微生物学球菌专家讲座

球菌（coccus）

潘建平教授

浙江大学医学院第9章微生物学球菌第1页♦球菌（coccus）：指个体形状呈球形或椭圆形一大类细菌。病原性球菌（pathogeniccoccus）：球菌

中对人类有致病性球菌。包含四个属一些球菌：①葡萄球菌属：G＋球菌

②链球菌属：G＋球菌③肠球菌属：G＋球菌

④奈瑟菌属：G－球菌（脑膜炎、淋病奈瑟菌）化脓性球菌（pyogeniccoccus）：引发机

体化脓性炎症球菌。微生物学球菌第2页第一节葡萄球菌属

（staphylococcus）一、金黄色葡萄球菌（S.aureus）二、凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）微生物学球菌第3页一、金黄色葡萄球菌（S.aureus）

微生物学球菌第4页1.形态与染色

球形，无鞭毛，无芽胞

葡萄串状，革兰染色阳性（G＋）（一）生物学性状微生物学球菌第5页2.培养特征易培养：普通平板血平板产色素：金黄色白色柠檬色有些菌溶血，产生溶血环：

致病性葡萄球菌菌落呈金黄色，于血琼脂平板上生长后，在菌落周围还可见完全透明溶血环（溶血）。

微生物学球菌第6页3.生化反应多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖。产酸不产气。致病性球菌分解甘露醇。触酶阳性（与链球菌区分标准）微生物学球菌第7页4.抗原结构(1)葡萄球菌A蛋白：

细胞壁表面蛋白质，完全抗原。抗吞噬作用

(2)荚膜多糖：有利于细菌粘附

(3)多糖抗原：存在于细胞壁，有群特异性。

SPAcapsuleteichoicacidpeptidoglycan微生物学球菌第8页SPA（staphylococcalproteinA）SPAIgGFcreceptorPHAGOCYTEBACTERIUM

协同凝集试验（coagglutination）

SPA功效体内作用：

SPA与IgG结合后所形成

复合物含有抗吞噬、促细

胞分裂、引发超敏反应、

损伤血小板等各种生物活性。体外作用：

用于检测微生物抗原。

S.aureusAb微生物学球菌第9页

金黄色葡萄球菌（S.aureus）表皮葡萄球菌（S.epidermidis）

腐生葡萄球菌（S.saprophyticus）

性状金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素金黄色白色白色或柠檬色发酵甘露醇

+

-

-凝固酶

+

-

-α溶素

+

-

-耐热核酸酶

+

-

-致病性

+

--5.分类1)据色素、生化反应致病性葡萄球菌判别微生物学球菌第10页三种葡萄球菌判别主要性状主要性状金黄色葡萄球菌表皮/腐生性葡萄球菌色素金黄色白色/柠檬色血浆凝固酶＋（－）－甘露醇发酵＋－溶血性＋－耐热核酸酶活性＋－磷壁酸核糖醇型＋＋磷壁酸甘油型－＋A蛋白（SPA）＋－致病性强无或弱

微生物学球菌第11页2）依据有没有凝固酶分型：

凝固酶阴性菌和凝固酶阳性菌两大型。继而依据噬菌体分为4个噬菌体群和23个噬菌体型。III群引发葡萄球菌肠毒素食物中毒。3）依据核酸分析遗传学分型：

DNA脉冲电泳分型、PCR分型等方法。

依16SrRNA不一样，葡萄球菌属分48个种和亚种。微生物学球菌第12页6.抵抗力♥对外界原因抵抗力强于其它无芽胞菌♥对碱性染料（龙胆紫）敏感♥易产生耐药性，对青霉素G耐药菌株达90％♥耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）已成为医院感染最常见致病菌微生物学球菌第13页

葡萄球菌中金黄色葡萄球菌毒力最强，经过在宿主体内增殖、扩散和产生有害胞外物质（酶和毒素）引发宿主疾病。葡萄球菌毒力因子（致病物质）包含：①酶；②毒素；③细菌一些表面结构蛋白。（二）致病性与免疫性微生物学球菌第14页1.致病物质①酶

