口蹄疫、蓝耳流行现状与有效防控-2

陈楚雄曾任职：湖南鹏扬原种猪场总经理；北京资源集团专家顾问；华中农业大学动物传染病诊断中心服务老师；武汉科前生物股份有限公司华南区技术总监。第一页，共91页。1996年6月，保吉安集团成立；2010年12月，国内首家海外上市的动物保健品公司股票代码（HK0940）香港上市2011年4月，入股美国辉瑞集团（硕腾）；2012年9月，美国礼来入股中国动保；2014年4月，集团入股辽宁益康集团。第二页，共91页。香港上市企业第三页，共91页。

中国动保旗下-----生物制品板块：

内蒙古必威安泰生物科技有限公司口蹄疫疫苗山西隆克尔生物制药有限公司

蓝耳病疫苗（

蓝盾）第四页，共91页。

一、口蹄疫的流行现状与有效防控

第五页，共91页。提纲一】、口蹄疫概况与口蹄疫流行态势二】、口蹄疫疫苗生产工艺技术亮点三】、口蹄疫有效防控要点四】、案例分析第六页，共91页。一、口蹄疫概况与流行态势第七页，共91页。口蹄疫主要侵害猪、牛和羊等重要经济动物，易感动物有80多种，被OIE列为法定必报病，我国农业部列为一类动物疫病。也被称为“政治经济病”。1.1、口蹄疫的危害和流行现状第八页，共91页。口蹄疫（FMD）的危害危害家畜健康的头号传染病FAO/OIE法定报告病中国政府一类病列入国际生物武器履约议定书名录国际社会公认的“政治经济病”影响国家的经济、对外贸易、公共卫生与食品安全

特点一：损失巨大疫情实例扑杀销毁动物数量经济损失1997年中国台湾550万头103亿美元，72万人失业2001年英国450万头90亿英磅（当年损失）2010年日本29万头800亿日元，宫崎牛几乎绝种2010年韩国330万头18亿美元（扑杀补偿费）第九页，共91页。澳大利亚-1801,1804,1871and1872南非-1903美国-1870,1880,1884,1902,1908,1914,1924(x2),and1929加拿大1870阿根廷–1870智利–1871巴西–1895乌拉圭–1910玻利维亚–1910英国1839非洲南部178010爪哇1887日本1902菲律宾1902意大利1514斯里兰卡1842德国1754特点二：流行广泛据FAO和OIE对178个国家和地区调查统计，确认发生过口蹄疫的有132个，从未发生过的仅有30个（大部分是岛国），其余16个情况不明。1514年（最早记载）1897年（确认病原）传入中国1910～1920年（病例记载）1840年，鸦片战争（推测）第十页，共91页。特点三：防控困难由该病的特性所决定①传染性强，发病率高，传播迅速接触传染，空气传播，跨洲际、跨国界远距离传播。②易感动物众多猪、牛、羊等偶蹄类家畜和野生动物70多种。③病原型多易变血清型（7种），遗传拓扑型（仅O型就有11个拓扑型），遗传谱系，表型差异的毒株。④病毒持续感染反刍家畜动物可持续带毒，个体数月至数年，群体数年至数十年。⑤疫苗效力有限仅能保护动物临床不发病，不能完全阻断感染，不能获得终生免疫，不能消除持续带毒。第十一页，共91页。特点四：FMDV的多样性与病毒适应猪的变异接连发生1977年公布口蹄疫病毒有65个亚型，每年还会有新的亚型出现。不同血清型之间几乎没有交叉免疫力。同一血清型又存在不同亚型，亚型之间的交叉保护差异巨大。毒力和抗原易不断发生“漂移”过程，导致一系列亚型甚至新型的产生

1、病原：为口蹄疫病毒，有A、O、C、南非1、2、3和亚州I等7个大型。我国流行的主要为O型，该型有9个亚型，但我国只流行3个亚型，即中国亚型，泛亚亚型（1999年）和东南亚亚型（2003年）。

第十二页，共91页。1%O/A/CHA/58O1/Manisa/TUR/69O/ALG/1/99O/CIV/8/99O/GHA/5/93O/KEN/83/79O/KEN/2/95O/UGA/5/96O/BUN/7/2003O/KEN/5/2002O/KEN/7/2002O/KEN/3/2002O/UGA/3/2002O/MAL/1/98O/TAN/7/98O1/Kaufbeuren/FRG/66O3/VEN/51O2/Brescia/ITL/47O/ISA/1/74O/JAV/5/72O/ISA/1/62O/ISA/9/74O/ISA/8/83O/HKN/14/82O/PHI/7/96O/TAW/81/97O/CAM/2/98O/VIT/7/97O/TAI/4/99O/IRQ/30/2000

