分光光度法在职业卫生检测中的应用

分光光度法在职业卫生检测中的应用第1页，共99页，2023年，2月20日，星期四熟悉紫外可见分光光度法相关基本概念熟悉紫外可见分光光度法的基本原理掌握紫外可见分光光度计的仪器组成、分析测试条件选择、分析方法及注意事项第2页，共99页，2023年，2月20日，星期四分光光度方法分类紫外-可见分光光度原理及仪器构成紫外-可见分光光度法分析条件的选择紫外-可见分光光度法的应用常见问题及注意事项第3页，共99页，2023年，2月20日，星期四

光，或称电磁辐射，具有两重性质：（1）它是通过空间传播的一种波,具有波动性。（2）它又是由粒子（光子）组成的，具有粒子性。光子是非连续的（离散性的）能束。对包含大量数目的光子的行为，光的波动性是主要的；当对个别原子产生辐射效应时，把光子作为能束是主要的。分光光度方法分类第4页，共99页，2023年，2月20日，星期四光谱分区(穿透)能量

小200nm400nm760nm大波长光谱区域紫外光区可见光区红外50μm分析方法紫外分光光度法可见分光光度法红外分光光度法紫、蓝、青、绿、黄、橙、红分光光度方法分类第5页，共99页，2023年，2月20日，星期四紫外分光光度法红外分光光度法分光光度吸光光度法发光光度法可见光分光光度法荧光分光光度法分光光度方法分类第6页，共99页，2023年，2月20日，星期四

荧光分光光度计既可用于定量分析，也可用于测绘激发光谱和荧光光谱。第一单色器选择激发光波长（＞250nm的紫外光），故称为激发单色器。第二单色器（荧光单色器）与激发光入射方向垂直，并选择荧光波长，可提高方法的选择性和准确度。分光光度方法分类荧光分光光度法第7页，共99页，2023年，2月20日，星期四灵敏度高较紫外-可见分光光度法高1-3个数量级。选择性强能吸收光的物质并不一定能产生荧光，且不同物质由于结构不同，虽吸收同一波长的光，但产生的荧光波长也不尽相同。用样量少、操作简便缺点:许多物质本身不会发射荧光应用不够广泛

受外界条件影响大铍：桑色素荧光分光光度硒：二氨基萘荧光分光光度分光光度方法分类荧光分光光度法特点第8页，共99页，2023年，2月20日，星期四第9页，共99页，2023年，2月20日，星期四物质吸收紫外和可见光区电磁波而产生吸收光谱——紫外-可见吸收光谱。波长（200～400）nm范围称为紫外光区，波长（400～760）nm称为可见光区。

分光光度方法分类为什么可以达到检测的目的？第10页，共99页，2023年，2月20日，星期四产生吸收光谱的原因分子具有不同的特征能级，当分子从外界吸收能量后，就会发生相应的能级跃迁。同原子一样，分子吸收能量具有量子化特征，记录分子对电磁辐射的吸收程度与波长的关系就可以得到吸收光谱。

分光光度方法分类紫外-可见吸收光谱法是一种分子光谱法。该法广泛运用于无机物质、有机物质定性和定量分析第11页，共99页，2023年，2月20日，星期四二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成分光光度法测量的理论依据：朗伯—比尔（Lambert-Beer）定律当溶液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应。物质对光的吸收是有选择性的，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。第12页，共99页，2023年，2月20日，星期四ε：比例常数，与吸光物质的性质、入射光波长及温度等有关。

A：吸光度，表征物质对光吸收程度的量。C：溶液浓度；I0：入射光强；It

：透射光强；

b：液层厚度；T：透光率或透光度朗伯-比尔定律表达式二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成当一束单色光穿过透明介质时，光强度的降低同吸收介质的厚度（或光径长度）、溶液的浓度成正比。第13页，共99页，2023年，2月20日，星期四I0Itb溶液的透光率愈大，表示它对光的吸收愈小溶液的透光率愈小，表示它对光的吸收愈大

