药物杂质检查

药物的杂质检查授课人：赵丹2基本内容第一节概述第二节一般杂质的检查方法第三节特殊杂质的检查方法基本要求练习与思考3

一、掌握一般杂质检查的原理、方法和计算。二、熟悉特殊杂质检查的方法和原理。三、了解热分析在药物分析中的应用。返回基本要求41．药物的杂质：药物中存在的无治疗作用，或影响药物稳定性和疗效甚至对人体健康有害的物质。药物的纯度：药物的纯度是指药物的纯洁程度。药物纯度的要求是不断提高基本方法：对照法灵敏度法比较法生物学方法第一节概述5杂质的来源来源类型生产过程药物的合成过程：未反应的原料、中间体、副产物制剂过程：辅料、添加剂药物生产过程：试剂、溶剂残留贮藏过程降解6杂质的种类分类依据种类杂质来源一般杂质：主要在生产中引入特殊杂质：生产、贮藏中引入杂质毒性有毒杂质：如重金属、砷盐信号杂质：氯化物、硫酸盐等理化性质有机杂质、无机杂质、残留溶剂7第三节杂质的限量检查方法特点对照法与一定量被检杂质标准溶液对照灵敏度法加入一定量的试剂，不得有正反应出现比较法测定待检杂质的参数（如吸光度）与规定限量比较

1．定义：药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示。8

一、氯化物的检查第四节一般杂质的检查方法1.原理：2.反应条件：氯化物浓度以50ml含有50－80ug为宜，即相当于标准氯化钠溶液5－8ml。酸度：50ml中含10ml稀硝酸温度：30-40℃3.干扰的排除供试品液混浊：可用含硝酸的蒸馏水洗净氯纸中氯化物后过滤来消除混浊对氯化物检查的干扰。9二、硫酸盐的检查1.原理：

与一定量标准硫酸钾溶液（硫酸根离子浓度100ug/ml）在相同条件下产生浑浊程度比较。10

（一）硫氰酸盐法

1．原理Fe3++6SCN-{Fe(SCN)6-]3-

红色

2．条件：[Fe3+]0.01mg～0.05mg/50ml,即相当于标准铁溶液1～5ml。酸度稀盐酸4ml/50ml，作用是防止三价铁水解。

HCl三、铁盐检查法113．干扰的排除（1）当有Fe2+存在时，加氧化剂过硫酸铵氧化Fe2+成Fe3+。（2）当供试液管与对照溶液管色调不一致，或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇提取，分别取提取液比色。12四、重金属检查法

重金属是指在实验室条件下与S2-作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内友易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表。

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四、重金属检查法检查方法适用范围硫代乙酰胺法溶于水、稀酸和乙醇的药物（最常用）合理pH值：3.0~3.5，有利于沉淀较完全炽灼后的硫代乙酰胺法芳环杂环药物，或难溶于以上溶剂的药物硫化钠法溶于碱性水溶液而难溶于稀酸或在稀酸析出沉淀的药物微孔滤膜法限量较低的重金属药物14五、砷盐检查法检查方法药典古蔡氏法中国药典、日本药局方、英国药典二乙基二硫代氨基甲酸银法中国药典、日本药局方、美国药典次磷酸法

英国药典白田道夫法151.古蔡氏法原理：新生态氢与砷盐反应生成砷化氢，遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑注意事项：中国药典标准砷斑制备：2ml的标准砷溶液（2ug）加入KI和SnCl2的作用：将五价砷还原成三价砷；抑制锑化氢的生成（锑化氢也能与溴化汞生成砷斑）。醋酸铅棉花的作用：吸收硫化氢，防止后者与溴化汞生成硫化汞。对于S2-、SO32-、S2O32-等砷盐：应该加硝酸处理氧化成SO42-除去干扰。对于Fe3＋：需要先还原成低价的铁离子，否则能消耗KI和SnCl2含锑药物：改用白田道夫法AsH3生成162.二乙基二硫代氨基甲酸银法Ag(DDC)法原理：新生态氢与砷盐反应生成砷化氢，还原Ag(DDC)产生红色胶态银，与标准砷溶液同法操作进行比较。注意事项：砷浓度为1-10ug/40ml范围线性良好。3.次磷酸法原理：在盐酸酸性溶液中，能将砷盐还原成棕色游离砷。适用于：

S2-、SO32-以及含锑的砷盐检查，但灵敏度比古蔡氏法低。17六、溶液颜色检查法

溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质量的方法。中国药典（2010年版）收载有三种方法：K2Cr2O7黄、绿

1.标准比色液进行比较的方法标准比色液CoCl2橙黄,橙红

2.分光光度法CuSO4棕红

3.色差计法通过测定供试品与标准比色液或水之间的色差值18七、易炭化物检查法

是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。这类杂质多数结构未知，常采用与标准比色液比色的方法进行检查。(标准比色液为CoCl2,K2Cr2O7,CuSO4)

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是检查药物中的微量不溶性杂质。常采用与浊度标准液比浊的方法进行检查。浊度标准液制备原理：

(CH2)6N4+6H2O6HCHO+4NH3HCHO+H2N-NH2H2C=N-NH2+H2O

甲醛腙白色混浊

不同级号浊度标准液

级号0.51234浊度标准原液（ml）2.55.010.030.050.0

水（ml）97.595.090.070.050.0八、溶液澄清度检查法20九、炽灼残渣检查法BP称硫酸灰分是检查有机药物中混入的各种无机杂质。常采用重量方法进行检查。