EastAfrica1(EA-1)

WestAfrica(WA)

MiddleEast-SouthAsia(ME-SA)

South-eastAsia(SEA)

Europe-SouthAmerica(Euro-SA)

Indonesia-2(ISA-2)

Indonesia-1(ISA-1)

Cathay

EastAfrica2(EA-2)WRLFMDIAHTopotypesofOtypeFMDV第十三页，共91页。血清型毒株名称起源地年份/省份发病畜种传播范围O型Cathay抗原变异株不详1970/香港1972/广东猪2007/广东猪16省份Mya-98东南亚2010/广东猪29省份PanAsia嗜性变异株PanAsia-New南亚1999/湖北牛2008/河南猪2011/贵州牛17省份Asia1型GⅡGⅤ中亚2003/新疆牛6省份南亚2005/江苏牛18省份A型Sea-97/G1Sea-97/G2东南亚2009/湖北牛7省份2013/广东猪特点四：病毒适应猪的变异接连发生得出结论：近年我国口蹄疫流行毒主要来自境外，流行后产生变异株，适应猪的变异株多出现于广东。我国口蹄疫流行株、变异株收藏名录（首次疫情或分离地）NRL-FMD第十四页，共91页。当前全球防控口蹄疫三大焦点区域2015年全世界无疫国家已达68个，每年仍有50-60个国家通报有疫，集中在亚洲、非洲以及欧洲、南美少数国家，其畜产品因国际贸易规则严格限制而不能出口。①东南亚流行毒向东亚、东北亚强力传播，多型多毒株同时流行②东、西方流行毒在中东地区交汇，产生大量无苗可防的变异株，引起欧洲恐慌③南亚流行毒远播至北非，引发严重疫情第十五页，共91页。OIE:WAHID1O型(Mya98,PanAsiaandCathay)：东南亚、中国、俄罗斯、哈克哈斯塔、蒙古、朝鲜、韩国、日本。2A型(SEA-97)：东南亚、中国、俄罗斯、蒙古、哈克哈斯塔、朝鲜、韩国。3Asia1型(GIVandGV)：东南亚、中国、俄罗斯、蒙古、朝鲜。东南亚：三个血清型和多个谱系毒株Knowles,Heetal.,2012Zhengetal.,2012第十六页，共91页。东O/Mya-98（2010广东广州）A/Sea-97/G2（2013年广东茂名）SEACFMD第十七页，共91页。

我国深受其害A型O型Asia1型

2005-2014年，我国公布110次疫情，有三个血清型（Asia1=46，O=37，A=27）。毒株复杂、变异严重。湖北武汉（2009）动物扑杀赔偿费达2亿元广东茂名（2013）贵州天柱（2011）四川广元（2012）第十八页，共91页。2013年至今O型口蹄疫通报信息（内部资料请勿外传）序号通报日期发生地区012013-01-07四川广元022013-02-27西藏拉萨032013-05-20江苏常州042013-06-13西藏日喀则052013-07-22西藏日喀则062013-08-13西藏都昌072014-04-18江西鹰潭082014-11-26江苏盐城第十九页，共91页。2013年至今A型口蹄疫通报信息（内部资料请勿外传）序号通报日期发生地区012013-02-27广东茂名（猪）022013-03-18青海西宁（牛羊）032013-05-15西疆乌鲁木齐（牛羊）042013-05-30西藏拉萨（牛羊）052013-06-09云南迪庆（牛羊）062013-08-26西藏那曲（牛羊）072014-10-15西藏南山（牛羊）082014-12-15西藏（牛羊）第二十页，共91页。第二十一页，共91页。FAO口蹄疫参考试验室的检测结果2010年26个国家