二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成第14页，共99页，2023年，2月20日，星期四摩尔吸光系数ε它是吸光物质在特定波长下的一个特征常数。在数值上等于1mol·L-1吸光物质在1cm光程中的吸光度。其单位为L·mol-1·cm-1。由于ε值与入射光波长有关，故表示ε时，应注明所用入射光波长。二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成朗伯-比尔定律A=-lgT=εbc适用于单色光、稀溶液回顾第15页，共99页，2023年，2月20日，星期四在分析化学中，ε值的大小反应了吸光物质对某一特定波长光吸光能力大小。ε值越大，该吸光物质的吸光能力越强。ε值是衡量光度分析方法灵敏度的重要指标，ε值越大，方法的灵敏度越高。二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成回顾第16页，共99页，2023年，2月20日，星期四

五个单元组成光源单色器样品池检测器记录装置二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成吸收池讯号处理和显示器第17页，共99页，2023年，2月20日，星期四1.光源

在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。钨灯或卤钨灯——可见光源（350~1000）nm氢灯或氘灯

——紫外光源（200~360）nm二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成第18页，共99页，2023年，2月20日，星期四2.单色器是将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。包括5部分。①入射狭缝：光源的光由此进入单色器；②准光装置(准直镜)：透镜或返射镜使入射光成为平行光束；③色散元件（分光镜）：将复合光分解成单色光；过滤、棱镜或光栅；

④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝；⑤出射狭缝：射出单色光。二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成第19页，共99页，2023年，2月20日，星期四二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成第20页，共99页，2023年，2月20日，星期四3.样品室(吸收池)

样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。玻璃——能吸收紫外光，仅适用于可见光区石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区

二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成第21页，共99页，2023年，2月20日，星期四4.检测器

利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管、二极管阵列检测器。5.信号处理及显示记录系统

即：记录装置。检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理等。二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成第22页，共99页，2023年，2月20日，星期四分光光度计从入射光类型划分单光束分光光度计

简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成第23页，共99页，2023年，2月20日，星期四二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成双光束分光光度计经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光，一束通过参比池，一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为试样的透射比，经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池，还能自动消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。第24页，共99页，2023年，2月20日，星期四双波长分光光度计

将不同波长的两束单色光(λ1、λ2)快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△=1～2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。对于多组分混合物、混浊试样（如生物组织液）分析，以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下，利用双波长分光光度法，往往能提高方法的灵敏度和选择性。二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成第25页，共99页，2023年，2月20日，星期四紫外与可见分光光度计的不同首先光源不同，紫外用氢灯或氘灯，而可见用钨灯，因为二者发出的光的波长范围不同．从单色器来说，如果用棱镜做单色器，则紫外必须使用石英棱镜，可见则石英棱镜或玻璃棱镜均可使用，而光栅则二者均可使用，这主要是由于玻璃能吸收紫外光的缘故。从吸收池来看，紫外只能使用石英吸收池，而可见则玻璃、石英均可使用。从检测器来看，可见区一般使用氧化铯光电管，它适用的波长范围为（625-1000）nm，紫外用锑铯光电管，其波长范围为（200-625）nm.

二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成第26页，共99页，2023年，2月20日，星期四紫外可见分光光度计主要部件包括光源、单色器、吸收池、检测器、讯号处理和显示器。紫外可见分光光度计光源、比色皿不同双光束分光光度计可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。

单色器通过使用“滤光片、棱镜、光栅、准直镜等将复合光分成单色光。二、紫外-可见吸光光度原理及仪器构成回顾第27页，共99页，2023年，2月20日，星期四GBZ/T210.4-2008职业卫生标准制定指南第4部分:工作场所空气中化学物质测定方法三、分光光度法分析条件的选择第28页，共99页，2023年，2月20日，星期四第29页，共99页，2023年，2月20日，星期四入射光波长的选择吸光度读数范围的选择参比溶液(空白溶液)的选择显色反应条件的选择狭缝宽度的选择溶液的酸度比色时间显色温度对标准曲线的要求对检出限的要求第30页，共99页，2023年，2月20日，星期四1、入射光波长的选择λmaxAmax此处：灵敏度高吸收曲线：吸光度随波长变化的曲线。不同的物质因其分子结构不同而具有不同的吸收曲线；同一物质，浓度不同，其吸收曲线的形状和λmax的位置不变，但在同一波长下吸光度随浓度的增大而增大。三、分光光度法分析条件的选择第31页，共99页，2023年，2月20日，星期四

