微生物消毒与灭菌

微生物消毒与灭菌1第1页，共89页，2023年，2月20日，星期四

在医学、兽医学以及工农业生产实践中，常采用多种物理、化学或生物学的方法来抑制或杀灭物体上和环境中的病原微生物或所有微生物，以切断传播途径，从而控制或消灭传染病，抑制食品、畜产品和生物制品等物品中的微生物生长繁殖，防止其腐败。有关抑制或杀灭微生物的基本方法有以下几种。2第2页，共89页，2023年，2月20日，星期四1.灭菌（sterilization）指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。2.消毒（disinfection）指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。3.防腐（antisepsis）指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。微生物不一定死亡。4.无菌（asepsis）指没有活的微生物的状态。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法，称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌操作。3第3页，共89页，2023年，2月20日，星期四第一节物理消毒灭菌法

4第4页，共89页，2023年，2月20日，星期四物理因素对微生物的影响物理因素温度辐射干燥超声波微波滤过除菌高温低温5第5页，共89页，2023年，2月20日，星期四一、热力灭菌法高温对微生物虽具有明显的致死作用，但不同种类的微生物对热的敏感性有明显的的差异，细菌繁殖体最为敏感，其次是真菌和病毒，细菌的芽孢对热有很强的抵抗力。6第6页，共89页，2023年，2月20日，星期四热力灭菌的原理——破坏菌体蛋白质、核酸和酶系统而致死微生物。热力使蛋白质中的氢键破坏使之变性或凝固，使双股DNA分开为单股，受热活化的核酸酶使单股的DNA断裂，导致细菌死亡

影响高温灭菌的因素：细菌对高温的耐受性与细菌种类、发育时期、菌体浓度及细菌所处介质有关。7第7页，共89页，2023年，2月20日，星期四热力灭菌法分类：干热灭菌和湿热灭菌两种方法。二者比较：在同一温度下，后者效力比前者为大。原因：（1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固；（2）湿热的穿透力比干热大；（3）湿热的蒸汽有潜热存在。8第8页，共89页，2023年，2月20日，星期四

热力灭菌法

高温杀灭细菌焚烧----最彻底的灭菌方法烧灼（火焰灭菌法）----直接用火焰灭菌方法干烤（热空气灭菌法、干热灭菌法）----

加热160-180℃2小时干热灭菌法红外线9第9页，共89页，2023年，2月20日，星期四(2)火焰灭菌法:火焰直接烧灼，用于接种环(针)和试管口或瓶口的灭菌。。(1)焚烧法：用火焚烧，是一种彻底的灭菌方法，仅适用于废弃的污染物品和有传染性的动物尸体等。10第10页，共89页，2023年，2月20日，星期四(3)干烤（热空气灭菌法、干热灭菌法）灭菌对象：为玻璃器皿、金属器械及不宜遇水的油、脂、凡士林等。方法——160℃（160－170℃），1－2h（180℃纸、棉塞就可烧焦）11第11页，共89页，2023年，2月20日，星期四缺点——穿透力差，故需高温、长时间（繁殖体100℃，1.5h杀灭；芽孢140℃，2h可杀灭）——160－170℃，1－2h可杀死繁殖体和芽孢。①降到室温（60℃）后再取物品注意事项②温度不能超过170℃③物品不宜包、放过紧过厚、帖壁12第12页，共89页，2023年，2月20日，星期四电热干燥箱13第13页，共89页，2023年，2月20日，星期四湿热灭菌法高压蒸汽灭菌法最有效的灭菌方法121℃20~30分钟煮沸消毒法水煮100℃5分钟(繁殖体)~2小时(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法间歇蒸汽灭菌法水蒸汽100℃15~30分钟(繁殖体)反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌较低的温度（61℃30分钟）杀灭致病菌14第14页，共89页，2023年，2月20日，星期四方法：温度在100℃左右，煮沸10～20min可杀死所有细菌的繁殖体，芽胞常需煮沸1～2h才被杀死。若在水中加入2-5%酚，则10-15min可杀灭芽胞；若在水中加入1-2%Na2CO3，可提高沸点既可促进芽胞的摧毁，亦可防止金属器械生锈。应用：灭菌对象:饮水、玻璃器皿、外科器械(1)煮沸灭菌:15第15页，共89页，2023年，2月20日，星期四煮沸消毒器16第16页，共89页，2023年，2月20日，星期四