1218个样品第二十二页，共91页。口蹄疫血清型变化

到目前为止，中国仅见O、A、亚洲I型血清型的口蹄疫。我国口蹄疫疫情流行呈现非季节性，有多个毒株共同流行。但2015、16年年依然以O型为主，而O型，以缅甸98为主，同时伴有新猪毒变异株。目前常用的制苗毒株为O/MYA98/BY/2010株（缅甸-98谱系）、O/GX/09-7株+O/XJ/10-11株（新猪毒-2+Mya-98谱系）。为了有效地预防控制猪群口蹄疫，采用新猪毒-2和Mya-98双毒株疫苗对主要的O型拓朴型有较好的保护谱O型口蹄疫在中国根深蒂固、由来已久。目前猪口蹄疫主要以O型缅甸98株为主。分离株同源性94.1%-----兰州兽医研究所副所长张永光第二十三页，共91页。新猪毒谱系ME-SA中东-南亚型SEA东南亚型Cathay中国型耿马（缅甸98）谱系PanAsia泛亚谱系ME-SA中东-南亚型PanAsia泛亚谱系中国流行的O型FMDV拓扑型第二十四页，共91页。MYA98疫情“近50年来最严重的一次”●2010年，亚洲发生口蹄疫大流行，疫情波及东南亚、东亚、东北亚地区的缅甸、泰国、老挝、日本、韩国、朝鲜、蒙古、俄罗斯、中国及中国香港、中国台湾等10多个国家和地区。此次口蹄疫大流行危害之大、损失之重，被联合国粮农组织（FAO）首席兽医官JuanLubroth博士称为“近50年来最严重的一次”。●已消灭口蹄疫的日本、韩国也未能幸免。著名的肉牛品种“宫崎牛”几乎灭种。●中国多个省份暴发疫情，经济损失巨大。急需查明疫源，研究防治对策和技术。第二十五页，共91页。3、排毒量大猪是含毒气溶胶的最大制造者—“传播器”病猪从所有分泌和排泄物中排毒呼吸道排毒108IU/天；粪便排毒105.5—6.5IU/天；水泡皮109.0—9.5TCID50/g；水泡液1010TCID50/ml猪吸入400IU可发病，食入10万个IU可发病。临床症状出现后5天是排毒高峰期

要特别注意该时期的第二十六页，共91页。4、毒力大，传染性强干燥粪便14天尿39天泥浆6个月1头病牛的排毒量可感染100万头牛；1克病猪蹄部水疱皮可使10万头猪感染发病在人的呼吸道中存活1-2天第二十七页，共91页。二】、中国动保口蹄疫疫苗生产工艺亮点第二十八页，共91页。中国口蹄疫疫苗生产企业内蒙古必威安泰生物科技有限公司中牧股份兰州生物药品厂兰州兽医研究所中农威特公司金宇保灵生物药品有限公司新疆天康畜牧科技有限公司云南保山疫苗厂上海申联生物制品有限公司第二十九页，共91页。优质高效疫苗的标准1、毒株匹配，针对性强；2、生产工艺先进，抗原含量高，杂蛋白少；3、检测方法科学、精准。第三十页，共91页。

O/Cathay/GX/09-7株+O/Mya98/XJ/10-11株

含有Cathay拓朴型猪毒谱系和东南亚拓朴型缅甸98谱系

第三十一页，共91页。转瓶细胞培养现场背景资料-传统工艺（转瓶培养）中國動物保健品有限公司

追求无限挑战未来ChinaAnimalHealthcareCo.,LtD.第三十二页，共91页。转瓶培养操作现场背景资料-传统工艺（转瓶培养）中國動物保健品有限公司

追求无限挑战未来ChinaAnimalHealthcareCo.,LtD.第三十三页，共91页。

内蒙古必威安泰生物科技有限公司第一家农业部批准的以全自动化、纯悬浮培养技术生产牲畜口蹄疫灭活疫苗的企业，一期工程总投资2亿多元人民币，设计年产牲畜口蹄疫灭活疫苗9亿毫升以上。按照农业部GMP要求设计和建设，同时符合美国FDA和欧盟GMP标准，采用国际最大规模细胞悬浮培养技术生产牲畜口蹄疫灭活疫苗，单批次产量可达5000万毫升病毒抗原。是目前世界上最大的单批次培养规模。2016年3—4月工厂改造，增加两个6吨的罐，到时年产牲畜口蹄疫灭活疫苗可达20亿毫升以上。中国动保旗下：内蒙古必威安泰生物科技有限公司第三十四页，共91页。细胞反应器病毒反应器病毒灭活系统乳化系统