KMnO4溶液的吸收曲线

吸收曲线

以入射光波长作横坐标，用分光光度计测量每一波长下物质对光的吸光度作纵坐标所绘制的曲线，称为吸收曲线。其作用是：选择入射光波长，在此波长下测量吸光度，则分析的灵敏度最高。因此，吸收曲线是吸光光度法中选择测定波长的重要依据。

三、分光光度法分析条件的选择第32页，共99页，2023年，2月20日，星期四2、吸光度读数范围的选择A=0.2~0.8最适宜，误差小暗噪音——与检测器和放大电路不确切性有关，与光讯号无关讯号噪音——与光讯号有关仪器噪音(暗噪音、讯号噪音)三、分光光度法分析条件的选择第33页，共99页，2023年，2月20日，星期四三、分光光度法分析条件的选择控制吸光度在合理范围的方法包括

：控制溶液的浓度，如改变试样的称量，或改变溶液的稀释度等；选择不同厚度的比色皿，以改变光程的长度；采用示差法。第34页，共99页，2023年，2月20日，星期四三、分光光度法分析条件的选择3、参比溶液(空白溶液)的选择：目的：

采用空白对比消除因溶剂和容器的吸收、光的散射和界面反射等因素对透光率的干扰第35页，共99页，2023年，2月20日，星期四

（1）若仅待测物（M）与显色剂（R）的反应产物（MR）有吸收，可用蒸馏水作参比溶液。

（2）若待测物（M）无吸收，而显色剂（R）或其它试剂（R′）有吸收，则用不加试样的空白溶液作参比溶液。

（3）若试样中的其它组分有吸收（待测物M之外的组分，如N），但不与显色剂反应：

当显色剂无吸收时，可用试样溶液作参比溶液；

当显色剂有吸收时，可在试液中加入适当掩蔽剂将待测组分掩蔽后再加显色剂，以此溶液作参比溶液。总之，选择参比溶液的原则是：应使测得的试液的吸光度能真正反映待测物的浓度。三、分光光度法分析条件的选择参比溶液的选择方法第36页，共99页，2023年，2月20日，星期四参比溶液的使用方法三、分光光度法分析条件的选择第37页，共99页，2023年，2月20日，星期四

显色反应：将被测组分转变成有色化合物的化学反应被测组分中间生成物显色剂有色化合物++试剂显色剂有色化合物+显色剂：能与被测组分反应生成有色化合物的试剂4、显色反应条件的选择三、分光光度法分析条件的选择Fe2+NO第38页，共99页，2023年，2月20日，星期四

反应生成物须在紫外-可见光区有较强吸光能力，即摩尔吸光系数较大。反应有较高的选择性，即被测组分生成的化合物吸收曲线应与共存物质的吸收光谱有明显的差别。如显色剂（R）在测定波长处无吸收，即ε尽可能小。反应产物应足够稳定，反应产物组成恒定，以保证测量过程中溶液的吸光度不变。显色反应必须满足的条件三、分光光度法分析条件的选择第39页，共99页，2023年，2月20日，星期四5、狭缝宽度的选择以减少狭缝宽度时样品的吸光度不再增加为准，一般来说，狭缝宽度是样品吸收峰半宽度的十分之一。三、分光光度法分析条件的选择第40页，共99页，2023年，2月20日，星期四

溶液的酸度对被测组分存在状态的影响（大多数被测金属离子易水解，当溶液pH增大时，可能生成各种类型的氢氧基配合物，甚至生成氢氧化物沉淀，使显色反应不能进行完全。）6、溶液的酸度对显色剂的平衡浓度和颜色的影响（影响显色反应的完全程度）溶液酸度对有色化合物组成的影响：

