食品卫生微生物学检验菌落总数测定

食品卫生微生物学检验菌落总数测定发布单位:太原市质量技术监督局报送时间:2007年12月19日 浏览次数:342附件1范围

食品卫生微生物学检验菌落总数测定

GB/T4789.2-2003本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。本标准适用于各类食品中菌落总数的测定。术语1mL(g只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。引用标准GB/T4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂设备和材料4.1 冰箱：0～4℃。均质器或灭菌乳钵。架盘药物天平：0g～500g0.5g。菌落计数器。4X。灭菌吸管：1mL（0.01mL）10mL（0.1mL）。灭菌锥形瓶：500mL。5mm。90mm。16X16。500mL。电炉。试管架。酒精灯。。灭菌镊子、灭菌刀或剪子等。培养基和试剂营养琼脂培养基：按GB/T4789.284.7磷酸盐缓冲稀释液：按GB/T4789.283.220.85%灭菌生理盐水。75%乙醇。检验程序菌落总数的检验程序如下。检样→2～31mL做成几个适当倍数的稀释液每皿内加入适量营养琼脂菌落计数36℃±1℃ 48h±2h报告操作步骤检样稀释及培养25mL25g225mL1均匀稀释液。8000r/min～10000r/min1min,做成1:10的均匀稀释液。1mL1∶101mL9mL1mL1011mL2～3101mL4646±1℃水15mL1mL的灭菌平皿内作空白对照36±148±2h。菌落计数方法做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。菌落计数的报告平板菌落数的选择30～3002每条链作为一个菌落计。稀释度的选择30～3001)。30～300223)。300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘14)。15)。16)。30～3003003030017)。菌落数的报告100100101例次10-1例次10-1稀释液及菌落数10-2两稀释液10-3之比菌落总数[cfu/g(mL)]报告方式[cfu/g(mL)]1多不可计16420-16400160001.6X1042多不可计295461.637750380003.8X1043多不可计271602.227100270002.7X1044多不可计多不可计313-3130003100003.1X105527115-2702702.7X1026000-<1X10<107多不可计30512-30500310003.1X104附件2GB/T4789.3-2003食品卫生微生物学检验大肠菌群测定范围本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。本标准适用于食品中大肠菌群的测定。术语大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。引用标准GB/T4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂设备和材料4.1 温箱：36±1℃。4.2 冰箱：0～4℃。4.3 恒温水浴：44.5±0.5℃。天平。显微镜。均质器或乳钵。90mm。试管。吸管。500mL。5mm。载玻片。酒精灯。试管架。培养基和试剂乳糖胆盐发酵管：按GB/T4789.284.9伊红美蓝琼脂平板：按GB/T4789.284.25乳糖发酵管：按GB/T4789.284.105.4 ECGB/T4789.284.11磷酸盐缓冲稀释液：按GB/T4789.283.22生理盐水。革兰氏染色液：按GB4789.282.2检验程序大肠菌群检验程序如下：（图略）稀释检样乳糖胆盐发酵管48h±2h产气大肠菌群阴性伊红美蓝琼脂平板48h±2h不产气报告革兰氏染色乳糖发酵管48h±2h革兰氏阳性革兰氏阴性无芽胞杆菌产气不产气报告操作步骤检样稀释25mLg225mL1∶108000～10000r/min1min1∶10匀稀释液。1mL1∶101mL9mL1∶1001mL101mL根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择三个稀释度，每个稀释3阳性管数0.1mL(g)X30.01mL(g)X3阳性管数0.1mL(g)X30.01mL(g)X3MPN100mL(g)95%可信限1mL(g)X3下限上限将待检接种于乳糖发酵管内，量在1mL者，用双料胆盐发酵管1mL用单料乳糖发酵管。每3置36±1℃内，培养24±2h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有者，则按下列程序进行。分离培养36±1然后取出，观察菌落形态，并做革兰氏染色和证实试验。证实试验1～236±1杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。报告根据证实为大肠菌群阳性的管数MPN100mL(g)大肠菌群的1)。000<30<59000130002600039001030<5130011600129001312002060021900221200231600309003113003216003319010040<520010170102101021101031501107010230111110303601121501131902009010360201140303702022002032603002304012003013907013003026401503800303950注1:本表采用3个稀释度[1mL(g)、0.1mL(g)、0.01mL(g)]，每稀释度三管2：2：10mL(g)、1mL(g)0.1mL(g)100.1mL(g)、0.01mL(g)、0.001mL(g)10倍。其余可类推。表GB/T4789.15-2003食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数范围本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。本标准适用于食品中大肠菌群的测定。引用标准GB4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂设备和材料3.1 冰箱：0～4℃。3.2 恒温培养箱：25～28℃。3.3 恒温振荡器。3.4 显微镜：10X～100X。架盘药物天平：0～500g0.5g。灭菌具玻塞锥形瓶：300。灭菌广口瓶：500mL。。灭菌吸管：1mL（0.01mL）10mL（0.1mL）。灭菌平皿。灭菌试管：16mmX160mm。载玻片、盖玻片。灭菌牛皮纸袋、塑料袋。灭菌金属勺、刀。培养基和试剂马铃薯-葡萄糖琼脂培养基，附加抗菌素按GB/T4789.284.78孟加拉红培养基：按GB/T4789.284.25灭菌蒸馏水。检验程序检样粮食块状食品粉状食品液状食品糊状食品25g+225ml25ml+225ml做成几个适当倍数的稀释液选择三个适宜稀释度，各取1mL加入灭菌平皿内每皿加入适量培养基（可先用马铃薯-葡萄糖琼脂附加抗菌素、高盐察氏培养基或孟培养基）菌落计数25℃～28℃ 5d报 告操作步骤以无菌操作将检样25mL(或g)放于含有225mL灭菌生理盐水的具塞锥形瓶中30min，即为1∶10稀释液。1mL1∶1010mL，注入灭菌试管中，另用1mL501mL1∶109mL1mL1：100101mL101液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿，然后将晾至45℃左右的培养基注入平皿25～28℃温箱中，3d5d。计算方法：10～150（或毫升）考GB/T4789.2。报告：每克（或毫升）食品所含霉菌和酵母数以cfu/g(mL)。食品卫生微生物学检验菌落总数测定发布单位:太原市质量技术监督局报送时间:2007年12月19日 浏览次数:342附件1范围

