1序论反射1442508628课件

动物生理学实验

2012.10主讲教师：

魏香电话：

手机：邮箱：weixiang@

协助指导教师：李英姿电话：

手机：邮箱：lyz@助教王卓然博士：72241，，

姜敬非

博士：96270，,

主要参考资料生理学实验指导。魏香，谢佐平，苏付荣，编著。清华大学出版社，2005。生理学实验（第三版）。谢景田、刘燕强、崔庚寅主编。高等教育出版社，2009.动物生理学实验。张才乔主编。科学出版社，2008。生理科学实验教程。陆源，夏强主编,浙江大学出版社，2004。考核方式及评分方法课程满分100分：平时成绩占70％，期末考试成绩占30％。*平时成绩包括课上操作（20%）和实验报告（80%，

包括预习报告和实验结果报告）*期末考试为实验设计，包括设计报告、设计内容

完成情况、设计总结报告实验内容安排日期实验内容1008-09序论；反射弧分析及反射时测定;坐骨神经-腓肠肌标本的制备1015-16骨骼肌单收缩的分析；骨骼肌收缩的总和与强直收缩；神经干动作电位的观察；神经冲动传导速度的测定；坐骨神经不应期的测定1022-23蟾蜍心室的期外收缩与代偿间歇；在体蛙类心搏起点与传导阻滞1029-30离子和药物对蟾蜍心脏生理功能的影响1105-06影响血液凝固的因素；人体实验；实验动物知识1112-13家兔动脉血压的神经、体液调节；影响家兔尿生成的因素1119-20家兔呼吸运动的调节；家兔消化道运动的在体观察1126-27实验设计及考试部分设计题目反射弧组成分析实验蟾蜍坐骨神经－腓肠肌标本制备方法改进探讨乙醇对神经的影响心脏不同部位的自动节律性不同常见饮料对心脏功能的影响蛙心灌流拓展双蛙心灌流一种简易的家兔离体心脏灌流方法*肝的解毒功能温度对家兔血压和呼吸的影响氧气含量对家兔呼吸运动的影响家兔提睾反射及提睾肌收缩的调节实验课的总体要求遵守实验室规则、尊重客观事实主动学习、分工合作、独立思考实验室安全实验课要求实验课前做好预习，参照网络课件，写出预习报告：

预习报告内容：实验题目本次实验要解决的主要问题利用的主要理论知识需掌握的实验技术

提出一个科学问题提交预习报告时间：上课前一天，可交纸版，也可在网络学堂提交。实验课要求实验课后：＊将实验用品擦洗干净、归位，经老师查验无误后方可离开。＊值日生做好实验室清洁工作。＊整理实验记录，认真书写实验报告，按时通过网络学堂上交报告（下一次上课前）。实验报告的书写总体要求：

独立完成，语句通顺，文字清楚，表达简洁明了。

一份完整的实验报告应包括以下几部分：姓名班次组别同组者日期实验序号及题目实验目的及意义实验对象及器材实验方法及步骤实验结果分析与讨论结论

生理学的基本概念生理学（Physiology）是生命科学中的一个分支，它以生物机体的功能为研究对象。生理学的任务就是要研究这些生理功能的发生机制、发生条件以及机体所处内、外环境的变化对这些功能所产生的影响，从而找到各种生理变化的规律。动物生理学实验中应掌握的基本实验方法与技术生理实验软件及相关配件的正确使用；常用手术器械的正确使用；常用实验动物的抓取、麻醉及基本操作技术；双毁髓蟾蜍的制备；蟾蜍坐骨神经－腓肠肌标本的制备；家兔动、静脉插管，气管插管，膀胱插管实验用动物蟾蜍家兔RM6240多道生理信号采集处理系统主要实验记录设备软件请在网络学堂下载并安装反射弧模式图1感受器；2传入神经纤维；3神经中枢；4传出神经纤维；5效应器12345实验目的及意义反射是指在中枢神经系统参与下的机体对内外环境刺激的规律性应答。反射活动的结构基础称为反射弧，包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器。在自然条件下，反射活动一般都需要经过完整的反射弧来实现，如果反射弧中任何一个环节中断，反射即不能发生。实验目的及意义反射时是指从施加刺激到效应器产生反应所经历的时间。在一定条件和范围内，刺激强度越大，反射时越短。以蟾蜍屈肌反射为例，学习并掌握测量反射时的方法，了解刺激强度与反射时的关系。分析反射弧的组成，并探讨各部分在反射活动中的作用。蟾蜍，蛙类手术器械一套，蛙板，铁支架，肌夹，玻棒，小滤纸片，纱布，培养皿，小烧杯，棉花，秒表盐酸（0.2%,0.5%,1%），2%普鲁卡因，清水

实验对象与器材实验步骤脊蟾蜍制备：◆右手持探针由头背侧前端沿正中线向脊柱端触划，当触到凹陷处（头前部，位于两个耳后腺之间），即枕骨大孔处，将探针垂直插入，左右摇动，切断脑和脊髓的联系，然后将探针向前刺入颅腔内，将探针左右摇动、旋转，捣毁脑组织。

