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文档简介
三、实验归类:☻物质的鉴定与提取、分离实验
☻观察实验
☻有关酶的实验(生化)
☻生态调查及实验:
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定;DNA的提取与鉴定;叶绿体中色素的提取与鉴定
比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率;探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用;探索影响淀粉酶活性的三个条件
用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质的流动;观察植物细胞的有丝分裂;观察植物细胞的质壁分离与复原;植物向性运动的设计与观察
种群密度的取样调查;设计并制作小生态瓶;观察生态系统的稳定性并设计农业生态系统☻观察鉴定法:
☻示踪原子法:☻等组实验法:☻杂交实验法:☻化学分析法:
☻模拟实验法:还原性糖、蛋白质、脂肪的鉴定、植物细胞有丝分裂观察、叶绿体、细胞质的观察等。噬菌体侵染细菌的实验、用18O和14CO2追踪光合作用中氧原子和碳原子转移途径、3H标记亮氨酸追踪分泌蛋白的合成和分泌过程等。淀粉酶催化淀粉水解的实验,植物激素与向性。一对、两对相对性状的杂交遗传叶绿体色素的提取与分离、DNA的粗提取渗透作用的实验装置、分离定律的模拟实验等。归类方法二:四、中学生物实验包含的基本技术(1)玻片标本技术压片法装片法涂片法切片法取材解离漂洗染色制片(压片)观察例:有丝分裂;低温诱导染色体数目加倍材料在载玻片水滴中展平;染色放盖玻片从一侧慢慢盖在水滴上,防止气泡产生改变溶液浓度时从一侧滴,另一侧吸水纸吸(引流法)例:观察叶绿体;质壁分离和复原实验;制备细胞膜例:观察动物如人体血液中的细胞;观察DNA和RNA在细胞中分布(人体口腔上皮细胞)例:生物组织中脂肪鉴定鉴定试剂(鉴定化学反应,是否物质存在)试剂鉴定物质颜色变化斐林试剂苏丹Ⅲ(Ⅳ)试剂双缩脲试剂二苯胺试剂碘液重铬酸钾溶液(H+)溴麝香草酚蓝试剂还原糖(葡、果、麦芽糖)砖红色(要加热)脂肪橘黄色(红色)蛋白质紫色DNA蓝色(要加热)淀粉蓝色酒精二氧化碳橙色→灰绿色蓝→绿→黄高中生物实验中盐酸的作用总结①酶在不同PH下的活性:提供酸性环境(浓度不要求掌握的)
②15%15%的HCl和95%的酒精:解离液在观察根尖分生组织细胞的有丝分裂中,与酒精1:1混合,起解离作用
③8%在观察DNA和RNA在细胞中的分布中,改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合高中生物实验中酒精的作用总结1、50%的酒精溶液:用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。2、75%的酒精溶液:用于医学临床上的消毒灭菌。3、95%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。
5.1作用燃烧加热。5.2原理酒精是富含能量的有机物,燃烧能产生大量的热量。5.3应用此处包括各类必须加热的实验,如生物组织中还原糖的鉴定、比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率、探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用、DNA的粗提取与鉴定、温度对酶活性的影响、学习微生物培养的基本技术、自身固氮菌的分离等实验。高中生物中那些需要水浴加热的实验
1、用二苯胺鉴定DNA(沸水浴)
2、酵母细胞固定实验中煮海藻酸钠(热水浴70℃~80℃)
3、观察DNA和RNA在细胞中的分布这个实验中的水解(热水浴70℃~80℃)
4、探究温度对酶活性的影响(水浴调节温度)
5、用斐林试剂或班式糖定性试剂鉴定还原性糖(热水浴)
斐林试剂和双缩脲试剂的比较
相同点:①都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成;②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.1g/mLNaOH溶液。
不同点:①CuSO4溶液浓度不一样:斐林试剂乙液为0.05g/mLCuSO4溶液,双缩脲试剂B为0.01g/mLCuSO4溶液。②配制比例不一样。③使用方法不一样:斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用,双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后,再加入试剂B。④鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。⑤反应本质及颜色反应不一样。五、材料选择要满足实验要求:无色材料:还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定观察细胞中DNA、RNA的分布
有色材料:叶绿体中色素的提取和分离取选择新鲜绿观察植物细胞的质壁分离与复原高倍显微镜的使用和观察叶绿体
活材料:观察植物细胞的质壁分离与复原高倍显微镜的使用和观察线粒体高倍显微镜的使用和观察叶绿体