残渣及坩埚重—

坩埚重

残渣%=×100%

供试品重21十、干燥失重检查法

主要检查药物中的水分及其他挥发性的物质。常采用重量方法进行检查。常用的方法有四种：（一）常压恒温干燥法

（二）干燥剂干燥法

（三）

减压干燥法22热分析法物理性质技术名称简称质量热重分析法TGA温度差热分析法DTA焓差示扫描量热法DSC定义：在程序控温条件下，测定物质的理化性质与温度之间关系的一类技术。原理：物质在温度改变过程中会发生融化、升华、相转变、晶型改变、脱水、脱氢或分解等反应，从而造成理化性质（温度、能量或质量）的改变。分类：231.热重分析法（thermogravimetricanalysis,TGA)

在程序升温下，测量物质的质量与温度的关系，研究物质在加热同时失重的情况下，所发生的质的变化，常用于药物稳定性的研究；贵重和易氧化药物的干燥失重测定。(长春碱)热分析法242.差热分析法（differentialthermlanalysis,DTA)

是在程序升温下，测量被测物质和参比物之间的温差与温度关系的一种技术。参比物是一种惰性物质，在加热过程中不发生相变和化学变化。因此温差(△T)只与被测物质的量质变化有关。△T=0被测物未发生吸热或放热反应;△T=-为吸热峰;△T=+为放热峰.25差热分析法定义：是在程序控制温度下，测量物质与参比物之间的温度差与温度关系的一种技术。可用测温检流计代替

26差示扫描热分析差示扫描量热法是在程序控制温度下，测量输给待测物质和参比物的量热差与温度（或时间）关系的一种技术。热分析法应用1）多晶型机器转变的表征2）药物的纯度测定27十一、残留溶剂测定法1.定义：是指原辅料合成或制剂生产过程中使用的、但在工艺中未能完全除去的有机溶剂。2.分类：3类毒性较大、有致癌并对环境有害——避免使用；有一定毒性——限量使用；毒性较小——推荐使用。3.检查方法：GC法色谱柱：填充柱、毛细管柱检测器：常用FID，对含卤素元素的用ECD（电子捕获检测器）28气相色谱载气减压阀净化器气流调节阀转子流量计气化室色谱柱检测器29色谱柱填充柱：内径4-6mm，长度2-4m毛细管柱：内径0.1-0.5mm，长度几十米分配柱：固定液（高沸点液体）作固定相吸附柱：吸附剂（高分子多孔小球）按柱粗细分按分离原理固定液：高沸点液体，在操作温度下为液态，在室温时为固态或液态。30GC法测定溶剂残留1.系统适用性试验：理论塔板数：填充柱>1000，毛细管柱>5000。分离度：>1.5重现性：内标法<5%，外标法<10%拖尾因子：>2，含量就不准确2.测定方法：毛细管柱顶空进样等温法（第一法）：残留溶剂种类少，而且极性差异较小毛细管柱顶空进样程序升温法（第二法）：有机溶剂种类多，且极性差异较大;溶液直接进样法：多用于填充柱31顶空进样顶空进样技术：是将待测样品置入一密闭的容器中，通过加热升温使挥发性组分从样品基体中挥发出来，在气-液(或气-固)两相中达到平衡，抽取顶部气体进行色谱分析，从而检验样品中挥发性组分的成分和含量。

VgVs适用对象：样品中痕量高挥发性物质的测定3233第五节特殊杂质的检查方法有关物质：指药物中可能存在的原料、中间体、副产物、异构体、聚合体和降解产物等与药物结构相似或相关的一类物质的总称。检查方法：一、利用药物和杂质在物理性质上的差异1、臭味及挥发性的差异2、颜色3、溶解行为4、旋光性质5、对光吸收性质6、吸附和分配性质的差异34光谱分析法一、紫外分光光度法如果药物在杂质的λmax处无吸收，则可以在此波长测定样品溶液的A值，从而通过样品溶液的A值来控制杂质的量。例子见P74。二、红外分光光度法主要用于药物中无效或低效晶型的检查。三、原子吸收分光光度法主要用于（超）微量元素的分析，金属杂质四、荧光分析法35薄层色谱法杂质对照品法：适合有杂质对照品供试品溶液自身稀释对照法：没有杂质对照品，而且杂质斑点的颜色与主成分的相同或相近。杂质对照法与自身稀释对照法并用：对照药物法：无杂质对照品，而且杂质斑点颜色与主成分的差异较大。S1S2杂质5ug/ml123C1S40C22ug/ml123C20.2C15ug/ml123对照品5ug/ml1036高效液相色谱法外标测定法：适合有对照品的杂质，而且能够准确进样加校正因子的主成分自身对照测定法：没有杂质对照品，而且杂质斑点的颜色与主成分的相同或相近。不加校正因子的主成分自身对照测定法：面积归一法：粗略估计杂质含量。37气相色谱法内标加校正因子测定法：适合有对照品的杂质，并能够测定杂质的校正因子的情况。外标测定法：适合有对照品的杂质，而且能够准确进样面积归一法：粗略估计杂质含量。标准溶液加入法：将一定量的杂质对照品溶液精密加入供试品溶液中；根据外标或内标法测定总杂质含量，再扣除加入的杂质对照品的含量，即得到供试品中杂质的含量：38色谱法1、薄层色谱法2、高效液相色谱法3、气相色谱法4、毛细管电泳法39二、化学方法1、酸碱性的差异2、氧化还原性的差异3、杂质与一定试剂反应产生沉淀4、杂质与一定试剂反应产生颜色5、杂质与一定试剂反应产生气体6、药物经有机破坏后检查杂质4041练习与思考

[A型题]1．含锑药物的砷盐检查方法为A.古蔡法B.碘量法C.白田道夫法D.Ag-DDCE.契列夫法