园艺专业毕业生优秀2概述

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不同鲜食葡萄品种花粉生活力测定及贮藏特性研究

刘君丽指导教师李桂荣

（河南科技学院园艺园林学院，河南新乡453003）

摘要:[目的]花粉生活力的高低直接影响葡萄杂交育种效率的高低或成败。快速确凿测定不

同鲜食葡萄品种的花粉生活力，可为正确选择杂交组合和授粉时间等提供参考依据，也是保证杂交育种顺利进行的关键。[方法]以新鲜葡萄花粉为试材，用离体培养法测定花粉生活力，并探讨不同贮藏条件对鲜食葡萄花粉萌发的影响。[结果]通过镜检发现基拉尔花粉败育;不同品种的花粉生活力存在差异，自然阴干条件下供试品种花粉的生活力高低顺序为：郑州早红>芳香拉查基>瑞比尔>泽玉>京秀，其花粉生活力分别为50.41％、46.22％、43.04％、40.35％和24.13%，京秀与其它4个品种差异极显著。在不同的贮藏条件下，花粉生活力随着贮藏时间的延长而下降，不同的贮藏条件对其有很大的影响，适当的低温可有效延长花粉贮藏时间。其中-40℃萌发率最高，为最正确贮藏方法;在贮藏过程中，泽玉和京秀存在“短期被迫休眠现象〞。

关键字：鲜食葡萄，花粉，生活力，贮藏

StoragelifeandPollenViabilityTestofDifferenttable

grapeCultivars

AuthorLiuJun-liSupervisorLiGui-rong

(SchoolofHorticultureandLandscapeArchitecture,HenanInstituteof

ScienceandTechnology,XinxiangHenan453003)

Abstract：[0bjeetive]Theefficiencyandthesuccessorfailureofhybridizationforgrapewereinfluencedbypollen?sgerminationability．Hence，themethodsformeasuregrapepollen?sgerminationabilitywhichisquicklyandaccuratecouldprovidereferencesforcrosscombinationandpollinationtime．alsoitisthekeyforsuccessofbridization．[Method]Withthefreshpollensofgrapeasthetestedmaterials，determinationofpollenviabilitybytestingmethodofpollensculturedinvitro，andtheeffectsofdifferentstorageconditiononthepollengerminationoftable-

grapewerealsodiscussed.[Result]Itwasfoundthatkielarpollenabortionassayedundermicroscope．thepollenviabilityofdifferentofvarietiesaredifferent.Naturaldryingconditionstestedviabilityofpollenoftheorderfromhightolowis:zhengzhouzaohong>芳香拉查基>riber>zeyu>jingxiu,Thepollenviabilitywere50.41%,46.22%,43.04%,40.35%and24.13%.jingxiuandtheother4varietiesshowedsignificantdifference.Underdifferentstorageconditions,vitalityofpollenweregraduallydescendaslastofstoretime,differentstorageconditionshaveaimpactonits,thesuitablelowtemperatureeffectiveextensionthestoretimeofpollen.Thebestmethodstokeepvitalityofpollenat-40℃,thegerminationofpollenishigher；duringprocessofstorage,theappearanceof“compelleddormancyofshort-term〞wasexistofzeyuandjingxiu.

Keywords：table-grape，pollen，viability，storage

1引言

葡萄（Grapes），又名蒲桃、草龙珠、山葫芦、李桃，为葡萄科(VitaceaeLindley)葡萄属(VitisL．)，多年生落叶藤本植物，是世界上栽培最早、分布最广的果树之一，全球的葡萄业产值更是位居世界农产品第5位。随着我国果树产业的发展，葡萄跃升成为发展速度最快的果树种类之一，与香蕉、柑橘、苹果、梨和桃并称为我国六大水果。我国以栽培鲜食葡萄为主,它不仅味美可口，而且营养成分丰富，成熟的浆果中含糖量高达10%～30%，以葡萄糖为主，可被人体直接吸收，是世界性的重要水果

[1-2]

。还含有矿物质钙、钾、磷、铁

以及多种维生素，多种人体必需氨基酸。从中医的角度来说，葡萄性平，味甘酸，无毒，中医认为，葡萄可以“补血强智利筋骨，健胃生津除烦渴，益气逐水利小便，滋肾宜肝好脸色〞

[3-4]

。

杂交育种是葡萄新品种选育的重要途径。花粉生活力是确保杂交育种成功的一个重要

[5]

条件，花粉活力的高低直接影响其授粉、受精乃至坐果，因此在进行杂交育种工作之前，都必需要了解品种的花粉活力。由于不同葡萄品种的花期经常不一致，在杂交育种过程中，常涉及不同品种间花粉萌发率的高低以及同一品种花粉萌发率随贮藏条件变化的状况．有关葡萄花粉生活力贮藏条件的研究前人已有所报道，万怡震等

[6-7]

研究认为温度是花粉贮藏的主

[8]

要原因，枯燥条件下，贮藏温度越低，花粉的生活力下降越缓慢，贮藏期越长；杨传友等

研究认为低温对保持果树花粉生活力的效应极其明显。由于研究中所用鲜食葡萄品种单一、贮藏条件处理不全，有必要就不同葡萄品种花粉力的测定及在不同贮藏条件下花粉生活力变化做进一步研究。本试验以郑州早红、泽玉、京秀、瑞比尔、芳香拉查基、基拉尔6个鲜食

