动物的细胞培养与体细胞克隆终稿

动物的细胞培养与体细胞克隆终稿第1页，共31页，2023年，2月20日，星期三【新】汉水丑生（侯伟新疆乌鲁木齐新世纪外国语学校）组织者：【川】飞鸿翼（洪翼四川省泸州市纳溪中学）【鲁】暖风（王文芳山东省阳谷第三中学）

【鲁】掌上的沙（袁庆军山东郓城高级中学）【渝】足教（王永洪重庆市大足中学）

【粤】handsome（贺海生广东汕尾陆丰龙山中学）【陕】一哲（杨明辉陕西宝鸡市天王高中）第2页，共31页，2023年，2月20日，星期三动物的细胞培养与体细胞克隆本卷整理：【豫川】雨雪飞飞熊孝尊四川成都升庵中学第3页，共31页，2023年，2月20日，星期三（2012山东）35、（8分）【生物—现代生物科技专题】毛角蛋白II型中间丝（KIFII）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFII基因的高绒质绒山羊的简单流程如图（1）过程①中最常用的运载工具是________，所需要的酶是限制酶和_____________。（2）在过程②中，用________________________

处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是________________。质粒DNA连接酶胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）维持培养基（液）的PH“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。第4页，共31页，2023年，2月20日，星期三（3）在过程③中，用______________________处理以获得更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行_______处理。（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是______________。在胚胎移植前，通过____________技术可获得较多胚胎。促性腺激素（或促滤泡素，孕马血清）；

去核(早期)胚胎培养胚胎分割“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。第5页，共31页，2023年，2月20日，星期三【解析】熟练掌握基因工程和胚胎工程的基本知识就能解答本题（1）运载工具（体）包括质粒、噬菌体衍生物及动植物病毒,其中质粒是主要运载体;所需工具酶是限制酶和DNA连接酶。（2）分散皮肤组织块成单个细胞使用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）。在动物细胞培养过程中，CO2的作用是维持培养液pH的相对稳定。（3）要得到更多的卵（母）细胞需用促性腺激素进行超数排卵处理；成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，以保证克隆后代的遗传性状主要了来自供体核。（4）把重组细胞培养到早期胚胎叫早期胚胎培养技术；在胚胎移植前，通过胚胎分割技术可获得较多胚胎。第6页，共31页，2023年，2月20日，星期三（2012广东）2．培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是()A．组织培养B．细胞杂交C．显微注射D．核移植【解析】草莓植株分生区细胞不含病毒或含病毒的量少，可以利用茎尖（或根尖）经植物组织培养技术培养出脱毒幼苗。A第7页，共31页，2023年，2月20日，星期三【解析】在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因，只要条件许可，都可发育成完整的个体。要能产生完整的个体，才能体现全能性。AD（2012江苏）22.下列事实能体现细胞全能性的是（）棉花根尖细胞经诱导形成幼苗单细胞的DNA在体外大量扩增C.动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体D.小鼠体细胞经诱导培育成小鼠第8页，共31页，2023年，2月20日，星期三（2011江苏）14．关于现代生物技术应用的叙述,错误的是（）A．蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C．植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D．动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养B【解析】动物克隆利用的是核移植技术。第9页，共31页，2023年，2月20日，星期三（2011上海）15．关于哺乳动物细胞体外培养的难易程度，下列表述正确的是（）

A．乳腺癌细胞易于乳腺细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞

B．乳腺细胞易于乳腺癌细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞

C．乳腺细胞易于乳腺癌细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞

D．乳腺癌细胞易于乳腺细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞A第10页，共31页，2023年，2月20日，星期三（2011天津）1．下列有关酶的叙述正确的是（）A．酶的基本组成单位是氨基酸和脱氧核糖核苷酸B．酶通过为反应物供能和降低活化能来提高化学反应速率C．在动物细胞培养中，胰蛋白酶可将组织分散成单个细胞D．DNA连接酶可连接DNA双链的氢键，使双键延伸C

第11页，共31页，2023年，2月20日，星期三（2010福建）32．[现代生物科技专题]（10分）

红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，目前临订、床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胸生成素（rhEPO），其简要生产流程如右图。请回答：“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。第12页，共31页，2023年，2月20日，星期三培养液杂交瘤（1）图中①所指的是________技术。（2）图中②所指的物质是_________，③所指的物质是_________。（3）培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定其更换________。（4）检测rhEPO的体个活性需要抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的_________细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓癌细胞融合而成。mRNArhEPOPCR第13页，共31页，2023年，2月20日，星期三D【解析】动物细胞培养可以分为原代培养，原代培养到一定程度后要进行传代,因为细胞有接触抑制现象,当细胞接触时就会停止分裂(在细胞培养过程中进行的为有丝分裂,所以培养出来的多数细胞基因型相同),但是细胞在培养过程中,传代次数也是有限的,一般为50次就会死亡,留下来的细胞就是发生了癌变的细胞,遗传物质发生改变,具有不死性,但是仍保留接触抑制现象,所以还是要传代培养,这个也就是人体中癌细胞会转移的原因（2010浙江）4、下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是()A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B.克隆培养法培养过程上多数细胞的基因型会发生改变C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D.恶性细胞系的细胞可进行付代培养“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。第14页，共31页，2023年，2月20日，星期三（2009浙江）1．用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是()A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。C解析：植物组织培养中不需要CO2培养箱，一般用固体培养基，所以A、B错误；动物细胞培养获得的是细胞株或细胞系，没有获得新的个体，所以没有体现细胞全能性，D错误。第15页，共31页，2023年，2月20日，星期三（2009江苏）32．动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。(1)肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞

