自体在临床应用研究进展

异体胶(纤维蛋白胶) （fibrinsealant） 生物胶 1、自体纤维蛋白胶 自体胶 2、自体血小板胶

第一页，共25页。一、自体纤维蛋白胶

（Autologousfibrinsealant）是种使用方便、可吸收的自体血浆衍生物制品，其主要成分是：纤维蛋白原和凝血酶。纤维蛋白胶是由凝血酶、纤维蛋白原及钙联合形成的纤维蛋白，是一种局部止血剂。它作为一个完全成熟的止血剂应用在心脏、肝脏以及在肾脏手术中，也应用在软组织切开后防止血肿形成，还应用于血管吻合、肠吻合和瘘管关闭，应用于血友病病人的手术、腹腔镜下胆囊切除和其它内镜手术。第二页，共25页。（一）作用机理纤维蛋白原凝血酶可溶性单体因子Ⅷ、钙不溶性纤维纤维蛋白溶酶抗纤溶药纤维蛋白降解产物第三页，共25页。纤维蛋白原分子量为340000Da，在伸展的45nm结构中由两组多肽构成[(Aα,Bβ,r)2]。增加凝血酶原，酶A、B裂解，留下可溶性纤维蛋白单体（α,β,r)因子ⅩⅢ的出现，作为一个纤维蛋白稳定因子，纤维蛋白经过共价交联进而形成交联的纤维蛋白和纤维蛋白网。抗纤溶药物通常用来减少裂解率及降解产物。纤维蛋白单体的机械强度受下列因素影响：①纤维蛋白原的相对浓度；②凝血因子ⅩⅢ的含量；③纤维蛋白胶粘附蛋白含量。纤维蛋白原浓度越高，构成的网状系统越强，而较高比例凝血酶形成网状系统更迅速（强度与纤维蛋白原相关，而速度与凝血酶相关）。第四页，共25页。（二）制备方法两种方法：①从血浆中制备冷沉淀，进一步加工成自体纤维蛋白胶。②从血浆中分离纤维蛋白原，进一步加工成自体纤维蛋白胶。第五页，共25页。1、冷沉淀法制备自体纤维蛋白胶血浆单采法采集自体血浆500～600ml，-30℃冷冻成块状，4℃溶化，离心后再次-30℃冷冻成块，4℃溶化，离心，去除上清血浆，余50～60ml片状沉淀物，-30℃保存。应用时将其37℃水溶中溶化（纤维蛋白原浓度可达80mg/ml），与相同数量的凝血酶（500IU/ml）混合，在很多手术中都是一种成功的止血剂和组织粘合剂。第六页，共25页。2、纤维蛋白原法制备自体纤维蛋白胶①硫酸铵、聚乙二醇化学沉淀 采自身全血40～50ml于枸橼酸抗凝血试管中，分离出血浆，在血浆中加入硫酸钡和硫酸镁吸收去除血浆中的凝血酶原和凝血酶，加入30%聚乙二醇沉淀，离心后去除上清，余5ml左右片状沉淀，-30℃冷冻保存。使用时，37℃水溶溶化，与氯化钙和凝血酶（500IU/ml）的混合物，等量用于手术部位。第七页，共25页。②乙醇化学法沉淀 采集88ml枸橼酸钠抗凝全血，抗凝剂12ml。600g，10分钟离心，分离出血浆约50～58ml，加入5ml99%乙醇，0℃下孵育30分钟。600g，15分钟离心，去除上清液，余下5～6ml片状沉淀，-30℃冷冻保存。使用时，37℃水溶中溶化，与凝血酶（500IU/ml）等量混合用于手术部位。

腹腔、胸腔回收的血液因接触创伤组织引起了部分去纤维化，不能用于制备自体纤维蛋白胶。第八页，共25页。（三）临床应用1、止血剂自体纤维蛋白原同凝血酶分别装在不同的注射器中，同时应用在孤立的出血点，或喷射于广泛的渗血表面。2、组织粘合剂自体纤维蛋白胶作为组织黏合剂使用在：①鼓室成形术以及其他耳部的手术；②颌面和骨科的移植骨片的准备；③肌腱修复以及其他骨科修复手术；④硬脑膜撕裂及脑脊髓液渗漏的封闭；第九页，共25页。⑤黏合肠管、血管、神经；⑥皮瓣移植；⑦肾盂切开取石术。⑧黏合组织利于更早拔出引流，封闭瘘管以及减少积液形成；当纤维蛋白胶完全聚合后，能使组织层次靠近时限制组织粘连；⑨作为生物学上的基质，允许血管内皮化，促进内皮细胞以及烧伤表面角质化细胞的生长。第十页，共25页。（四）优点1、止血及组织黏合 作为黏合剂，自体纤维蛋白胶可以减少血液丢失并且有可能改善手术效果。也可以作为组织密封剂阻止液体丢失，并且促进组织黏合，消除潜在腔隙。因此，它能够缩短手术时间和减少并发症，增加成本效益比。第十一页，共25页。2、过敏反应少 在肝裂伤的患者中应用大剂量的异体纤维蛋白胶会引起严重的低血压，这是由于在敏感个体中，接解牛凝血酶或者血浆中的变态反应原造成的；致敏的IgA缺乏患者如果接解异体血浆产品也可能引发严重过敏反应。自体纤维蛋白胶很少有过敏反应发生。3、无传播疾病风险第十二页，共25页。（五）缺点 1、纤维蛋白原浓度低，纤维蛋白胶总量有限 自体纤维蛋白胶的纤维蛋白原浓度较低，弹力强度较异体纤维蛋白胶低。而且由于从患者采集的预存自体全血数量有限，因此可以得到的自体纤维蛋白胶的总量有限。 2、使用复杂，价格昂贵 在采血和加工处理过程中，需要大量的后勤协助，因此对很多输血技术人员和外科医师来讲，既难办到又昂贵。 3、异体产品发展成熟，自体产品难以开展第十三页，共25页。二、自体血小板胶

