现代环境分析技术专题HPLC-AFS杜君潘兴朋

高效液相色谱-原子荧光光谱联用技术

测定水产品中不同形态汞的研究学生：杜君、潘兴朋班级：化研1316指导教师：余江教授2013年11月5日现代环境分析技术专题讨论主要内容环境中汞的特性及其检测手段1HPLC-HG-AFS测定水产品中不同形态汞的研究2总结与展望323一、环境中汞的特性及其检测手段1.1环境中存在汞的形态及特性环境中的汞无机汞（Inorganicmercury），主要为Hg(Ⅱ)甲基汞乙基汞主要存在有机汞（Organicmercury）苯基汞烷氧基汞有机汞的毒性比无机汞大，有机汞中甲基汞毒性最大（水俣病）检测水中或水产品中的汞一般只检测无机汞、甲基汞和乙基汞5主要内容环境中汞的特性及其检测手段1HPLC-HG-AFS测定水产品中不同形态汞的研究2总结与展望36二、HPLC-HG-AFS测定水产品中不同形态汞的研究2.1实验仪器与材料2.1.1实验仪器LC-20AT岛津高效液相色谱AFS-9230双道原子荧光光谱仪（北京吉天）溶剂过滤器、漩涡混合器、离心机2.1.2实验材料无机汞、甲基汞、乙基汞标准液，甲醇（HPLC级）汞提取：提取液：10%HCl+1%硫脲+0.15%KCl富集柱：C18小柱洗脱液：5%乙腈+0.5%乙酸铵+0.1%半胱氨酸7AFS：紫外灯（UV）汞空心阴极灯载气：氩气（纯度≥99.99%）蒸馏水：GB/T6682二级HPLC：色谱柱(固定相)：C18柱150×4.6mm（i.d），5μm流动相：5%乙腈+0.5%乙酸铵+0.1%半胱氨酸氧化剂：0.5%KOH+1%K2S2O8还原剂：0.5%KOH+0.1%KBH4载流：9%HCl92.3实验方法流程样品的制备与提取高效液相色谱进行分离紫外消解氢化反应气液分离原子荧光光谱分析样品的制备与提取：称取0.25g均质水产品样品于5mL塑料离心管中加入2mL10%HCl+1%硫脲+0.15%KCl提取液硫脲在一定的酸度和电位下与汞进行络合具有富集汞的作用9000r/min下漩涡混合5min，取上清液加2mL提取液重复提取1次，合并两次提取液，过滤，用浓氨水调PH至2到8（使用C18的适宜PH）过C18小柱，用流动相进行两次洗脱，每次2mL，最后定容到10mL样品的制备与提取10样品的制备与提取高效液相色谱进行分离紫外消解氢化反应气液分离原子荧光光谱分析高效液相色谱进行分离：色谱柱（固定相）：C18柱150×4.6mm（i.d），5μm流动相：5%乙腈+0.5%乙酸铵+0.1%半胱氨酸，流速：1mL/min填料柱上的硅羟基容易吸附汞化合物造成灵敏度降低，加入络合剂半胱氨酸加速流动相洗脱能力，乙腈调节极性，乙酸铵调节PH进样体积：100μL紫外消解：氧化剂：0.5%KOH+1%K2S2O8紫外灯(UV)：开K2S2O8具有强氧化性，在紫外灯照射的情况下消解可将有机汞氧化成无机汞。高效液相色谱进行分离紫外消解11样品的制备与提取高效液相色谱进行分离紫外消解氢化反应气液分离原子荧光光谱分析氢化反应：还原剂：0.5%KOH+0.1%KBH4载流：9%HCl原子荧光大多需要高温才能激发，在测定过程中需将元素转化为元素的氢化物，才变得容易激发气液分离：KBH4+3H2O+HClH3BO3+KCl+8H(2+n)H+En+EHn+H22EHn2E+nH2气液分离器还原剂中加入KOH是因为KBH4在空气中易分解，加入KOH可以使KBH4稳定存在氢化反应气液分离132.4实验条件的优化单因素实验法2.4.1流动相中半胱氨酸的量半胱氨酸的含量为0汞混合标准液5μg/L14半胱氨酸的含量为0.1%半胱氨酸的含量为0.3%各形态汞的峰已完全分开乙基汞甲基汞无机汞152.4.2氧化剂中K2S2O8的量浓度：0、5、10、15、20g/L汞混合标准液5μg/L，进样7次

浓度为10g/L，信号强度最高。1%172.5实验结果与讨论2.5.1汞形态化合物分离图

汞混合标准液5μg/L乙基汞甲基汞无机汞182.5.2线性范围和检出限组别线性范围线性方程相关系数R检出限无机汞1.0~1000y=5.0332x+0.110.99990.5甲基汞1.0~1000y=3.0235x-0.200.99960.2乙基汞1.0~1000y=5.1238x+0.040.99980.4表1方法线性范围和检出限（μg/L）192.5.3回收率及精密度试验样品汞形态添加水平（mg/kg）0.050.51.0回收率（%）RSD（%）回收率（%）RSD（%）回收率（%）RSD（%）海鱼无机汞988.4893.4944.6甲基汞924.8974.6933.0乙基汞846.3876.7856.2贝类无机汞10012.2894.2927.8甲基汞883.6953.0876.9乙基汞864.8854.2845.2甲壳类无机汞885.6889.5937.0甲基汞944.0934.8936.7乙基汞806.9845.3836.8表2样品中3个加标水平的回收率（n=6）加标回收率在80%~110%，满足国家标准要求21三、总结与展望

国家规定汞的检测方法为AFS，甲基汞的检测方法为GC，尚未规定有一种同时测定汞各种形态的国标方法。利用HPLC-HG-AFS联用技术建立了一种实用可靠快速分析