凝固酶：血浆纤维蛋白原转为纤维蛋白，使血浆凝固

耐热核酸酶：水解DNA和RNA

纤维蛋白溶酶：水解纤维蛋白（纤维蛋白

溶酶、葡激酶）

透明质酸酶：降解透明质酸（扩散因子）

脂酶：分解脂肪

触酶：分解H2O2微生物学球菌第15页②毒素

葡萄球菌溶素 毒性休克综合征毒素-1

杀白细胞素肠毒素表皮剥脱毒素③表面结构或蛋白如粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖和SPA等微生物学球菌第16页凝固酶（coagulase）概念：使含抗凝剂人或兔血浆发生凝固酶类

游离凝固酶（freecoagulase）

结合凝固酶（boundcoagulase）意义：判别有没有致病性主要指标致病机理：抵抗吞噬细胞吞噬；保护病菌不受

血清中杀菌物质破坏；使感染局限

化和形成血栓。微生物学球菌第17页—引发葡萄球菌烫伤样皮肤综合征

（staphylococcalscaldedskinsyndrome,

SSSS）毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）—引发机体发烧，增加对内毒素敏感性；

—引发多器官系统功效紊乱或毒性休克综合

征（TSS）表皮剥脱毒素（exfoliativetoxin）微生物学球菌第18页肠毒素（enterotoxin）—约1/3临床分离金黄色葡萄球菌可产生—引发急性胃肠炎（即食物中毒）—耐热，抗胃肠液中蛋白酶—作用机制：与肠道神经细胞受体作用，刺激呕吐中枢造成以呕吐为主要症状

食物中毒—还含有超抗原（superantigen）作用

微生物学球菌第19页葡萄球菌溶素（staphylolysin）—溶素对人有致病作用—损伤细胞膜毒素（细胞毒素）杀白细胞素（leukocidin）—细胞毒素—攻击中性粒细胞和巨噬细胞—抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌侵袭力微生物学球菌第20页

2.所致疾病感染类型

所致疾病侵袭性

局部感染

全身感染毒素性

食物中毒

TSSSSSS

微生物学球菌第21页烫伤样皮肤综合征(Staphylococcalscaldedskinsyndrome,SSSS)微生物学球菌第22页3.免疫性

人类有一定天然免疫力，只有当皮肤黏膜受伤后，宿主免疫力降低时，才易引发葡萄球菌感染。

感染后能取得一定免疫力，但不强，难以预防再次感染。微生物学球菌第23页ELISA标本脓汁，血液，剩下食物，呕吐物等分离培养血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶直接涂片镜检革兰阳性葡萄球菌生长现象色素，溶血……生化反应毒素检验药敏试验动物试验：对食物中毒患者（三）微生物学检验法微生物学球菌第24页防

注意消毒隔离注意个人卫生预防医源性感染

预防耐药性产生治

抗菌素药敏试验本身菌苗疗法四、防治标准微生物学球菌第25页二、凝固酶阴性葡萄球菌Coagulasenegativestaphylococcus,CNS微生物学球菌第26页泌尿系感染细菌性心内膜炎败血症术后及植入医用器械引发感染

CNS已成为医源性感染常见主要病原菌，耐药菌株日益增多；当机体免疫功效低下或细菌进入非正常借居部位时，CNS可引发各种感染，各类感染中仅次于大肠埃希菌，居病原菌第2位，造成诊治困难，引发临床微生物学工作者关注。

CNS除表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌外，还包含溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、头葡萄球菌等30各种。

微生物学球菌第27页第二节链球菌属

（Streptococcus）A群（化脓性）链球菌（S.pyogenes）肺炎链球菌（S.pneumoniae）微生物学球菌第28页概述1.概念

链球菌属是一大类G＋、排列呈双或

长短不一链状球菌。2.分类

1)溶血现象分类

链球菌在血琼脂平板培养基上生长繁殖后，按产生溶血是否及其溶血现象分为3类：①甲(α)型溶血；②乙(β)型溶血；③丙(γ)型溶血。微生物学球菌第29页依据溶血现象分类溶血环现象名称类别致病性草绿色溶血环溶血甲型溶血性链球菌多为条件致病菌完全溶血环溶血乙型溶血性链球菌溶血性链球菌致病力强不溶血丙型链球菌不溶血性链球菌无致病性微生物学球菌第30页2）抗原结构分类