（在不同pH的溶液中，显色剂与待测离子形成的有色化合物的组成往往不同，其颜色也不同）三、分光光度法分析条件的选择第41页，共99页，2023年，2月20日，星期四显色反应速率快：立即比色慢：溶液颜色稳定后（盐酸反应20分钟）7、比色时间样品或有色化合物稳定性稳定（SO2）不稳定（氮氧化物、氨等）三、分光光度法分析条件的选择第42页，共99页，2023年，2月20日，星期四有色化合物的稳定（高温分解）对光吸收的影响（标样和试样的显色温度一致）显色反应需要一定的温度（P2S5）显色反应的进行8、显色温度三、分光光度法分析条件的选择第43页，共99页，2023年，2月20日，星期四标准曲线：在（特定波长）、b固定的情况下，测定一系列不同浓度的标准溶液的吸光度，作A~c图，在相同条件下测定样品溶液的吸光度，从曲线上可查出被测样品的浓度。9、对标准曲线的要求浓度（c）A5个浓度点线性范围，相关系数三、分光光度法分析条件的选择第44页，共99页，2023年，2月20日，星期四0.5倍～2倍容许浓度第45页，共99页，2023年，2月20日，星期四浓度c正偏离负偏离吸光度曲线偏离的情况依据Beer定律，A与C关系应为经过原点的直线偏离Beer定律的主要因素表现为（一）光学因素（二）化学因素三、分光光度法分析条件的选择第46页，共99页，2023年，2月20日，星期四（一）光学因素

非单色光的影响：

Beer定律应用的重要前提——入射光为单色光

照射物质的光经单色器分光后并非真正单色光其波长宽度由入射狭缝的宽度和棱镜或光栅的分辨率决定为了保证透过光对检测器的响应，必须保证一定的狭缝宽度这就使分离出来的光具一定的谱带宽度三、分光光度法分析条件的选择第47页，共99页，2023年，2月20日，星期四（二）化学因素Beer定律适用的另一个前提：稀溶液浓度过高和化学变化会使C与A关系偏离定律三、分光光度法分析条件的选择第48页，共99页，2023年，2月20日，星期四溶液浓度过高引起的偏离

若吸光物质溶液的浓度较高时，吸光粒子之间的相互作用较强，改变了吸光粒子对光的吸收能力，使溶液的吸光度与溶液浓度之间的线性关系发生了偏离。化学变化所引起的偏离(溶质和溶剂的作用)溶液中吸光物质常因解离、缔合、形成新的化合物或在光照射下发生互变异构等，从而破坏了平衡浓度与分析浓度之间的正比关系，也就破坏了吸光度A与分析浓度之间的线性关系。产生对朗伯-比尔定律的偏离。三、分光光度法分析条件的选择第49页，共99页，2023年，2月20日，星期四介质不均匀性如果被测试液不均匀，是胶体溶液、乳浊液或悬浮液，则入射光通过溶液后，除了一部分被试液吸收，还会有反射、散射使光损失，导致透光率减小，使透射比减小，使实际测量吸光度增大，使标准曲线偏离直线向吸光度轴弯曲，造成对朗伯-比尔定律的偏离。（加入适量的表面活性剂等来改善溶质的均匀度）三、分光光度法分析条件的选择第50页，共99页，2023年，2月20日，星期四10、对检出限的要求重复多次(至少6次)测定的试剂空白吸光度的3倍标准差处对应的待测物浓度或含量。吸光度0.02处对应的待测物浓度或含量。S:标准差xi:测定值n:测定值个数在相同条件下多次检测结果之间的接近程度，称为重复性氯气三、分光光度法分析条件的选择第51页，共99页，2023年，2月20日，星期四入射光波长的选择吸光度读数范围的选择参比溶液(空白溶液)的选择显色反应条件的选择狭缝宽度的选择溶液的酸度比色时间显色温度对标准曲线的要求对检出限的要求回顾第52页，共99页，2023年，2月20日，星期四灵敏度较高：试样中1%-0.001%微量成分准确度较高：相对误差2%-5%适用于几乎所有的无机离子和许多有机化合物操作简便、快速、仪器价格适中、用途广分光光度法特点四、紫外-可见分光光度法的应用第53页，共99页，2023年，2月20日，星期四除主要可用于物质的定量分析外，还可以用于物质的定性分析、纯度鉴定、结构分析。