进口德国赛多利斯生产线第三十五页，共91页。进口抗原浓缩纯化系统细胞破碎微滤系统超滤系统分离系统第三十六页，共91页。实现悬浮培养工艺制备疫苗产业化转瓶培养工艺悬浮培养工艺培养抗原体积1.5L1000～4000L人数/车间380-400人/车间30-40人/车间年产抗原体积抗原4亿mL/年抗原12-20亿mL/年

年产抗原量2亿微克抗原30亿微克抗原浓缩纯化工艺无纯化工艺抗原浓缩纯化工艺配制方式按照抗原体积配苗按照抗原含量配苗第三十七页，共91页。培养基培养基生产线前种子反应器20升反应器细胞培养100升反应器细胞培养500升反应器细胞培养------2500升反应器细胞培养7500升反应器病毒培养灭活罐病毒浓缩灭活BHK21悬浮种细胞FMDV种毒抗原储存抗原乳化疫苗分装206佐剂BEI灭活剂ProductionProcess破碎、除碎、浓缩中國動物保健品有限公司

追求无限挑战未来ChinaAnimalHealthcareCo.,LtD.第三十八页，共91页。悬浮培养工艺技术指标中国动保是国内口蹄疫疫苗领域行业的引领者和标准制定者第三十九页，共91页。悬浮培养工艺应用最先：2008年，在国内率先进口全自动化纯悬浮培养技术；规模最大：成功应用7500升反应器；工艺最优：抗原含量最高，稳定性最好，批间差最小；产能最多：通过增大体积，工艺改进，技改扩建，抗原年产能达100—200亿ug，年产口蹄疫灭活疫苗达20亿毫升以上，亚洲第一。第四十页，共91页。抗原浓缩纯化技术设备先进：全部进口设备；工艺一流：多级抗原浓缩与纯化系统集成；效果显著：杂蛋白去除率达99%以上；抗原浓缩倍数达800—1000倍；持续提升：技术积累，自主优化，不断创新。第四十一页，共91页。全面完善的量化检测体系146S（口蹄疫完整病毒颗粒）测定：国内率先建立，专利技术PD50测定：疫苗效力每头份30以上；内毒素含量测定：在国内率先引进，应用。杂蛋白测定：国内领先；成品破乳技术：国内领先，具有重要应用价值。第四十二页，共91页。中国动保口蹄疫品质与其他苗对比项目中国动保口蹄疫疫苗其他口蹄疫疫苗毒株匹配性高度匹配高、低搭配抗原含量（146S）20ug/头份以上3—8ug/ml疫苗效力30PD50/头份以上6--15PD50/头份杂蛋白含量100ug/ml以下200-500ug/ml内毒素含量1EU/ml以下（几乎为零）20EU/ml安全性副反应极少副反应发生率较高快速免疫应答4—7天不显著抗体持续期4—6个月3—4个月或更短第四十三页，共91页。中国动保品质保证合作伙伴ELANCO(礼来)现场管理.利用ELANCO(礼来)全球生产系统的资源，从原料质量到生产的每一个环节都符合或超过GMP要求并符合欧盟标准。中国动保是国内口蹄疫疫苗领域行业的引领者和标准制定者是最先达到国际先进水平的口蹄疫生产企业。第四十四页，共91页。三】、口蹄疫有效防控要点第四十五页，共91页。2012年，FAO/OIE要求全球各成员国推行口蹄疫逐步控制路径。我国处于第三阶段。我国采取免疫为主的综合防控策略国务院办公厅，2012年5月发布了《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》。将口蹄疫列为优先防治和重点防范的动物疫病。口蹄疫免疫防控和区域净化的目标。将疫苗免疫作为主要的技术支撑手段。英美采取扑杀措施，欧盟（除英国）和其它发达国家采取免疫与扑杀结合的措施《CouncilDirective2003/85/EC》。

我国采取免疫为主的综合防控措施+区域控制和无疫区建设。（Science,2011）第四十六页，共91页。第四十七页，共91页。第四十八页，共91页。第四十九页，共91页。现状：口蹄疫难防住？实践证明：口蹄疫难防住的主要原因：1、国家经济实力与政策；2、由口蹄疫的特性；3、毒株匹配性；4、科学免疫方法；目前猪口蹄疫主要以O型缅甸98株为主。分离株同源性94.1%-----兰州兽医研究所副所长张永光要想防控好口蹄疫，减少损失：O型口蹄疫基础免疫必须做好！！第五十页，共91页。基础免疫：是指为使机体能够有效地产生高水平的中和抗体，首次免疫某种疫苗应采取的免疫方法。大部分疫苗的基础免疫需要间隔一个月接种2次后才能达到满意的免疫效果。即完成疫苗的首免和二免。科学免疫：基础免疫+合理免疫程序基础免疫即间隔一个月打两针，（口蹄疫）每针2ml第五十一页，共91页。第五十二页，共91页。免疫学原理：口蹄疫基础免疫：间隔30天打两针