据链球菌细胞壁中抗原结构（C多糖抗原）不一样,利用血清学方法分成A～H，K～V

20群。对人致病链球菌菌株，90%左右属A群，其它群少见。同一群链球菌又分若干型。A群依据其M抗原不一样，可分成约100个型。微生物学球菌第31页3）生化反应分类

对一些不含有群特异性链球菌（如肺炎链球菌和草绿色链球菌等），需用生化反应、药品敏感和对氧需要分类。对氧需要分类分为：需氧、厌氧和兼性厌氧链球菌。微生物学球菌第32页医学常见链球菌链球菌血清群溶血诊疗关键点引发常见疾病化脓性链球菌A群β溶血；杆菌肽敏感皮肤感染，咽炎，风湿热，肾炎无乳链球菌B群β溶血；杆菌肽不敏感新生儿败血症和脑膜炎水解马尿酸盐牛链球菌D群不溶血；不耐6.5%NaCl败血症，心内膜炎肺炎链球菌—α溶血；胆盐敏感肺炎，脑膜炎，心内膜炎草绿色链球菌—α或不溶血；胆盐不敏感龋齿，心内膜炎微生物学球菌第33页一、A群（化脓性）链球菌

本属细菌代表种，致病性强，对人致病链球菌有90%属此种。微生物学球菌第34页1.形态与染色球形或椭圆形，链状排列，革兰染色阳性（G＋），无芽胞，无鞭毛，透明质酸荚膜。(一)生物学性状微生物学球菌第35页2.培养特征营养要求高：血平板或含血清培养基；液体培养为沉淀生长；血平板呈灰白色表面光滑小菌落，不一样菌株溶血不一，多数有透明溶血环（β溶血现象）。

微生物学球菌第36页3.生化反应分解葡萄糖，产酸不产气。不分解菊糖，不被胆汁溶解（可判别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌）。链球菌不产生触酶，与葡萄球菌不一样。微生物学球菌第37页

4.抗原结构分20个群，A群致病菌（溶血性链球菌或化脓性链球菌）依据蛋白抗原深入分类M抗原荚膜细胞壁蛋白质多糖肽聚糖细胞膜细胞质1）多糖抗原（C抗原）:群特异性抗原，细胞壁多糖组分。2）表面抗原或称蛋白质抗原：壁外菌毛样结构含M蛋白，位于C抗原外层，具型特异性，有近100种血清型。M抗原与致病性相关。3）P抗原或称核蛋白抗原：无特异性。微生物学球菌第38页5.抵抗力

普通链球菌均可在60℃被杀死，对惯用消毒剂敏感。在干燥尘埃中生存数月。乙型链球菌对青霉素、红霉素，四环素、杆菌肽和磺胺药都很敏感。微生物学球菌第39页

A群链球菌有较强侵袭力，产生各种外毒素和胞外酶。

1.致病物质

致病物质可分三大类：

细菌胞壁成份，胞壁上黏附素

外毒素

胞外侵袭酶类（二）致病性与免疫性微生物学球菌第40页1)胞壁成份

(1)黏附素，包含：

①脂磷壁酸（lipoteichoicacid,LTA）与生物膜有高度亲和力，是该菌定植在机体皮肤和呼吸道黏膜等表面主要侵袭原因。

②F蛋白（proteinF）位于化脓性链球菌细胞壁内，其结合区暴露在菌体表面，是纤维粘连蛋白（fibronectin,FBP）受体。有利于细菌定植和繁殖。微生物学球菌第41页LTA与链球菌黏附示意图微生物学球菌第42页(2)M蛋白（Mprotein）