(观察植物细胞的有丝分裂)
五、材料选择满足实验要求:①可溶性还原性糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)鉴定中含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。不宜选择甜菜、甘蔗等,因为这些材料中主要的糖类为不具还原性的蔗糖;(淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。)②观察叶绿体和细胞质流动时,选择菠菜叶下表皮稍带叶肉(叶表皮细胞没有叶绿体,而靠近下表皮的叶肉细胞中含少而较大的叶绿体)或用藓类(叶片薄、叶绿体大),观察时应选择靠近叶脉部位细胞(叶脉附近细胞中水含量丰富,细胞质流动明显);五、材料选择满足实验要求:③观察有丝分裂实验时,选择幼小根尖或动物受精卵(减数分裂选择雄性生殖器官)④观察质壁分离和复原实验时,紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡),便于观察;⑤进行DNA提取和鉴定实验时不能选用哺乳动物红细胞作为材料;可选用鸡血、动物肝脏植物材料有:2.几种特殊的细胞的判断低等植物:有中心体、叶绿体、细胞壁等,常见类型——衣藻、绿藻、水绵根尖分生区细胞:无叶绿体、大液泡洋葱鳞片叶肉细胞:属于变态茎,因此无叶绿体植物表皮细胞:无叶绿体根尖成熟区(根毛)细胞:无叶绿体,有大液泡植物导管细胞:死细胞,只有细胞壁植物筛管细胞、血小板、哺乳动物成熟红细胞:无细胞核观察叶绿体的实验不适用质壁分离实验不适用在此类实验中常综合运用显微观察技术、染色技术、玻片标本制作技术等。归类如表:实验名称观察方式观察对象显微镜玻片标本染色剂生物材料用显微镜观察多种多样的细胞原色观察多种生物细胞高倍临时装片无真菌、植物细胞、动物细胞观察叶绿体叶绿体高倍临时装片藓类叶观察植物细胞的质壁分离和复原紫色大液泡低倍临时装片紫色洋葱表皮观察线粒体染色观察线粒体高倍临时装片健那绿人的口腔上皮细胞观察细胞的有丝分裂染色体高倍临时装片龙胆紫或醋酸洋红洋葱根尖脂肪的检测脂肪高倍临时装片苏丹III或苏丹IV花生种子观察细胞的减数分裂染色体高倍固定装片碱性染料蝗虫精母细胞物质提取和分离实验
实验内容
原理
试剂
结果叶绿体色素提取和分离
DNA的粗提取溶解度原理
丙酮、层析液色素及色素带杂质较少的DNA不同浓度的NaCl溶液、冷酒精以下为高中生物的部分实验内容:①检测生物组织中的还原糖 ②用高倍镜观察线粒体③检测生物组织中的脂肪④细胞大小与物质运输的关系⑤绿叶中色素的提取和分离 ⑥观察DNA和RNA在细胞中的分布⑦低温诱导植物染色体数目的变化⑧探究酵母菌细胞呼吸的方式请用序号回答下列相关问题:(1)在上述实验过程中始终保持生物活性的是
。。(2)在上述实验中,常用到酒精的实验有
。(3)在上述实验过程中,必须借助显微镜才能完成的是
,需要水浴加热的是
,为得出结论,需要借助颜色观察的是
。②⑧③⑤⑦②③⑥⑦①⑥
①②③④⑤⑥⑦⑧常用到盐酸的实验有①⑥⑦
DNA的粗提取与鉴定
原理:1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。
2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。
3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤:1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。2.溶解DNA:3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,顺时针方向搅拌,缓慢4.过滤:取黏稠物5.再溶解:顺时针方向搅拌,较慢。6.过滤:取滤液。7.提取出含杂质较少的DNA,顺时针方向搅拌,稍慢。8.DNA的鉴定:沸水浴5min(5)前后三次过滤时,所用纱布的层数分别是多少?为什么?
第一次用一层纱布,有利于核物质透过纱布进入滤液;第二次用多层纱布,能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液;第三次用两层纱布,既有利于DNA透过纱布,又能防止其它杂质透过纱布。
(6)若实验中所得黏稠物太少,其原因是什么?
第一次加蒸馏水过少,细胞未充分胀破;第二次加蒸馏水过多或过少;第一次过滤用了多层纱布;第二次过滤用了一层纱布;使用了玻璃烧杯。
(7)两次加入蒸馏水的目的分别是什么?
第一次是为了使血细胞吸水胀破;第二次是为了降低氯化钠的浓度,有利于DNA有析出。
(8)实验中搅拌溶液时,为何总要沿一个方向搅拌?
防止DNA分子受到损伤。
(9)两次析出DNA的方法分别是什么?原理分别是什么?
第一次是加蒸馏水,降低氯化钠的浓度,促使DNA析出;第二次是加入冷酒精,因为DNA不溶于酒精溶液
(10)三次溶解DNA的液体分别是什么?原理分别是什么?
第一次、第二次都是用浓度为2mol/L的氯化钠溶液,第三次用的是0.015mol/L的氯化钠溶液。其原理是DNA在氯化钠中的溶解度,是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化钠溶液和0.015mol/L的氯化钠溶液对DNA的溶解度都比较高。(11)鉴定DNA时为何要用两支试管?其现象分别是什么?