(2)巴氏消毒法：以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法。

①低温维持巴氏消毒法

63～65℃30min

②高温瞬时巴氏消毒法

71～72℃15s

；迅速冷却10℃以下（冷击法）

③超高温巴氏消毒法

132℃管道

1～2s

；迅速冷却——常温保存半年。

17第17页，共89页，2023年，2月20日，星期四

(3)流通蒸汽消毒法：又叫常压蒸汽消毒法，用普通蒸笼或阿诺氏（Arnold）流通蒸汽灭菌器，在1个大气压下，用100℃左右的水蒸汽，30min，可杀灭繁殖体。不杀芽孢和霉菌的孢子。用于食品、食具及不耐用高温的物品消毒。如敷料、糖培养基、半乳糖培养基18第18页，共89页，2023年，2月20日，星期四(4)间歇灭菌法（反复多次流通蒸汽）利用连续3次的流通蒸汽消毒法，达到彻底灭菌的目的。即将待灭菌物品放入蒸笼（灭菌器）内，加热（约100℃）15-30min，取出置室温(或37℃)24h，次日重复灭菌。连续3次。用于一些不宜100℃以上温度灭菌物质，以达到杀灭芽胞的目的。常用于含糖、半乳糖、牛乳、血清等培养基的灭菌。19第19页，共89页，2023年，2月20日，星期四（5）高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌器：15磅（0.105MPa），/平方英寸，121.3℃温度下维持15～20min。应用此法灭菌，一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等。20第20页，共89页，2023年，2月20日，星期四高压蒸汽灭菌器手提式立式21第21页，共89页，2023年，2月20日，星期四22第22页，共89页，2023年，2月20日，星期四

二、辐射灭菌法辐射－－是能量通过空间传递的一种物理现象。能量可借波动或粒子高速运行而传播。用于灭菌的辐射可分为两种。电离辐射－－α、β、γ、x射线及高能中子、质子等。非电离辐射－－可见光、日光、紫外线等。辐射的杀菌作用－－随波长的降低而增强。①紫外、x、γ－－杀菌增强②可见光、红外线－－作用弱紫宇宙线γx可见红外无线电波23第23页，共89页，2023年，2月20日，星期四(一）非电离辐射

1.可见光线可见光线是指在红外线和紫外线之间肉眼可见的光线，其波长400－800nm。可见光线对微生物一般无多大影响，但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖，故培养细菌和保存菌种，均应置于阴暗之处。光感作用（photosensitization）－－某些染料（结晶紫、美蓝、伊红、汞溴红、沙黄等）加入培养基中，能增强可见光的杀菌作用。光感作用原生动物、细菌、病毒、噬菌体等均有灭活作用。G＋菌对光感作用比G－菌敏感，美蓝、伊红、汞溴红因作用于G＋菌，而沙黄作用于G－菌。24第24页，共89页，2023年，2月20日，星期四2.阳光直射日光有强烈的杀菌作用，日光是天然杀菌因素细菌日光直射－－30min—数小时死亡。碳疽芽孢－－直射－－20h死亡影响日光杀菌的因素（烟尘、玻璃、有机物、空气中的水分、温度），日光的杀菌效力因地、因时及微生物所处环境不同而异。25第25页，共89页，2023年，2月20日，星期四3.紫外线杀菌原理－－波长为100－400nm，以254nm杀菌力最强，短波紫外线灯为253.7nm。

①杀菌作用－－细菌DNA对紫外线的吸收高峰在265－266nm之间，O2O3O–氧化能力强的氧原子--杀菌②诱发变异－－使DNA分子结构改变而诱发变异（影响核酸同链上的胸腺嘧啶共价键结合形成胸腺嘧啶二聚体，从而干扰了DNA的复制和转录）方法－－紫外线灯－－照射－－杀菌应用－－手术室、病房、无菌室、实验室消毒（G-、G+）26第26页，共89页，2023年，2月20日，星期四光复活现象：微生物经致死量的紫外线照射后，若在3h内在遇到可见光照射，部分微生物可以恢复其活力，这种现象称之。影响因素－－时间、强度、距离（一般要求距地面2m，时间1－2h，1W／m2）紫外线作用的特点：