是A群链球菌主要致病因子，含M蛋白链球菌含有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用；与一些超敏反应疾病相关。(3)肽聚糖

A群链球菌肽聚糖含有致热、溶解血小板、提升血管通透性和诱发试验性关节炎等作用。

微生物学球菌第43页2）外毒素类

(1)致热外毒素（pyrogenicexotoxin）

是人类猩红热主要毒性物质。致热外毒素抗原性强，含有超抗原作用，对兔有致热性和致死性。

(2)链球菌溶素（streptolysin）

溶解红细胞、破坏白细胞和血小板。

A族链球菌可分为两种溶血素（hemolysin）：

链球菌溶素O（SLO）：对哺乳动物多

种细胞有毒性作用

链球菌溶素S（SLS）：对白细胞和多

种组织细胞有破坏作用

微生物学球菌第44页3）侵袭性酶（invasiveenzyme）

A群链球菌可产生各种侵袭酶，是扩散因子。（1）透明质酸酶（hyaluronidase）：分解

间质内透明质酸，使病菌易扩散。（2）链激酶（streptokinase,

SK）：与葡

激酶类似，使血液中纤维蛋白酶原

变成纤维蛋白酶，溶解血块或阻止

血浆凝固，利于病菌扩散。（3）链道酶（streptodomase,SD）：亦称

链球菌DNA酶，降解DNA，使脓

液稀薄，促进病菌扩散。

微生物学球菌第45页2.所致疾病A群链球菌引发疾病约占人类链球菌感染90%淋巴管炎、蜂窝组织炎、扁桃体炎等。猩红热(3)超敏反应性疾病(1)化脓性感染(2)中毒性疾病风湿热急性肾小球肾炎微生物学球菌第46页3.免疫性

可刺激机体产生各种抗体，取得对同型链球菌特异性免疫力。型别间无交叉免疫。

抗M蛋白抗体有保护作用，不一样型M蛋白均可诱生γ-干扰素。

猩红热患者可建立牢靠同型抗毒素免疫。微生物学球菌第47页标本直接涂片镜检革兰阳性链球菌分离培养脓汁，血液，咽喉拭子与金葡菌判别与肺炎链球菌判别经典链球菌形态经典链球菌菌落必要时做：生化反应或药敏试验等(三)微生物学检验法微生物学球菌第48页血清学检验

抗O试验（ASOtest）：

链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生对应抗体ASO，当二者中和后，再加入SLO乳胶试剂，因病人血清中ASO量很多，未被中和抗体与乳胶试剂反应，产生凝集，为阳性；无凝集，为阴性。原理：中和试验，用SLO检测血清中ASO方法：间接凝集结果：效价大于400单位意义：活动性风湿热及肾小球肾炎辅助诊疗微生物学球菌第49页

主动治疗儿童链球菌感染，预防发生急性肾炎和风湿热。抗生素首选青霉素：用长期有效青霉素预防链球菌感染，对降低肾小球肾炎及风湿热发生有一定效果。(四)防治标准微生物学球菌第50页二、其它链球菌

（一）甲型溶血性链球菌：也称草绿色链球菌（streptococcusviridians）。因无多糖抗原，故不属于Lancefield血清学分类任何族。包含多个种，条件致病，可引发以下两种疾病：

1.龋齿（dentalcaries）：常由变形链球菌引发。

2.亚急性细菌性心内膜炎（subacutebacterialendocarditis,SBE）由此菌引发SBE占全部病例50%。微生物学球菌第51页

（二）B族链球菌又称无乳链球菌。可借居于正常妇女阴道和直肠，也借居在健康人鼻咽部，故可引发皮肤感染、心内膜炎、产后感染、新生儿败血症和脑膜炎。

（三）D族链球菌（条件致病菌）本菌包含粪链球菌、牛链球菌和马链球菌。D族链球菌正常借居在皮肤、上呼吸道、消化道和泌尿生殖道，偶然引发泌尿道感染、腹部化脓性感染、败血症和心内膜炎。身体虚弱和免疫功效低下者易感染。微生物学球菌第52页第三节肺炎链球菌