第1针第2针

抗体水平抗体保护线30天

3--4个月时间第五十三页，共91页。全群防控全程保护第五十四页，共91页。114天028-35日农业部推荐免疫程序配种前分娩前3-4周10-12周4周后台湾4-6月1月后OIE菲律宾分娩前3-4周母猪分娩前是否免疫猪口蹄疫免疫程序？？？8-10周，4周后第五十五页，共91页。母猪抗体具有坚强的保护力(母源抗体保护8—12周）日龄182号183号184号189号1191.29(－)1.78(－)1.84(－)1.84(－)1121.09(－)1.70(－)1.08(－)1.78(－)1050.78(－)0.92(－)0.67(－)0.75(－)980.81(－)0.76(－)0.94(－)0.85(－)910.88(－)0.82(－)0.87(－)0.85(－)840.71(－)0.76(－)0.60（＋）0.75(－)770.58(＋)0.60(＋)0.56(＋)0.60(＋)700.41(＋)0.50((＋)0.52(＋)0.55(＋)630.38(＋)0.42(＋)0.48(＋)0.46(＋)560.28(＋)0.37(＋)0.40(＋)0.42(＋)490.23(＋)0.17(＋)0.28(＋)0.38(＋)420.18(＋)0.08(＋)0.16(＋)0.07(＋)350.07(＋)0.07(＋)0.07(＋)0.07(＋)何时首免？？？第五十六页，共91页。方案：口蹄疫合理免疫程序（参考）结合猪场母源抗体情况制定科学的免疫程序：1、经产母猪（公猪）（O型双价）

1)、9月、10月，产前3--4周，2ml/次；

2）、或一年普打4次：9,10,1,5月2ml/次。2、仔猪：

（O型双价）

首免：8-12周龄1-2ml/头；二免：12-16周龄2ml/头；三免：视情况免疫。由于目前出栏时间的推迟，建议在150--175日龄左右进行第三次免疫，以防抗体水平维持不到出栏时间。3、后备母猪：配种前普打两次。第五十七页，共91页。方案：口蹄疫合理免疫程序（参考）有A型口蹄疫感染的猪场建议：结合猪场母源抗体情况制定科学的免疫程序：1、经产母猪（公猪）：

1)、9月、10月（O型双价），产前3--4周（O-A型），2ml/次；

2）一年普打4次：9,10月（O型双价）；1,5月（O-A型）2ml/次。2、仔猪：

首免：8-12周龄（O型双价）1-2ml/头；二免：12-16周龄（O型双价）2ml/头；三免：（O-A型）2ml/次，视情况免疫。由于目前出栏时间的推迟，建议在150--175日龄左右进行第三次免疫，以防抗体水平维持不到出栏时间。3、后备母猪：配种前普打两次。第五十八页，共91页。