葡萄品种为试材，比较不同品种间花粉萌发率的高低以及同一品种花粉萌发率随贮藏条件变化的规律，为杂交育种父本的选择提供依据。

2材料与方法

2.1试验材料

供试材料为种植于河南省郑州果树所葡萄种质资源圃内采集的鲜食葡萄花粉，品种分别为郑州早红、芳香拉查基、瑞比尔、泽玉、京秀、基拉尔。

2.2试验方法

1.2.1花粉的采集与处理

2023年5月13日下午3-4点，从正常生长的葡萄植株上随机选取处于盛花期的葡萄花絮，放入塑料袋中用冰袋保鲜带回试验室。轻轻剥掉花瓣，取出花药，放在垫有硫酸纸的带盖培养皿中，及时剔除其中的杂质和破碎的花药，然后将培养皿放置在阴凉枯燥处阴干，室温条件下，经一定时间后花粉开裂，待花粉完全散出后根据试验设计使其处于不同环境条件下密闭枯燥保存，备用。1.2.2花粉培养

依照培养液配方配制培养基（琼脂8g/L+蔗糖200个/L+硼酸50mg/L），调理溶液pH值至5．7～5．8，将配制好的培养基倒入清白的培养皿中，制作发芽床，待凝固后，用牙签挑取花粉，轻轻振动，使花粉均匀地撒在发芽床上（避免出现重叠），使每个视野内50-100粒花粉，然后将滤纸放入培养皿盖中用水浸湿，盖在发芽床上保湿，最终贴上标签写明处理、播种日期。各处理在25±1℃，黑暗条件下培养。1.2.3不同贮藏处理对鲜食葡萄花粉生活力的影响

将采集的6种鲜食葡萄花粉阴干后装在离心管内，分别贮藏在以下环境：室温贮藏(25℃~30℃)：将装有花粉的离心管放入装有CaCl2枯燥器中密封，同时放在试验室的工作台上；5℃冷藏：将装有花粉的离心管放入装有CaCl2枯燥器中密封，同时放在冰箱5℃冷藏层内；0℃冷藏：将装有花粉的离心管放入装有CaCl2枯燥器中密封，同时放在冰箱0℃冷藏层内；-18℃冷冻贮藏：将装有花粉的离心管放入装有CaCl2枯燥器中密封，同时放在冰箱-18℃的冷冻层内；-40℃冷冻贮藏：将装有花粉的离心管放入装有CaCl2枯燥器中密封，同时放在超低温冰箱-4O℃的冷冻层内。分别贮藏5、10、15、20、25d后将花粉置于25(±1)℃、在培养箱内用所配制的培养基培养8h，在显微镜下进行观测花粉萌发率，每处理观测3个视野，每视野观测不少于50个花粉粒，花粉的耐贮藏力是以待测花粉活力保持时间即待测样自收集到花粉活力降为零的时间长度来表示。1.2.4花粉萌发的观测和统计

以花粉管长度超过花粉粒直径的1/2作为花粉萌发标准。在10×20倍光学显微镜下观测统计花粉的萌发数，并计算花粉的萌发率。花粉萌发率计算公式：花粉萌发率=(视野内萌发

的花粉数／视野内的花粉总数)×100％。每个试样观测3个不重叠视野，每个视野不少于50粒花粉，记录萌发花粉粒数和花粉总粒数。3个视野的平均值作为该培养皿的花粉萌发率。数据分析采用DPS和Exce1数据分析软件进行数据处理及Duncan新复极差多重比较分析差异显著性。

3结果与分析

2.1不同鲜食葡萄品种花粉生活力比较

表1葡萄不同品种间花粉生活力比较(％)

Table1ComparisonofpollenViabilityofdifferentgrapecultivars

品种生活力生活力差异显著性郑州早红50.41aA芳香拉查基46.22aA瑞比尔43.04aA泽玉40.35aA京秀24.13bB基拉尔0

注：小写字母表示在5％水平上差异显著；大写字母表示在1％水平上差异极显著。由于测定的花粉生活力数值有小于30％，因此需先作测定数值的反正弦转换，即sin?1p，然后进行单因素方差分析(F=10.072>F0.01=0.0016)，因差异极显著，再进行邓肯氏新复极差测验

[9-11]

，结果见表1。

由表1可知，将刚采集的各品种葡萄新鲜花粉在所配制的培养基上进行培养，8h后观测各葡萄品种花粉的萌发状况,观测结果显示:不同品种其萌发率存在差异，郑州早红、芳香拉查基、瑞比尔、泽玉4个品种的花粉生活力间差异不显著，但均与京秀间差异极显著。‘郑州早红’花粉生活力最高，平均萌发率为50.41%，‘京秀’的花粉生活力最低，平均萌发率为24.13%；‘基拉尔’花粉败育，未发现花粉萌发。

2.2不同贮藏条件对鲜食葡萄品种花粉生活力的影响2.2.1常温枯燥条件对花粉生活力的影响

图1常温枯燥条件下花粉生活力的变化

常温枯