①穿透力弱，只能用于房间空气、物体表面消毒；

②对眼睛角膜和皮肤有损伤作用，工作人员切勿在紫外线灯照射下进行操作。

③杀菌效果与照射时间，距离和强度有关；27第27页，共89页，2023年，2月20日，星期四(二）电离辐射具有较高的能量和穿透能力－产生极强的致死效应。

①

射线：电离辐射强，穿透力差（缺乏穿透力，不实用）②射线：电离辐射强，穿透力强

③

射线：电离辐射弱，穿透力强，仅有抑菌作用和微弱的杀菌作用。④X射线：杀菌力不如紫外线，穿透力强28第28页，共89页，2023年，2月20日，星期四用途：忌热塑料制品物品（注射器、试管、吸管等）的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面

杀菌机制：射线使水电离为H＋和OH－，这些游离基是强烈的还原剂和氧化剂，可直接作用于细菌本身。29第29页，共89页，2023年，2月20日，星期四（三）红外线利用红外线烤箱灭菌，红外线是波长为0.77-1000μm的电磁波，尤以1-10μm波长的热效应最高。多用于医疗器械的灭菌30第30页，共89页，2023年，2月20日，星期四（四）微波从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。微波灭菌，主要是利用微波的加热作用完成。灭菌物品放在微波照射的交变电场中时，物品内部的分子随着电场的变化而相应的旋转振动起来，电场变化快，分子振动也就跟着快；由于分子间的相互作用力即产生摩擦力，因此分子克服其摩擦力而产生热量，使整个物品则热起来，起到了摩擦加热灭菌的作用。这种灭菌法，所需时间短、加热均匀是其显著的优点。主要用于陶瓷、耐热玻璃容器和塑料器皿，金属器皿忌用。31第31页，共89页，2023年，2月20日，星期四三、超声波杀菌法频率在20000～200000Hz声波称为超声波。超声波虽可使菌体裂解死亡，但往往有残存者，又因超声波费用颇大，故未应用于消毒灭菌。目前主要用于裂解细胞，提取细胞组分，研究其抗原、酶类、细胞壁的化学性质以及从组织内提取病毒等。32第32页，共89页，2023年，2月20日，星期四超声波主要通过四方面的作用达到杀菌目的：震荡：使微生物细胞内含物强烈震荡而被破坏氧化杀菌：因在水溶液中超声波能产生过氧化氢产生热效应：破坏细胞的酶系统；空（腔）化作用：即在液体中形成许多真空状态的小空腔，空腔崩破产生的巨大压力使细胞裂解。33第33页，共89页，2023年，2月20日，星期四四、过滤除菌法滤过除菌:通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒、霉形体以及细菌L型等小颗粒。应用：

①细菌滤器－－不耐热物品的灭菌（如不耐高温的营养液、血清、毒素、抗生素、V、酶、维生素等）

②空气除菌－－超净工作台；SPF动物的饲养；GMP厂房的洁净度（四级）34第34页，共89页，2023年，2月20日，星期四35第35页，共89页，2023年，2月20日，星期四滤菌过程36第36页，共89页，2023年，2月20日，星期四37第37页，共89页，2023年，2月20日，星期四五、干燥及低温抑菌法1.干燥干燥可致微生物死亡

干燥－－缺水－－生化反应受阻－－新陈代谢障碍－－死亡。甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。各种微生物对干燥的耐受性差异很大巴氏杆菌、淋球菌、鼻疽杆菌－－几天破伤风、碳疽芽孢－－几年、几十年霉菌孢子－－抵抗力很强应用：主要用于菌种和食品的保藏。38第38页，共89页，2023年，2月20日，星期四2.低温对微生物的影响

细菌对寒冷的抵抗力较强。因此，低温不能用于灭菌。(1)微生物对低温有较强的抵抗力：微生物

低温

代谢活动降低，生长繁殖停止，可长期维持生命

T升高到适宜

苏醒——生长繁殖39第39页，共89页，2023年，2月20日，星期四①低温常用于保存菌种。但是，反复冻融对微生物不宜。各种细菌对低温的抵抗力亦不同。（细菌、酵母菌、霉菌0－4℃；病毒、某些细菌－20－－70℃，最好在液氮中（－196℃）可长期保存；但是巴氏杆菌、脑膜炎双球菌等低温敏感，低温比在室温中死亡更快。）②冷冻保存食品——细菌生长繁殖停止应用40第40页，共89页，2023年，2月20日，星期四（2）冷冻真空干燥法