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GB/T4789.2-2003本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。本标准适用于各类食品中菌落总数的测定。术语1mL(g只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。引用标准GB/T4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂设备和材料4.1 冰箱：0～4℃。均质器或灭菌乳钵。架盘药物天平：0g～500g0.5g。菌落计数器。4X。灭菌吸管：1mL（0.01mL）10mL（0.1mL）。灭菌锥形瓶：500mL。5mm。90mm。16X16。500mL。电炉。试管架。酒精灯。。灭菌镊子、灭菌刀或剪子等。培养基和试剂营养琼脂培养基：按GB/T4789.284.7磷酸盐缓冲稀释液：按GB/T4789.283.220.85%灭菌生理盐水。75%乙醇。检验程序菌落总数的检验程序如下。检样→2～31mL做成几个适当倍数的稀释液每皿内加入适量营养琼脂菌落计数36℃±1℃ 48h±2h报告操作步骤检样稀释及培养25mL25g225mL1均匀稀释液。8000r/min～10000r/min1min,做成1:10的均匀稀释液。1mL1∶101mL9mL1mL1011mL2～3101mL4646±1℃水15mL1mL的灭菌平皿内作空白对照36±148±2h。菌落计数方法做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。菌落计数的报告平板菌落数的选择30～3002每条链作为一个菌落计。稀释度的选择30～3001)。30～300223)。30014)。15)。16)。30～3003003030017)。菌落数的报告100100101例次10-1例次10-1稀释液及菌落数10-2两稀释液10-3之比菌落总数[cfu/g(mL)]报告方式[cfu/g(mL)]1多不可计16420-16400160001.6X1042多不可计295461.637750380003.8X1043多不可计271602.227100270002.7X1044多不可计多不可计313-3130003100003.1X105527115-2702702.7X1026000-<1X10<107多不可计30512-30500310003.1X104附件2GB/T4789.3-2003食品卫生微生物学检验大肠菌群测定范围本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。本标准适用于食品中大肠菌群的测定。术语大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。引用标准GB/T4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂设备和材料4.1 温箱：36±1℃。4.2 冰箱：0～4℃。4.3 恒温水浴：44.5±0.5℃。天平。显微镜。均质器或乳钵。90mm。试管。吸管。500mL。5mm。载玻片。酒精灯。试管架。培养基和试剂乳糖胆盐发酵管：按GB/T4789.284.9伊红美蓝琼脂平板：按GB/T4789.284.25乳糖发酵管：按GB/T4789.284.105.4 ECGB/T4789.284.11磷酸盐缓冲稀释液：按GB/T4789.283.22生理盐水。革兰氏染色液：按GB4789.282.2检验程序大肠菌群检验程序如下：（图略）稀释检样乳糖胆盐发酵管48h±2h产气大肠菌群阴性伊红美蓝琼脂平板48h±2h不产气报告革兰氏染色乳糖发酵管48h±2h革兰氏阳性革兰氏阴性无芽胞杆菌产气不产气报告报告报告操作步骤检样稀释25mLg225mL1∶108000～10000r/min1min1∶10阳性管数MPN阳性管数MPN95%可信限用灭菌吸管1∶10灭菌生水或其他稀的试管内，试管混匀，做成1∶100的稀释液。1mL101mL根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择三个稀释度，每个稀释3乳糖发酵试验1mL1mL336±1℃温箱内养24±2h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者按下列程序进行。分离培养36±1然后取出，观察菌落形态，并做革兰氏染色和证实试验。证实试验1～236±1杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。报告根据证实为大肠菌群阳性的管数MPN100mL(g)大肠菌群的1)。1mL(g)X30.1mL(g)X30.01mL(g)X3100mL(g)下限上限000<30<59000130002600039001030<5130011600129001312002060021900221200231600309003113003216003319010040<520010170102101021101031501107010230111110303601121501131902009010360201140303702022002032603002304012003013907013003026401503800303950注1:本表采用3个稀释度[1mL(g)、0.1mL(g)、0.01mL(g)]，每稀释度三管2：10mL(g)、1mL(g)0.1mL(g)100.1mL(g)、0.01mL(g)、0.001mL(g)10倍。其余可类推。倍。其余可类推。1大肠菌群最可能数33GB/T4789.15-2003食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数范围本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。本标准适用于食品中大肠菌群的测定。引用标准GB4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂设备和材料3.1