保留脊髓完好。◆为了实现快速有效地破坏脑组织，可以采用去上颌法，即用粗剪刀沿蟾蜍嘴角边缘将其整个上颌（包括脑组织）剪除。实验步骤分离坐骨神经：将脊蟾蜍腹位固定于蛙板上，用手术剪剪开左侧大腿背部皮肤，分离肌肉和结缔组织，暴露坐骨神经，在神经下穿一条丝线备用。半膜肌股二头肌反射弧组成分析I：用0.5%HCl分别刺激二后肢的最长趾趾端皮肤，观察记录屈肌反射的反射时，之后立刻用清水洗净刺激部位，并用纱布轻轻拭干水。在右膝关节处将皮肤作一环形切口，剥去切口以下的全部皮肤。再用0.5%HCl刺激右后肢的最长趾趾端，观察记录结果，洗净刺激部位。用小滤纸片浸1%HCl，贴在该侧后肢环形切口以上的皮肤上，观察记录此侧是否出现反射活动，洗净刺激部位皮肤。实验步骤实验步骤反射弧组成分析II：在坐骨神经上放一浸过2%普鲁卡因的小棉球，每隔1min用0.5%HCl测试左后肢的最长趾趾端皮肤，观察记录该侧后肢屈肌反射变化情况。当左后肢屈肌反射刚刚不能出现时，立即将浸过1%HCl的滤纸片贴在背部，观察左侧后肢是否发生搔扒反射，洗净刺激部位皮肤。4.用探针捣毁脊髓，观察各种反射变化情况。关键技术蟾蜍的抓取脊蟾蜍制备手术剪的正确使用本实验需掌握的实验技术脊蟾蜍制备膝关节以下皮肤的剥离注意事项毁脑时不可伤及脊髓，以免破坏脊髓反射中枢。分离坐骨神经应尽量向上，并尽量剪断与其相连的分支。每次酸刺激条件应保持一致，刺激后应立即用清水洗净刺激部位，并用纱布拭干。剥脱趾端皮肤要完全，若剩留少量皮肤会影响实验结果。思考与探索试自行设计另外一个实验，证明反射弧有五个部分组成。请设计实验证明蟾蜍坐骨神经在反射活动中的具体功能。实验2坐骨神经－腓肠肌标本的制备实验目的及意义蛙类坐骨神经－腓肠肌标本是研究神经冲动和肌肉收缩机能等实验最常用的实验材料，制备此标本是动物生理实验的一项基本但又非常重要的操作技术。通过本次实验，学习破坏蟾蜍脑和脊髓的方法，掌握制备蟾蜍坐骨神经－腓肠肌标本的技术。实验对象与器材

蟾蜍，两栖类手术器械，蛙板，蛙钉，培养皿，滴管，锌铜弓，烧杯，林格溶液，纱布，医用缝合线，玻璃分针，污物盘，眼科剪实验步骤1.破坏蟾蜍中枢（脑和脊髓）制备脊蟾蜍后，将探针退回枕骨大孔，沿与脊椎骨平行的方向向后刺入脊椎，不断捻动探针，使之刺入整个椎管内，彻底捣毁脊髓。若中枢破坏彻底，动物则表现为肌肉松弛、四肢瘫软。2.剪去躯干上部及内脏在脊柱胸段用金冠剪（粗剪刀）剪断脊柱。沿脊柱切口向下剪开两侧腹部皮肤、肌肉至耻骨处，将头、前肢、内脏及腹部软组织全部剪掉，放于污物盘，只保留下端脊柱和下肢。在腹侧脊柱两旁可看到腰骶神经丛。注意切勿触及或损伤坐骨神经。实验步骤3.剥后肢皮肤左手持手术镊夹住脊髓断端，右手捏住断端边缘，剥掉全部后肢皮肤。将标本放于盛有林格溶液的培养皿内，将手和手术器械洗净。4.分离两腿用粗剪刀剪去尾骨杆（骶骨），沿脊椎中线将脊柱剪开，再沿耻骨联合正中央剪开两侧大腿，使两腿完全分离（切勿伤及神经），将两腿浸于林格溶液中。手术镊实验步骤√×实验步骤5.游离坐骨神经1）

取一后肢，腹面向上（背位）固定于蛙板上，沿脊柱侧用玻璃分针轻轻勾起坐骨神经，逐一剪去神经分支至股端。用金冠剪剪断脊柱，只保留一小段椎骨片与坐骨神经相连。2）将标本改为背面向上（腹位）固定，用镊子提起梨状肌，剪断，用玻璃分针将坐骨神经小心勾至背部。再沿坐骨神经沟（半膜肌和股二头肌的肌间缝）分离坐骨神经。用镊子夹住与神经相连的脊椎骨，提起神经，用眼科剪将神经分支及结缔组织膜顺序剪断，将神经一直游离到腘窝处。玻璃分针实验步骤6.游离腓肠肌用镊子夹住脊椎骨，将神经搭在腓肠肌上，用剪刀将膝关节周围的大腿肌肉完全剪除，用金冠剪将膝关节上方的股骨刮干净，暴露骨股并在距膝关节上1-1.5cm处剪断，分离腓肠肌的跟腱，用线结扎，然后自跟腱的附着点剪断，提起跟腱，将腓肠肌分离至膝关节处，将小腿其余部分剪掉。

实验步骤坐骨神经－腓肠肌标本实验步骤7.标本检验左手用镊子轻轻提起结扎神经的线或连接神经的椎骨片，右手用经林格溶液沾湿的锌铜弓短暂轻触坐骨神经，如腓肠肌发生迅速的收缩反应，则表明机能完好。将标本置于林格溶液中，稳定其兴奋性15－20min，即可进行实验。锌铜弓关键技术（毁中枢）双毁髓的方法坐骨神经的剥离技术常用手术器械的正确使用蟾蜍毁中枢技术蟾蜍神经分离技术本实验需掌握的实验技术注意事项在制备标本时，避免过度牵拉神经，不可用手或金属器械触碰神经干。避免动物皮肤分泌物（蟾酥、血液等）污染神经和肌肉，也不要用水冲洗，以免影响组织机能。神经周围的结缔组织要剥离干净。制备标本时，要随时用林格溶液润湿神经和肌肉，防止干燥。实验要迅速，以免时间过长影响标本活性（兴奋性）。