其中不加DNA的试管起对照作用。该试管溶液不变色,另一支加有DNA的试管溶液变蓝色。五、实验(设计)的原则(1)科学性原则(2)平行重复原则(6)单一变量原则(4)随机性原则(5)简便性原则(3)可行性原则(7)对照原则(1)科学性原则(金榜P12)实验原理的科学性实验材料选择的科学性实验方法的科学性实验结果处理的科学性(4)随机性原则(5)简便性原则材料易获取装置简单药品便宜操作简便,步骤少,时间短(消除系统误差,平衡无关变量)(6)单一变量原则实验变量与反应变量无关变量与额外变量自变量因变量(原因)
(结果)
实验目的在于获得和解释这种前因后果控制变量干扰变量
实验设计和操作中尽量减少无关变量(原因)(结果)(实验变量只有一个)金榜(40)(7)对照原则空白对照自身对照条件对照虽对实验对象施加某种处理,但这种处理是作为对照意义的,如甲状腺激素促进蝌蚪生长:
a.甲状腺激素----条件对照,
b.甲状腺抑制剂----条件对照,
c.不加任何药物----空白对照相互对照(排除无关变量的干扰,增加实验结果的可信度)金榜(31)金榜(128)金榜(89)主要方法---控制变量法生物的生命活动往往是错综复杂的,影响某一个生命活动的产生和变化常是多种因素。为了弄清变化的原因和规律,当研究多个因素之间的关系时,往往先控制住其它几个因素不变,集中研究其中单一因素变化所产生的影响,为控制变量法。这是研究问题时常用科学实验方法。六、探究性实验的设计思路金榜(67)实验设计(控制变量法)的常规解题思路明确实验目的分析实验
原理提出实验
思路设计实验
步骤预期实验
结果实验变量无关变量反应变量施加干扰操纵随机分组设置对照条件适宜重复实验控制观察现象测量数值检测金榜(67)无关变量实验变量反应变量实验组:对照组:操纵观察测量控制(消除或平衡掉)施加不施加分析得出结论假设——预期——现象——结论
结论分析:结论与预期是否符合?符合---得到肯定的答案
(往往是题目中要证明的)不符合---得到否定的答案
(与题目中要证明的相反)定性分析定量分析---肯定答案程度,找出变化的规律结论金榜(151)1423(2)几组对照实验?1与21与31与41与52与4(3)各组单一变量是?反应变量?(4)能得出什么结论?植物具有向光性;感光部位在尖端;胚芽鞘生长和弯曲与尖端有关5(1)结论:胚芽鞘具有向光生长特性(5)对照方式是什么?(6)如何控制无关变量?同种、生长状态相同、长度一致的胚芽鞘相同大小盒子,小孔大小、位置一致光线强弱一致、距离纸盒距离相等温度相同适宜每组胚芽鞘若干1.概述七、验证性实验的设计思路金榜(99)2.设计思路及方法则把提取、配制等操作作为第一步
如果是对照实验,首先必须弄清单一变量(实验变量)。一般性的设计如下:
(2)编组标号:实验组和对照组;控制无关变量,注意措词中的字眼:“相同”、“一致”等。如果有测量应测量记录初始值。
(3)实验处理:
(1)提取、配制:如果需要提取、配制、处理实验材料
研究对象、器皿等要编组标号,设立
分别对实验组和对照组施加单一变量;实验处理要遵循“单一变量,对照原则”。
(4)培养(饲养)、观察、记录:
措辞中依然要体现对无关变量的控制,常有“相同条件下”等字眼。1.概述八、调查类实验的一般步骤金榜(113)2.调查类实验的一般步骤
(2)选取的调查对象和范围一定要科学合理
(3)根据调查目的科学制定记录表格
(1)常用调查方法
针对某个事件发生率;某种生物的分布;某因素的影响
区别调查患病率与遗传方式时表格设计及书写方式的不同3.归纳总结注意1.选取实验材料应遵循的主要原则科学性、简便性九、观察类实验材料的选取与处理金榜(17)2.处理实验材料时的主要注意事项(1)观察细胞与细胞结构时:(2)借助显微镜观察的实验:给材料染色,以便区分背景和所要观察的结构一定要制成薄的装片,保证透光好,便于观察1.概述:其它类实验金榜(117)2.注意事项
(2)合理设计操作过程
(1)读懂实验题目,弄清设计要求十、给定条件类实验原理、设计实验方案已知实验目的、某些附加条件,写出实验十一、评价改进类实验金榜(123)1.概述:2.评价角度及改进技巧
(2)对实验步骤的评价与改进
(1)对实验材料用具的评价与改进对实验进行评价与改进
(2)对实验结果的评价与改进改良苯酚品红染液
改良苯酚品红染液配法顺序如下:原液A:取3克碱性品红溶于100毫升70%酒精中,此液可以长期保存。原液B:取A液10毫升加入90毫升5%苯酚(即石炭酸)水溶液中(2周内使用)。原液C:取B液55毫升加入6毫
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