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文档简介
牛乳蛋白质的
提取与鉴定一、实验目的:了解蛋白质的化学性质;掌握蛋白质的提取方法和鉴定理。二、实验原理:牛乳中含丰富的蛋白质(水分87.8%、脂肪3.5%、蛋白质3.1%、乳糖4.9%、灰分0.7%、能量29.kg/100kg),其中主要是酪蛋白。酪蛋白在牛乳中约占总蛋白量的5/6。
2、酪蛋白鉴定的原理
酪蛋白中含有酪氨酸残基,酪氨酸残基的R基团为:含酚羟基,可与米伦试剂反应先生成白色絮状沉淀,继续反应生成红色沉淀。蛋白中还含有含硫氨基酸(胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸),在碱性溶液中水解后可与醋酸铅反应生成黑色的铅盐
三、操作步骤(一)酪蛋白的制备新鲜牛奶、醋酸纳缓冲液各5ml
40℃
分别加热至同样温度
上清液:保留做鉴定(烧杯)(三)边加边摇混匀
5min沉淀加4ml95%的乙醇离心5分钟
上清液:弃去沉淀:做鉴定3000r/min离心(三)乳清中可凝固性蛋白质鉴定:将第一次离心所得的上清液徐徐加热,出现蛋白质沉淀(球蛋白、清蛋白)。四、实验结果五、讨论二、常用生化仪器使用
离心机
离心技术(centrifugaltechnique):根据颗粒作匀速圆周运动时受到一个外向的离心力的行为而发展起来的一种分离技术。
离心技术应用很广,诸如分离出化学反应后的沉淀物,天然的生物大分子、无机物、有机物,在生物化学以及其它的生物学领域常用来收集细胞、细胞器及生物大分子物质。实验室用普通低速离心机实验室普通离心机使用方法1.将离心机放在坚实而平整的工作台上;2.在适用的离心管中加入样品,必须对称配重,否则会损坏离心机;3.按离心机转头的离心管位置刻度所对应孔插入,放下离心机顶盖;4.检查确认调速钮处于最低速位置;5.打开电源开关,调速到需要的转速;6.选择工作时间,调“选时”钮到需要的位置。7.离心完成,离心机自然停止。
2、离心机使用注意事项(1)严禁各种液体和杂物进入离心工作室,那样会损坏主机;(2)仪器电源线应有良好的接地,以免发生意外;(3)离心机工作时不要打开顶盖;(4)电压的高
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