口蹄疫的综合防制措施

1、有临床症状猪扑杀，干燥，消毒；2、用药物防治继发感染(心肌炎、胃肠炎），例如阿莫西林，恩诺沙星，多维，黄芪多糖饮水3-5天；3、没有临床症状的猪，紧急免疫口蹄疫疫苗2mL，隔30天后进行加强免疫2mL；4、全场水中添加0.3%柠檬酸，连喂3-5天。第五十九页，共91页。实时监测1、每年9-10月份对全场猪抽样进行抗体检测；一个月后再检测一次；（特别注意后备公母猪）或每4个月检测一次；2、测母源抗体（49日龄、56日龄、63日龄，70日龄，77日龄；84日龄仔猪5头），根据抗体情况确定仔猪首免日龄；若能配合检测相对应母猪抗体更好。3、首免、二免后21-28天的育肥猪抗体；（注：随机采样15份，每栏3头为宜）；4、周边有口蹄疫疫情时监测：首免、二免后4个月的育肥猪抗体。此项很重要。（注：随机采样15份，每栏3头为宜）第六十页，共91页。四、案例分析第六十一页，共91页。案例分析湖南某猪场（华中农大动物传染病诊断中心检测），存栏母猪1200头，母猪：9月10日普免口蹄疫，10月10日加强免疫；育肥猪：首免63日龄（9月10—17日），二免93日龄（10月10—17日）；11月10日采血（1—15号为母猪；16—30号为育肥猪）检测抗体，具体数据如下：母源抗体水平较低的情况下；首免，一个月后加强，二免后30天后检查抗体如下第六十二页，共91页。样品抗体原始效价编号12345678910抗体效价454420392362384329262304462414编号11121314151617181920抗体效价388346412364386210132160168180编号21222324252627282930抗体效价166121188168167180190211184194第六十三页，共91页。第六十四页，共91页。二、目前蓝耳病流行现状与有效防控第六十五页，共91页。目前我国猪蓝耳病的临床表现(温和型蓝耳为主）偶尔爆发流产；散发性的晚期流产，产后无奶；以慢性、亚临床型为主；猪群的持续性感染、隐性感染、带毒排毒（母猪零散流产，保育或育肥猪难养------猪难养、易“闹病”）。第六十六页，共91页。第六十七页，共91页。有效防控好蓝耳病----势在必行1、采食量下降约7%，饲料利用率下降约15%；2、生长率下降近20%，育肥期延长约25天；3、每头猪成本增加约14美元，约合87元人民币。4、每年给加拿大养猪业带来的损失达1.3亿美元；5、每年给美国养猪业带来的损失高达5.6亿美元；6、中国养猪数量比美国多得多，因此损失更大。第六十八页，共91页。二、蓝耳病的特点（六大杀手锏）第六十九页，共91页。

蓝耳病抗体依赖增强作用（ADE现象）

蓝耳病抗体依赖增强作用：

病毒的抗体滴度在高水平时对病毒存在中和作用，而在亚中和滴度水平时（称为感染增强抗体）与病毒形成病毒-抗体复合物，能明显增强Fc受体（FcR）或补体受体（CR）阳性细胞对该种病毒感染，这种现象称为抗体依赖的病毒感染增强作用(Antibody-dependentenhancementofvirusinfection,ADE)。第七十页，共91页。抗体水平产生ADE范围疫苗免疫后抗体消长曲线

蓝耳病毒ADE现象与疫苗免疫时间（d）免疫原点感染风险增大感染风险增大线1线2第七十一页，共91页。蓝耳苗的分类IngelvacRMLVR98CH-1RCH-1aJXA1JXA1-RJXA1-RHuN4-F112GDr180TJM-F92第七十二页，共91页。

20个厂家生产高致病性蓝耳弱毒疫苗

1、TJM-F92株（6家）山西隆克尔、新疆天康、青岛易邦、吉林特研、北京华威特、硕腾2、JXA1-R株（9家）

中牧成都、广东大华农、吉林鲸象、扬州威克、武汉中博、广东永顺、普莱柯、齐鲁动保、山西海森3、HuN4-F112株（4家）哈尔滨维科、

上海海利、

吉林正业、

哈药疫苗4、GDr180株（1家）：广东永顺第七十三页，共91页。蓝耳弱毒苗毒力分析经典株：毒力较弱；JXA1株经细胞传代98代，毒力较强；HuN4株传代112代，毒力中等；GD株传代180代，毒力较弱；TJM-F92株弱毒活疫苗是由临床分离的高致病性变异毒株TJ株经Marc-145细胞传代至92代而来的；TJ株经细胞传代至第40代时(F40)毒力大大降低。与亲本毒株TJ株相比，TJM-F92株发生了基因缺失：一段360个核苷酸缺失，疫苗的排毒被阻断，对同居猪无感染性，最安全。第七十四页，共91页。中国动保旗下：山西隆克尔生物科技有限公司研制出具有划时代意义的高致病性猪蓝耳病（TJM-F92株）耐热保护剂活疫苗疫苗第七十五页，共91页。1天津株鼻祖蓝盾---目前世界上最有影响力的蓝耳苗2没有免疫干扰第七十六页，共91页。蓝盾3、蓝耳病毒自然双基因缺失的意义

1）、缺失后，疫苗毒的毒力大幅减弱，大量接种后安全；美国KansasStateUniversity的Kim等人(2009)人为缺失Nsp2相应位置基因，使经典毒株的毒力明显减弱。2）、接种基因缺失疫苗后，随着毒力减弱和产生强而持久细胞免疫，疫苗的排毒被阻断，对同居猪无感染性。中國動物保健品有限公司