S.pneumoniae在自然界广泛分布，常借居于正常人鼻咽腔中，形成带菌状态，在机体抵抗力下降时引发疾病。主要引发大叶性肺炎，约占细菌性肺炎80%。微生物学球菌第53页

1.形态与染色G＋，双球菌矛头状：平面相对，尖面相背。有厚荚膜，无芽胞，无鞭毛。一、生物学性状微生物学球菌第54页2.培养特征营养要求较高：惯用血培养，菌落与甲链

相同；能自溶。生化反应：分解葡萄糖、乳糖和菊糖；胆

汁可溶菌。抵抗力：较弱微生物学球菌第55页3.抗原结构

(1)荚膜多糖抗原含有型特异性，可将肺炎链球菌分为84个血清型。

(2)其它抗原肺炎链球菌含有M蛋白和C多糖。C反应

蛋白（Creactiveprotein,CRP）不是

抗体，在炎症活动期（如风湿热）含量

增多。微生物学球菌第56页致病物质荚膜抗吞噬作用。所致疾病免疫性建立同型免疫，产生型特异荚膜多糖抗体大叶性肺炎。还可引发急性或慢性支气管炎、副鼻窦炎、中耳炎和儿童化脓性脑膜炎等。二、致病性与免疫性微生物学球菌第57页1.直接涂片镜检：G＋有荚膜双球菌2.分离培养：与甲链判别菊糖分解试验胆汁溶菌试验Optochin敏感试验动物试验肺炎球菌荚膜（×1000）“脐形”菌落三、微生物学检验法微生物学球菌第58页多价肺炎链球菌荚膜多糖菌苗预防治疗抗生素四、防治标准微生物学球菌第59页第四节奈瑟菌属Neisseria

奈瑟菌属对人有致病性有脑膜炎奈瑟菌(N.

meningitidis），

和淋病奈瑟菌（N.

gonorrhoeae)其余均为人类呼吸道正常菌群，偶而可引发脑膜炎和心内膜炎等。

G－双球菌，无鞭毛、芽胞，有菌毛。微生物学球菌第60页一、脑膜炎奈瑟菌N.meningitidis微生物学球菌第61页1.形态与染色

G－双球菌,肾形或豆形，无鞭毛、芽胞，有菌毛。2.分离培养

专性需氧菌

巧克力培养基（一）生物学性状微生物学球菌第62页3.抗原结构与分类荚膜多糖群特异性抗原分群外膜蛋白型特异性抗原分型脂寡糖抗原（lipooligosaccharide,LOS）核蛋白抗原4.抵抗力很弱四怕：热、严寒、干燥、消毒剂微生物学球菌第63页1.致病物质主要是内毒素——LOS2.所致疾病呼吸道传输，飞沫或接触流行性脑脊髓膜炎普通型暴发型慢性败血症型三种临床类型菌毛：粘附于黏膜上皮细胞，利于定植；荚膜：有抵抗吞噬作用；内毒素：可引发发烧、微循环障碍，严重者可致内毒素休克、血栓、DIC等。传染源：病人和带菌者（二）致病性与免疫性微生物学球菌第64页（三）免疫性

人对脑膜炎奈瑟菌抵抗力较强：机体感染后以体液免疫为主，血清中特异抗体能杀死脑膜炎奈瑟菌；抗体调理作用能增强吞噬细胞功效；分泌型IgA可阻止脑膜炎奈瑟菌对上呼吸道黏膜粘附。母体中IgG还可经过胎盘传给胎儿，故6个月内婴儿极少患流行性脑膜炎。微生物学球菌第65页1.标本3.分离培养与判定脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭子保暖、保湿、马上送检，培养基预温。2.直接涂片镜检中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，可作出初步诊疗。巧克力（色）培养基4.快速诊疗对流免疫电泳，SPA协同凝集试验（三）微生物学检验法微生物学球菌第66页预防：儿童注射流脑荚膜多糖疫苗治疗：抗生素（四）防治标准微生物学球菌第67页二、淋病奈瑟菌

N.g