①方法——低温（-40℃）——迅速冻结，抽出空气，真空状态下迅速脱水干燥—可维持生命达数年②加保护剂——脱脂奶粉或不含相应抗体的血浆或血清（10－50％）③注意事项——细菌、真菌不宜长期冰冻保存——尤其是反复冻融对任何微生物都有很大的破坏力。41第41页，共89页，2023年，2月20日，星期四在低温状态下真空抽去水分用途：保存菌种冷冻真空干燥法：42第42页，共89页，2023年，2月20日，星期四冷冻干燥机43第43页，共89页，2023年，2月20日，星期四第二节化学消毒法防腐消毒剂：许多化学药物能够抑制或杀死微生物，已广泛用于消毒、防腐，统称为防腐消毒剂。消毒剂它在杀灭病原微生物的同时，对动物体的组织细胞也有损害作用。消毒剂（disinfectant）：用于杀灭物体上病原体的化学药品防腐剂（antiseptic）：用于抑制微生物生长繁殖的化学药品或称抑菌剂。消毒剂和防腐剂区别：无严格的界限44第44页，共89页，2023年，2月20日，星期四化学治疗剂：用于消除宿主体内病原微生物或其他寄生虫的化学药物称为化学治疗剂。化学治疗剂对于宿主和病原微生物的作用具有选择性，它们使其生命活动受到抑制或使其死亡，而对宿主细胞毒副作用甚小。消毒剂与治疗剂的区别：对宿主组织细胞的作用。

消毒剂特点：在杀灭病原微生物的同时，对肌体的组织细胞也有损害作用。因此，只用于局部（少数不被吸收可由于消化道）、器械、环境。治疗剂特点：对宿主和病原微生物作用有选择性，对宿主细胞副作用很小。可全身用药45第45页，共89页，2023年，2月20日，星期四一、消毒剂的种类及应用46第46页，共89页，2023年，2月20日，星期四(一)常用消毒剂种类

种类繁多－－消毒目的、对象、特点进行选择

酸类消毒剂碱类消毒剂其它消毒剂H+OH--SH醇脱水Hg47第47页，共89页，2023年，2月20日，星期四1、酸类消毒剂无机酸（三大强酸）：具有腐蚀性。但硼酸腐蚀性较小（杀菌力亦弱），常用1-2%硼酸用粘膜消毒。有机酸：如甲酸，醋酸，乳酸等均有杀菌作用，常用乳酸水蒸气或溶液杀灭细菌或病毒。48第48页，共89页，2023年，2月20日，星期四

2、碱类消毒剂碱类消毒剂对所有细菌及芽胞和病毒都有杀灭作用。尤其常用于病毒的消毒：

10-20%石灰乳

20-30%草木灰水

1-3%NaOH49第49页，共89页，2023年，2月20日，星期四3、其它常用消毒剂0.1%升汞用于非金属器械消毒0.1%KMnO4和3%H2O2用于粘膜和创伤消毒70－75%乙醇用于体表和体温表的消毒1－3%碘液用于皮肤、粘膜消毒5－10%碘液可杀灭放线菌50第50页，共89页，2023年，2月20日，星期四0.2－0.5%过氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纤维消毒及皮肤消毒。

3－5%酚、3-5%来苏儿用于环境消毒或空气消毒。甲醛杀菌力较强，常用于器械消毒。40%甲醛溶液用于烈性传染病的消毒，4－10%甲醛溶液浸泡30min可杀灭繁殖体及真菌。20%甲醛溶液浸泡6h以上，可杀灭芽胞体。消毒房间：15－25ml福尔马林/m³加等量水薰蒸或加入KMnO4。要求湿度60－80％；

