小段，接种于无菌的诱导培养基上。首次接种5d～7d应将外植体转接到新鲜的初代培养基上，35d～45d嫩芽长出后继代增殖培养。25℃±27d12h～161。转接1cm25℃±2℃。光照时间每天12h～16h，光照强度20μmol·m-2·s-1～40μmol·m-2·s-1。培养周期为40d～60d。增殖材料出现退化，生长速度慢、苗瘦弱时，应重新采集外植体更新繁殖材料。将继代苗剪成1.0cm～1.5cm茎段，转接到壮苗培养基中。温度20～3030μmol·m-2·s-1～40μmol·m-2·s-1。培养50d～80d后的无根试管苗用于扦插生根。具备遮阴、喷雾及调温的温室或塑料大棚。为苔藓或草炭与珍珠岩(体积比为1:1)的混合物。基质用0.5g/L多菌灵（80%可湿性粉剂）溶液或0.1%～0.2%的高锰酸钾处理，pH调至4.5～5.0。苔藓浸泡后的湿度为紧握有少量水滴出。扦插季节宜为春季或深秋。扦插前，将培养瓶苗放在覆盖单层遮阳网的温室，闭瓶炼苗3d～7d，后再开口炼苗1d～2d。扦插炼苗结束后，轻轻从培养基中取同种类及浓度生根剂溶液中浸蘸20s捞出。穴盘经0.5g/L多菌灵（80%温度温度保持15℃-30℃。温度过低通过空调或地热加热，温度过高通过遮阴、喷雾或通风系统降温。光照移植111～100μmol·m-2·s-1。湿度通过喷雾保持小拱棚内空气相对湿度95%以上，一个月后保持湿度60%～70%。扦插后立即扣小拱棚保湿，常通风换气。施肥组培苗生根后每2周喷施磷酸二氢钾溶液，稀释浓度3000倍。病虫害防治除按照GB/T8321（所有部分）执行外，还应符合农业部现行有关农药公告的规定。移栽扦插7d～10d（（0.5g/L（80%）1次2000-3000NY/T394出圃二年生苗高40cm以上，有3～5个分枝，叶浓绿，具有完整而发达的根系，无检疫性病虫害。包装组培苗需整齐摆放在车厢内，防止压折组培苗主干及枝条。标志组培苗应按品种、规格、数量、育苗单位、出厂（圃）日期等做好标记，并备注目的地、联系人、注意事项。运输组培苗用厢式货车运输，并保持通风透气；运输途中避免日晒、雨淋；装车时小心轻放。贮存附录A（资料性附录）蓝莓组织培养育苗的培养基配方表A.1所示了蓝莓组织培养育苗的培养基配方的内容。表A.1育苗培养基配方单位为毫克每升成分诱导培养基继代培养基壮苗培养基大量元素NH4NO3400400400MgSO4.7H2O370370370CaCl2.2H2O969696Ca(NO3)2.4H2O556556556KH2PO4170170170K2SO4990990990微量元素H3BO36.26.26.2MnSO4.H2O22.322.322.3ZnSO4.7H2O8.68.68.6Na2MoO4.2H2O0.250.250.25CuSO4.5H2O0.250.250.25有机物盐酸硫胺素(VB1)0.5～1.00.5～1.00.5～1.0烟酸(VB3)0.50.50.5盐酸吡哆醇(VB6)0.25～0.50.25～0.50.25～0.5甘胺酸2.02.02.0蔗糖300003000030000肌醇肌醇1001