1.定性分析

每一种化合物都有自己的特征光谱。测出未知物的吸收光谱，原则上可以对该未知物作出定性鉴定，但对复杂化合物的定性分析有一定的困难。四、紫外-可见分光光度法的应用第54页，共99页，2023年，2月20日，星期四2.纯度的鉴定用紫外吸收光谱确定试样的纯度是比较方便的。如蛋白质与核酸的纯度分析中，可用A280/A260的比值，鉴定其纯度。3.结构分析紫外-可见吸收光谱一般不用于化合物的结构分析，但利用紫外吸收光谱鉴定化合物中的共轭结构和芳环结构还是有一定价值。例如，某化合物在近紫外区内无吸收，说明该物质无共轭结构和芳香结构。四、紫外-可见分光光度法的应用第55页，共99页，2023年，2月20日，星期四目视比色法标准系列待测样品操作简单方便主观误差较大不能排除其它有色物质干扰视线四、紫外-可见分光光度法的应用第56页，共99页，2023年，2月20日，星期四消除轻度色盲、眼睛疲劳等造成的主观误差，提高分析结果的准确度通过选择滤光片和参比溶液消除共存的其它有色物质使用标准曲线，分析大批试样时，简化手续，加快分析速度与目视比色法相比四、紫外-可见分光光度法的应用第57页，共99页，2023年，2月20日，星期四有毒物质金属元素单质及化合物非金属元素单质及化合物有机化合物（联苯、苯酚等20多种物质）（碱金属、碱土金属镉铋锑镍铊钴铜等元素除外，大约一半左右）（碳碲氟等元素除外）吸收液—分光光度滤膜—原子吸收吸附剂管—色谱四、紫外-可见分光光度法的应用无机化合物（N、S、P）第58页，共99页，2023年，2月20日，星期四可见分光光度计四、紫外-可见分光光度法的应用第59页，共99页，2023年，2月20日，星期四紫外-可见分光光度计四、紫外-可见分光光度法的应用第60页，共99页，2023年，2月20日，星期四NO2NONO+NO2NO2采样泵采样泵采样方法1采样方法2一氧化氮和二氧化氮的盐酸萘乙二胺分光光度法GBZ/T160.29-2004四、紫外-可见分光光度法的应用采样器流量量程的选择第61页，共99页，2023年，2月20日，星期四式中：C－空气中氧化氮的浓度，mg/m3；

m－测得样品溶液中氧化氮的含量，μg；

1.32－由气态氧化氮换算成液态氧化氮的系数；

Vo－标准采样体积，L。四、紫外-可见分光光度法的应用第62页，共99页，2023年，2月20日，星期四吸收液应避光保存，吸收管在采样、运送和存放过程中，都应采取避光措施。消除臭氧二氧化硫等的干扰应及时更换氧化管计算问题四、紫外-可见分光光度法的应用第63页，共99页，2023年，2月20日，星期四采样后应尽快测量样品的吸光度，若不能及时分析，应将样品于低温暗处存放样品于30℃暗处存放，可稳定8h；20℃暗处存放，可稳定24h；于0～4℃冷藏，至少可稳定3d。气温超过25℃时，长时间运输及存放样品应采取降温措施。

四、紫外-可见分光光度法的应用第64页，共99页，2023年，2月20日，星期四三氧化铬-石英砂氧化管适合在空气相对湿度30%～70％时使用，空气相对湿度大于70%时，应勤换氧化管，以免氧化管因吸湿引起板结；当空气相对湿度小于30%时，氧化效率降低，使用前应将氧化管放在水面上方的潮湿空气中平衡1h；当氧化管变为绿色时，应及时更换。四、紫外-可见分光光度法的应用第65页，共99页，2023年，2月20日，星期四

氨的纳氏试剂比色法GB/T160.29-2004主要问题：在样品和标准系列中易出现红棕色或者黄色沉淀标准物质：NH3与NH4+加入酒石酸钾钠溶液或EDTA掩蔽Ca2+，Mg2+，Fe3+等溶液显色的pH适宜范围为11.8-12.4错误更正：GBZ/T160.29-2004中，“将26.6mL硫酸缓缓加入到1000mL水中”应为“2.66mL.”四、紫外-可见分光光度法的应用第66页，共99页，2023年，2月20日，星期四

氰化氢和氰化物的菸酸钠—巴比妥酸钠分光光度法GBZ/T160.29-2004错误更正：“吸收液：氢氧化钠溶液(40g/L)”应为“4.0g/L”，也有报道用5.0g/L。四、紫外-可见分光光度法的应用第67页，共99页，2023年，2月20日，星期四磷酸的钼酸铵分光光度法GBZ/T160.30-2004标准系列没有梯度变化，标准系列和样品的吸光度均大于1;空白不稳定;溶液有时显蓝色，有时显黄色。