。(2)气室中充入5％C02：气体的主要作用是__________________。(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的

，以保证抗生素对肝脏无害。吸收氧气和营养物质、排出代谢废物维持培养液适宜的pH种类和剂量“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。第16页，共31页，2023年，2月20日，星期三(4)有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂)；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液(使染色体着色)，有机物X溶液等。

实验过程：①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)。第17页，共31页，2023年，2月20日，星期三上表中还需进行的操作是

_______________。③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察__________________，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明

________。向乙(或丁)组装置中放置肝脏小块染色体形态和数量肝脏小块对有机物X具有解毒作用第18页，共31页，2023年，2月20日，星期三【解析】本题考查动物细胞培养的相关知识。（1）把肝脏切成小薄片，有利于肝脏细胞的呼吸代谢，即吸收氧气和营养物质、排出代谢废物（2）气室中充入5％C02的作用是形成碳酸来维持培养液适宜的pH。（3）同时也要注意选择抗生素的种类和数量来抑制细菌生长。（4）乙组或丁组没有处理向乙(或丁)组装置中放置肝脏小块作为对照实验，有机物X有毒性，可诱发染色体断裂所以要观察淋巴细胞的染色体形态和数量是否变化。甲组添加肝脏小块淋巴细胞染色体正常，丙组没有添加出现染色体异常，说明肝脏小块对有机物X具有解毒作用，所以甲组正常。第19页，共31页，2023年，2月20日，星期三D（2008全国Ⅰ）5.下列关于细胞工程的叙述，错误的是(

)A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。第20页，共31页，2023年，2月20日，星期三【解析】本题考查细胞工程中的动物细胞融合和植物细胞杂交方面的内容。植物体细胞杂交和动物体细胞融合时，均可采用离心、电刺激、振动等物理方法或化学促融剂如聚乙二醇等方法；植物细胞杂交时用纤维素酶或果胶酶去除细胞壁，而动物细胞培养过程中存在接触抑制，故需要用胰蛋白酶进行处理；单克隆抗体的制备就是利用经抗原免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合再经筛选制成的；甲乙两个品种的植物体细胞杂交相当于形成了异源四倍体，而常规杂交形成的是二倍体。所以选D。第21页，共31页，2023年，2月20日，星期三C【解析】病原微生物被体内吞噬细胞吞噬是非特异性免疫。花粉引起体内毛细血管扩张是过敏反应，和器官移植的排斥反应都是免疫过程。骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合这是单克隆抗体制备过程中利用的动物细胞融合技术。

（2008四川）5．下列不属于免疫过程的是（）

A．花粉引起体内毛细血管扩张

B．移植的器官被患者排斥

C．骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合

D．病原微生物被体内吞噬细胞吞噬“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。第22页，共31页，2023年，2月20日，星期三（2008宁夏）38.生物──选修3现代生物科技专题（15分）回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面

时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的

。此时，瓶壁上形成的细胞层数是

。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是

。(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现

的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成

细胞，该种细胞的黏着性

，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量

。“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。相互接触接触抑制单层（或一层）胰蛋白酶衰老甚至死亡不死性降低减少第23页，共31页，2023年，2月20日，星期三由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）冷冻（或超低温、液氮）中酶新陈代谢(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是

(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到

期的细胞用显微镜进行观察。(5)在细胞培养过程中，通常在

条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中

的活性降低，细胞

的速率降低。“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。第24页，共31页，2023年，2月20日，星期三【解析】本题以“动物细胞培养”为主题综合考查了动物细胞培养的条件、特点、细胞分裂、免疫等有关知识，虽属于识记内容，但是综合了选修和必修，综合性较强。抗原(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作

进行攻击。“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。第25页，共31页，2023年，2月20日，星期三（2008上海）11、制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（

）①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植A．①②B．①③C．②③D．③④【解析】单克隆抗体是经细胞融合之后的杂交细胞经培养后分泌产生的。A第26页，共31页，2023年，2月20日，星期三（1）白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在_______隔离。自然条件下，这两个物种间不能通过__________的方式产生后代。雌蕊离体培养获得“白菜-甘蓝”杂种幼苗，所依据的理论基础是植物细胞具有______________。（2）为观察“白菜-甘蓝”染色体的数目和形态，通常取幼苗的____________做临时装片，用___________染料染色。观察、计数染色体的最佳时期是_

_________。生殖有性生殖全能性根尖（茎尖）碱性有丝分裂中期（2008北京）29．白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。以白菜为母本、甘蓝为父本，经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜-甘蓝”杂种幼苗。请回答问题：“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。第27页，共31页，2023年，2月20日，星期三（3）二倍体“白菜-甘蓝”的染色体数为________。这种植株通常不育。原因是减数分裂过程中________________。为使其可育，可通过人工诱导产生四倍体“白菜-甘蓝”，这种变异属于____________。无联会现象染色体变异19（2008北京）29．白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。以白菜为母本、甘蓝为父本，经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜-甘蓝”杂种幼苗。请回答问题：“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。第28页，共31页，2023年，2月20日，星期三显微注射受精卵（早期胚胎）

受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达。（2007山东）35.（8分）【生物—现代生物科技专题】继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是___________。（2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入________

_中，原因是

“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，未经允许不得擅自修改或用于任何形式的商业用途。2012年1月15日，汉水丑生标记。第29页，共31页，2023年，2月20日，星期三D