KMnO421g（15）＋甲醛42ml（30），24h。51第51页，共89页，2023年，2月20日，星期四（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度类别作用原理消毒剂名称方法与浓度酸与碱以H+、OH-的解离作用妨碍菌体代谢，杀菌力与浓度成正比醋酸乳酸烧碱生石灰草木灰5～10ml/m3加等量水蒸发，空间消毒。蒸汽熏蒸或2%溶液喷雾，用于空气消毒2%～5%的苛性钠溶液（60～70℃）消毒厩舍、饲槽、用具、车辆等。用10%乳剂消毒厩舍、运动场等。用10%草木灰水煮沸2h，过滤，再加2～4倍水，消毒厩舍、运动场等。卤族元素以氯化作用、氧化作用破坏-SH基，使酶活性受到抑制产生杀菌效果漂白粉碘酊用5%～20%的混悬液消毒畜禽舍、饲槽、车辆等；以0.3～0.4g/kg的剂量消毒饮水。2%～5%的碘酊用于手术部位、注射部位酚类使菌体蛋白变性或凝固石炭酸3%～5%用于器械、排泄物消毒。52第52页，共89页，2023年，2月20日，星期四（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度续醇类使菌体蛋白变性沉淀乙醇用70%～75%的乙醇作皮肤消毒，也用于体温计、器械等消毒。醛类能与菌体蛋白的氨基酸结合，起到还原作用福尔马林1%～5%甲醛溶液或福尔马林气体熏蒸法消毒畜舍、禽舍、孵化器等用具和皮毛等。重金属盐类能与菌体蛋白质（酶）的-SH基结合，使其失去活性；重金属离子易使菌体蛋白变性升汞硫柳汞0.01%水溶液用于消毒手和皮肤；0.05%～0.1%用于非金属器皿消毒。0.1%溶液可作皮肤消毒；0.01%适于作生物制品的防腐剂。氧化剂使菌体酶类发生氧化而失去活性过氧乙酸用3%～10%溶液熏蒸或喷雾，一般按每平方米空间0.25～0.5ml用量，适于畜禽舍空气消毒。烷化剂能与菌体蛋白发生烷化环氧乙烷在密闭条件下，每平方米用700～900mg,消毒24h，适于皮毛、裘皮、电动和光学仪器及医用胶手套等消毒。53第53页，共89页，2023年，2月20日，星期四（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度续表面活性剂阳离子表面活性剂能改变细菌胞浆膜的通透性，甚至使其崩解，使菌体内的物质外渗而产生杀菌作用；或以薄层包围胞浆膜，干扰其吸收作用新洁尔灭(溴苄烷铵)0.5%的水溶液用于皮肤和手的消毒；0.1%用于玻璃器皿、手术器械、橡用品的消毒；0.15%～2%用于禽舍空喷雾消毒；0.1%可用于种蛋消毒(40～43℃

3min)。度米芬(消毒宁)对污染的表面用0.1%～0.5%喷洒，作用10～60min；浸泡金属器械可在其中加入0.5%亚硝酸钠防锈；0.05%溶液用于食品厂、奶牛场的设备、用具消毒。洗必泰（双氯苯双胍乙烷）0.02%水溶液可消毒手；0.05%溶液冲洗创面，也可消毒禽舍、手术室、用具等；0.1%用于手术器械的消毒、食品厂器具、设备的消毒。消毒净0.05%～0.1%水溶液用于皮肤和手的消毒，也可用于玻璃器皿、手术器械、橡胶用品等的消毒，一般浸泡10min即可54第54页，共89页，2023年，2月20日，星期四（二）理想消毒剂的条件种类很多，其杀菌作用亦不相同，一般可根据用途与消毒剂特点选择使用。最理想的消毒剂应是杀菌力强、价格低、无腐蚀性、能长期保存、对动物无毒性或毒性较小、无残留或对环境无污染的化学药物。55第55页，共89页，2023年，2月20日，星期四（三）消毒剂的杀菌机制复杂而多样，根据对菌体的作用大致可分为:①使菌体蛋白变性、凝固及水解。药物与菌体蛋白质结合－－变性（金属离子＋、蛋白质－）－－变性或沉淀--（金属盐、醇类）与蛋白质的氨基酸结合－－蛋白质脱水凝固变形（醛类）使菌体蛋白质水解－－中和蛋白质电荷--破坏其胶体稳定性而沉淀（碱或酸类）改变DNA分子结构－－染料类（结晶紫）56第56页，共89页，2023年，2月20日，星期四②损伤胞浆膜降低菌细胞的表面张力，使胞浆膜通透性增加，菌体破裂溶解。表面活性剂和酚（石炭酸、来苏儿、醇类等脂溶剂）③干扰细菌的酶系统和代谢（与菌体内的酶类结合，影响细胞代谢或酶丧失活性）。使酶蛋白中的－SH改变二硫键，使酶失去活性－－氧化剂（高锰酸钾、过氧化氢、碘酊、漂白粉）、金属盐类（汞、银）57第57页，共89页，2023年，2月20日，星期四④改变核酸的功能如：染料龙胆紫可嵌入菌细胞双股DNA邻近碱基对中，改变DNA分子结构，使细菌生长繁殖受到抑制或死亡。58第58页，共89页，2023年，2月20日，星期四二、影响消毒剂作用的因素消毒剂种类浓度作用时间细菌菌龄种类