改进：还原剂，酸度，试剂浓度，吸收波长错误更正：“14.4mL硫酸慢慢注入水中”，

应为“55.6mL”.四、紫外-可见分光光度法的应用第68页，共99页，2023年，2月20日，星期四三氯化磷的钼酸铵分光光度法GBZ/T160.30-2004三氯化磷用吸收液采集，生成的磷酸与钼酸铵和氯化亚锡反应生成磷钼蓝，在680nm波长下测量吸光度，进行定量。共存的三价磷不干扰五氧化二磷的测定，但五价磷则有干扰。在测定三氯化磷时，采用氧化与不氧化，可以消除正磷酸、正磷酸盐和五氯化磷水解生成的磷酸的干扰。四、紫外-可见分光光度法的应用第69页，共99页，2023年，2月20日，星期四钼酸蓝氧化后五价磷氧化管三氯化磷五价磷溴水五价磷显色剂不氧化管三氯化磷五价磷显色剂钼酸蓝三氯化磷样品四、紫外-可见分光光度法的应用第70页，共99页，2023年，2月20日，星期四

C=2mVo×1.4C － 空气中三氯化磷的浓度，mg/m3；

1.4 －

由磷酸换算为三氯化磷的系数；m － 测得样品溶液中磷酸（减去不氧化

管后）的含量，μg；Vo － 标准采样体积，L。四、紫外-可见分光光度法的应用第71页，共99页，2023年，2月20日，星期四乙酸铅棉花晾干装入玻璃导管时注意个人防护，乙酸铅棉花适量，棉花变黑色说明硫化氢气体存在，应及时更换乙酸铅棉花。还原剂碘化钾溶液和氯化亚锡溶液要密闭保存，防止被空气中氧气氧化。可现用现制，加入碘化钾溶液后溶液颜色变黄,再加入氯化亚锡溶液后溶液应变无色，若溶液仍显黄色，说明砷元素没有被还原完全，应加大还原剂用量。砷化合物的二乙氨基二硫代甲酸银分光光度法GBZ/T160.31-2004

四、紫外-可见分光光度法的应用第72页，共99页，2023年，2月20日，星期四样品处理：取4.0ml于具塞比色管中，加入6ml吸收液，混匀，供测定。计算公式中的系数:乘以2.5。二氧化硫的甲醛缓冲液－盐酸副玫瑰苯胺分光光度法GBZ/T160.33-2004

四、紫外-可见分光光度法的应用第73页，共99页，2023年，2月20日，星期四主要问题：氯化氢空白值偏高，标准系列及样品吸光度偏低。样品应在48h内测定。

在测定过程中,显色剂的加入量必须十分准确。溴化物、碘化物、硫化氢和氰化氢的干扰也可使空白值偏高。比色皿可使用20mm。氯化氢和盐酸的硫氰酸汞分光光度法GBZ/T160.37-2004

四、紫外-可见分光光度法的应用第74页，共99页，2023年，2月20日，星期四按苯可溶物计的项目焦炉逸散物

煤焦油沥青挥发物石油沥青烟四、紫外-可见分光光度法的应用第75页，共99页，2023年，2月20日，星期四焦炉逸散物GB17054—1997车间空气中焦炉逸散物(苯溶物)测定方法各种化学成分的气体和颗粒物。包括煤焦油沥青挥发物（苯,蒽，苯并[α]芘,菲,芘,β-萘胺）,痕量金属(铍铬镉铅镍等)和气体(如氮氧化物和二氧化硫等)。主要成分是多环芳烃化合物，主要致癌成分为苯并［a］芘（GBZ/T160.44-2004