(Autologousplateletget，APG)（一）自体血小板胶与血小板 自体血小板胶始于20世纪90年代。将自体富含血小板血浆同凝血酶及氯化钙混合，即可得到自体血小板胶。其功能与血小板的生理特性及其激活后释放的多种生长因子密切相关，激活的血小板具有黏附、聚集及释放等生理特性，在止血及凝血过程中发挥着重要的作用。可用于手术中止血、封闭伤口与胸骨愈合，还可促进伤口部位软组织再生及组织修复。自体血小板胶可以释放出高浓度各类生长因子及纤维蛋白原进而发挥作用。因此，自体血小板胶在欧美国家临床应用逐渐增多，并扩展至很多方面。第十四页，共25页。（二）止血机制自体血小板胶是模拟人体凝血反应最后阶段，当各种成分混合后，凝血酶将纤维蛋白原水解成纤维蛋白单体，并在因子Ⅷ、Ca2+作用下，聚集形成稳定的纤维蛋白多聚体，从而在手术中发挥止血及封闭组织创面的功能，纤维蛋白网提供基质和间皮趋化活性物质，从而利于纤维母细胞长入、新生毛细血管形成及肉芽组织生成，以促进伤口愈合。第十五页，共25页。（三）制备方法采集全血用3.8%枸橼酸钠抗凝，在室温下580g，8分钟离心，血浆的下三分之一为富含血小板血浆富含血小板血浆第十六页，共25页。在使用自体血小板胶之前，自体富含血小板血浆需要与激活剂（由牛凝血酶与10%氯化钙混合制成）按5:1比例混合、摇匀，经过14～18秒后即制成具有黏性的胶状凝块的自体富含血小板血浆凝胶。APG配方见表。第十七页，共25页。自体血小板凝胶配方自体富含血小板血浆容量（ml）凝血酶（IU）10%CaCl2溶液容量(ml)1050000.2520100000.5030150000.7540200001.0050250001.25100500002.50第十八页，共25页。制作程序1、使用前准备 （1）采集所需容量的富含血小板血浆，并置无菌干燥容器内备用。 （2）按表配方将凝血酶和氯化钙混合物，至另一无菌干燥容器中备用。2、使用时 （1）将富含血小板血浆和氯化钙/凝血酶混合物抽入双筒注射器的两个筒内。注射器针头略放平，使液体以喷雾状而非喷流状从注射器中排出。 （2）使用时把注射器中内容物同时喷洒到手术部位。 （3）1～2分钟后见一不透明胶膜。 （4）可根据止血需要重复喷雾。第十九页，共25页。（四）临床应用1、在心脏外科的应用 心脏外科手术是自体血小板胶最早应用的领域之一。将自体富含血小板血浆、Ca2+及凝血酶喷洒在手术创面，能模拟人体自体凝血反应的最后阶段，将纤维蛋白原转化成纤维蛋白多聚体，从而产生止血、封闭手术伤口及促进胸骨愈合。第二十页，共25页。2、在骨科的应用 在骨折愈合过程中，自体血小板胶所含的各类生长因子起到至关重要的作用。转化生长因子-β可增加细胞外骨基质，并且调节骨与软骨形成；血小板生长因子，在骨愈合的诱导阶段及传导阶段发挥重要作用。因此，自体血小板胶联合自体骨移植材料，可以促进骨骼生长、加速骨折愈合。第二十一页，共25页。3、促进伤口愈合 伤口愈合过程极其复杂，生长因子作为一种信使可以调节整个过程。自体血小板胶中的血小板生长因子，能刺激成纤维细胞和单核细胞增殖和趋化，而且在皮肤伤口中促进肉芽组织形成，在眼科中对人视网膜神经胶质细胞有促进有丝分裂和趋化性作用；而转化生长因子-β参与多种细胞的趋化、增殖及分化，并对创伤后上皮再生、间质增生及血管形成起作用，有利于伤口愈合中细胞的增殖和移行。第二十二页，共25页。4、抗炎、止痛 冠状动脉搭桥手术的患者，在血管桥处（乳内动脉和大隐静脉），由于局部血液循环障碍，可引起组织水肿、感染和疼痛等并发症。局部应用自体血小板胶后，可明显减轻患者疼痛、