环境有机物温度酸碱度59第59页，共89页，2023年，2月20日，星期四（一）影响消毒剂作用的因素1.消毒剂的性质、浓度与作用时间2.环境中的有机物的存在（对细菌有保护作用、与消毒剂发生反应）意义：3.微生物的种类和特性－－广谱、交替（G+、繁殖体、幼龄菌）清创、清扫－最好的预防药物60第60页，共89页，2023年，2月20日，星期四4.温度与酸碱度的影响温度：升高18－20℃；石炭酸升高10℃，杀菌效果提高5－8倍PH值：一般为电离的分子较易通过C膜，杀菌效果好。碱性溶液中，阳离子去污剂杀菌力强；酸性溶液中，阴离子去污剂杀菌力强。例如戊二醛本身呈中性，其水溶液呈弱酸性，当加入碳酸氢钠后才发挥杀菌作用。新洁尔灭的杀菌作用是pH愈低所需杀菌浓度愈高，如在pH3时，其所需杀菌浓度较pH9时要高10倍左右。61第61页，共89页，2023年，2月20日，星期四5.消毒剂的相互颉颃：

阴离子清洁剂肥皂与阳离子清洁剂苯扎溴铵共用6.影响消毒效果的其他因素 还有湿度、穿透力、表面张力及颉抗物质等。62第62页，共89页，2023年，2月20日，星期四第三节抗生素和细菌素的杀菌作用

自然界中各种微生物之间，或是在微生物与高等动植物之间，经常呈现相互影响的作用，如寄生、共生和颉抗现象等。导致颉抗的物质基础是抗生素、细菌素等细菌的代谢产物。此外植物中也存在杀菌物质如黄连素(小蘖碱)，噬菌体则是可杀灭细菌的活的微生物。63第63页，共89页，2023年，2月20日，星期四1、抗生素(antibiotics)

某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死另一些微生物的物质称为抗生素。主要来源:放线菌(如链霉菌)，少数来源于某些霉菌(如青霉菌等)和细菌(如多黏菌素)，有些亦能用化学方法合成或半合成。到目前为止，已发现的抗生素达2500多种，但其大多数对人和动物有毒性，临床上最常用的抗生素只有几十种。64第64页，共89页，2023年，2月20日，星期四抗生素的作用原理①抑制细菌细胞壁的合成。如青霉素、头孢类②影响细菌细胞膜的通透性。多粘菌素、杆菌肽③抑制菌体蛋白质的合成。如氯、四、糖苷类④抑制细菌核酸合成。如灰黄霉素、利福平。65第65页，共89页，2023年，2月20日，星期四66第66页，共89页，2023年，2月20日，星期四药敏试验结果及观察67第67页，共89页，2023年，2月20日，星期四2.细菌素（bacteriocin）细菌素是某种细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质。只能对同种细菌不同菌株产生作用。作用：杀菌范围较窄，有一定的特异性－－只作用于同种菌株的细菌以及与它相近的细菌。特点：作用类似抗生素。但不裂解菌体，也不能在菌体内繁殖（不同噬菌体）。种类：大肠杆菌素（某些大肠杆菌；志贺氏杆菌）；弧菌素；绿脓杆菌素；葡萄球菌素68第68页，共89页，2023年，2月20日，星期四3.植物杀菌素(phytocidin)植物杀菌素：某些植物中存在有杀菌物质，这种杀菌物质一般称植物杀菌素。中草药：如黄连、黄柏、黄芩、大蒜、金银花、连翘、鱼腥草、穿心莲、马齿苋、板蓝根等都含有杀菌物质，其中有的已制成注射液或其他制剂的药品。69第69页，共89页，2023年，2月20日，星期四第四节兽医微生物实验室的生物安全70第70页，共89页，2023年，2月20日，星期四一、生物安全的概念和一般要求实验室的生物安全有三层含义：其一主要是指防止病原微生物等及其他有害生物或物质传入实验室，此种生物安全英文称“biosecurity”其二主要是指防止病原微生物等传出实验室，此种生物安全英文为“biosafety”。其三是指实验室人员的自身安全防护，biosecurity及biosafety都包括此义。