）。四、紫外-可见分光光度法的应用第76页，共99页，2023年，2月20日，星期四煤焦油沥青挥发物(焦炭工业分析测定方法，称取小于0.2mm样品1g于坩埚中，在900±10℃下连续加热7min后取出冷却至室温称量)从煤、石油(石油沥青外)、木材和其他有机物的蒸馏残渣中挥发出来的稠合多环芳烃。包括蒽，苯并[α]芘,菲,芘等四、紫外-可见分光光度法的应用第77页，共99页，2023年，2月20日，星期四石油沥青烟(GB18553-2001车间空气中石油沥青（烟）职业接触限值)成份复杂,不同的沥青成份之间变化很大。因而沥青烟的成份也相当复杂,总体上讲沥青烟的组分与沥青近似,主要是多环芳烃及少量的氧、氮、硫的杂环化合物。苯可溶物与苯并[α]芘的识别及检测四、紫外-可见分光光度法的应用第78页，共99页，2023年，2月20日，星期四有毒物质金属、非金属元素单质及化合物无机化合物有机化合物回顾四、紫外-可见分光光度法的应用第79页，共99页，2023年，2月20日，星期四大幅度改变测试波长时，需等数分钟后才能正常工作（光电管响应较慢）灵敏度调至1（放大倍率最小），仪器稳定灵敏度改变后要重新调节A为0或T为100％接通电源前检查仪器安全性，电源接线牢固，接地线通地良好，旋钮起始位置正确接通电源后预热20-30分钟五、常见问题及注意事项1、分光光度计的保养与维护第80页，共99页，2023年，2月20日，星期四安置在干燥、无污染的地方；仪器内的防潮硅胶应定期更换或再生；仪器停止工作时，必须切断电源，应按开关机顺序关闭主机和稳流稳压电源开关；比色皿使用完毕后，立即用蒸馏水或有机溶剂冲洗干净，并用柔软清洁的纱布把水渍擦净；仪器经过搬动，应及时检查并纠正波长;期间核查：核查的指标、要求、核查步骤、数据处理方法、结果如何判断等。五、常见问题及注意事项第81页，共99页，2023年，2月20日，星期四2、比色皿的配套性问题

比色皿必须配套使用，否则将使测量结果失去意义，

在进行每次测试前均应进行比较。比色皿内注入同样的液体石英比色皿：220nm、700nm装蒸馏水玻璃比色皿：700nm装蒸馏水，将其中一池的透射比调至100%，测量其他各池记录其示值之差及通光方向如透射比之差在±0.5%的范围内则可以配套使用，

若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。五、常见问题及注意事项第82页，共99页，2023年，2月20日，星期四

3、采样误差的来源：

收集器选择不合适；采样时机不当；采样点选择不当；采样高度选择不当；采样对象选择不当；个体采样器佩戴不当；采样时间不合要求。正常生产状态下，非正常（意外事故、防护设施失效、人为影响因素等）时不能采样五、常见问题及注意事项第83页，共99页，2023年，2月20日，星期四

采样装置漏气；采样过程污染；采样吸收液损失；采样量超过收集器的吸收容量或吸附容量；使用了错误的采样流量。挥发性大的吸收液采样要补充吸收液至原来体积五、常见问题及注意事项第84页，共99页，2023年，2月20日，星期四

气象因素带来的误差在高温（40℃以上）或低温（10℃以下）条件采样，要事先测试采样效率；在高温（35℃以上）或低温（5℃以下）条件采样，要进行体积换算；湿度的影响；风向的影响;气压影响，气压低于96.8kPa或高于103.4kPa要进行体积换算。五、常见问题及注意事项第85页，共99页，2023年，2月20日，星期四空气收集器的类型、性能与规格；采样前检查采样系统的气密性；采样器的流量校准；定时装置的准确性；收集器的吸附效率、吸收效率。根据现场的防爆要求选择适合的采样仪器五、常见问题及注意事项有机化合物：碳管、硅胶管气溶胶态：滤料采样法、冲击式吸收管法、多孔玻板法、气泡式采样介质第86页，共99页，2023年，2月20日，星期四吸收管吸收液用量mL采样流量L/min适用范围大型气泡吸收管5～100.5～2.0气态和蒸气态小型气泡吸收管20.1～1.0气态和蒸气态多孔玻板吸收管5～100.1～1.0气态和蒸气态雾态气溶胶冲击式吸收管5～100.5～2.03.0气态和蒸气态气溶胶态五、常见问题及注意事项第87页，共99页，2023年，2月20日，星期四采集气溶胶状态毒物：氨、二氧化硫、硫化氢、氯、二氧化氮、汞、氟化氢等五、常见问题及注意事项第88页，共99页，2023年，2月20日，星期四五、常见问题及注意事项采集蒸气态、雾态气溶胶第89页，共99页，2023年，