71第71页，共89页，2023年，2月20日，星期四

兽医微生物实验室主要从事病原微生物的检验及相关研究，我国政府对必病原微生物实验室的生物安全颁布了管理条例(中华人民共和国国务院令第424号，2004)。参验照国外同行的经验，结合我国的有关规定，兽医微生物实验室的安全要点主要包括以下几方面:72第72页，共89页，2023年，2月20日，星期四生物安全的潜在危险在于处理临床样本，样本的气溶胶往往最易污染实验室并造成人员舍感染。所有送检样本都应视为有传染性并做相应处理。不允许用嘴吸取液体，应采用相应器械。涉及有害物质的实验室的人员应具备防范生物危害的知识，人员的数量及流动应予控制。实验室人员必须穿戴全套防护服，甚至面罩、防护眼镜等。这些用品用后应做灭菌处理。要有良好的卫生习惯，尤其要注意洗手。实验室内不允许吃、喝、涂抹化妆品及装隐形眼镜。实验室工作人员必须接种有关疫苗。73第73页，共89页，2023年，2月20日，星期四对所有污染材料及水，包括样本、试验器材、动物等必须规定明确的消毒程序，并予实施。推荐使用含氯5.25%的消毒剂或其他消毒剂。最主要的防护并非设施，而是工作人员本身，造成事故的最常见原因主要是由于工作人员缺乏有关知识、训练和粗心大意。只有经培训的人员才能处理动物，操作时动物应予麻醉或镇静，避免伤害人及动物。实验室中处理的微生物提取物，特别是DNA，亦可造成污染，必须注意。74第74页，共89页，2023年，2月20日，星期四二、兽医微生物实验室的生物安全分类

凡涉及微生物及其提取物或基因工程产物操作的实验室，根据对病原微生物不同种类的生物安全要求，对实验室的设计、设施也有所不同。目前国际公认的微生物实验室分为生物安全(biosafetylevel，BSL)1至4级。其中BSL-1最低，BSL-4最高。75第75页，共89页，2023年，2月20日，星期四BSL-1实验室可从事已知不会对健康成人造成危害、但对实验室工作人员和环境可能有微弱危害的、有明确特征的微生物的实验工作。实验室与建筑物中的一般通道不隔开，一般在实验台上操作，不要求使用或经常使用专用封闭设备。76第76页，共89页，2023年，2月20日，星期四BSL-2实验室与BSL-1相似，适用于那些对人及环境有中度可能危害的微生物实验工作。不同点:①工作人员要经过操作病原因子的专门培训，②由专业人员进行指导和管理;③工作时限制外人进入实验室;某些产生传染性气溶胶或溅出物的工作要在生物安全柜或其他封闭设备内进行;对污染的锐器采取高度防护措施。凡从事微生物基因的操作，均需在BSL-2实验室进行。77第77页，共89页，2023年，2月20日，星期四78第78页，共89页，2023年，2月20日，星期四BSL-3实验室供处理危险病原体使用，适用于可以通过吸人途径引起严重的或致死性疾病的病原体的实验工作，例如从事高致病性禽流感、口蹄疫和艾滋病研究或检测的实验室。BSL-3实验室的实验人员在处理病原体方面要经专门培训，并由有关专家进行监督管理。传染性材料的所有操作均要在生物安全柜或其他物理防护设施内进行，工作人员要穿适宜的防护服和装备。

BSL-3实验室要经过专业的设计和建造。79第79页，共89页，2023年，2月20日，星期四BSL-4实验室有造成气溶胶感染和危及生命的病原微生物，如埃波拉病毒、尼帕病毒等研究的实验室，必须达到BSL-4的安全水平。BSL-4实验室对防止微生物扩散到环境中有特殊的工程和设计要求。每一名实验室工作人员在处理病原微生物方面均要有特殊的和全面的培训；要具有法定资格的科学家监督管理。实验室主任要严格控制进入实验室的人员。实验室应是独立的建筑物或是建筑物内的隔离区。要实施特殊的实验室安全工作细则。在此种实验室的工作区内，所有的工作都要限制在E级生物安全柜内或者是安全柜与一套由生命维持系统供气的正压个人工作服联合使用。80第80页，共89页，2023年，2月20日，星期四三、动物病原微生物的分类

根据病原微生物的传染性、感染人和(或)动物的危害程度，世界动物卫生组织(OIE)将动物病原分为1至4类。其中1类动物病原为可导致地方性流行、但不列入官方控制计划的病原微生物。2类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制计划但实验室扩散风险低的致病微生物。3