ChinaAnimalHealthcareCo.,LtD.追求无限挑战未来第七十七页，共91页。猪蓝耳病病毒基因组结构

缺失90个核苷酸缺失360个核苷酸缺失90个核苷酸

NSP2毒力(致病性)下降去除免疫抑制作用强毒为1004个碱基对（bp）天津株为644个碱基对（bp）经典PRRSV变异PRRSV蓝盾（天津株第七十八页，共91页。14401450146014701480149015001510152015301540---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+VR-2332TTGGGAAGATTTGGCTGTTAGTAGCCCCTTTGATCTCCCGACCCCACCTGAGCCGGCAACACCTTCAAGTGAGCTGGTGATTGTGTCCTCACCGCAATGCATCTTCAGGCTJ..C......---AA....CG..G.T...C.CA....T.....A...T.C......ATG......ATG.......CC..AC.....C.AG.GT...G.C.TG..CC..A..TJM..C......---AA....CG..G.T.T.C.CA..T.T.....A...T.C......ATG......ATG.......CC..AC.....C..G.GT...G.C.TG..CC..A..15501560157015801590160016101620163016401650---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+VR-2332CGGCGACACCCTTGAGTGAGCCGGCTCCAATTCCCGCACCTCGCGGAACTGTGTCTCGACCGGTGACACCCTTGAGTGAGCCGATCCCTGTGCCCGCACCGCGGCGTAAGTJT.AT......T.......G.T....A...G....T.....G..TA.......A---------------------------------------------------------TJMT.AT......T.......G.T....A...G....T.....G..TA........---------------------------------------------------------16601670168016901700171017201730174017501760---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+VR-2332TTTCAGCAGGTGAAAAGATTGAGTTCGGCGGCGGCAATCCCACCGTACCAGGACGAGCCCCTGGATTTGTCTGCTTCCTCACAGACTGAATATGAGGCCTCTCCCCCAGCTJ------------------------------A.AA...CG.TGA..C.......T.....T..............G...........G...........T.TC....T...TJM------------------------------A.AA...CG.TGA..C.......T.....T..............G........A..G...........T..C....T.A.17701780179018001810182018301840185018601870---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+VR-2332ACCGCCGCAGAGCGGGGGCGTTCTGGGAGTAGAGGGGCATGAAGCTGAGGAAACCCTGAGTGAAATCTCGGACATGTCGGGTAACATTAAACCTGCGTCCGTGTCATCAATJ...AT......A.AT...TA.C....AG.CG.G......A....T.......GT..................T..ACTAAA.G...CC..C.....AC.T..........TJM...AT......A.AT....A.C....AG.CG.G......A..........G.GT..................T..ACTAAA.G...CC..C.....AC.T..........18801890190019101920193019401950196019701980---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+VR-2332GCAGCTCCTTGTCCAGCGTGAGAATCACACGCCCAAAATACTCAGCTCAAGCCATCATCGACTCGGGCGGGCCCTGCAGTGGGCATCTCCAAGAGGTAAAGGAAACATGCTJ........C....A..T..T.AG.........................................T........T..................A...A...A...G.....TJM........C..---------------------------------------------------------------------------------------------------19902000201020202030204020502060207020802090---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+VR-2332CTTAGTGTCATGCGCGAGGCATGTGATGCGACTAAGCTTGATGACCCTGCTACGCAGGAATGGCTTTCTCGCATGTGGGATCGGGTGGACATGCTGACTTGGCGCAACACTJ..C..CA.......T.....T.........T.C.......G...T..............G.....C...............A....T.......................TJM--------------------------------------------------------------------------------------------------------------

21002110212021302140215021602170218021902200---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+VR-2332GTCTGTTTACCAGGCGATTTGCACCTTAGATGGCAGGTTAAAGTTCCTCCCAAAAATGATACTCGAGACACCGCCGCCCTATCCGTGTGAGTTTGTGATGATGCCTCACATJ.....C..........T..C...T....A..........TG....T........G.....T..................C.C.....C.G..........T.A....G..TJM--------------------------------------------------------------------------------------------------------------22102220223022402250226022702280229023002310---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+---------+VR-2332CGCCTGCACCTTCCGTAGGTGCGGAGAGCGACCTTACCATTGGCTCAGTTGCTACTGAAGATGTTCCACGCATCCTCGAGAAAATAGAAAATGTCGGCGAGATGGCCAACTJ................GA....A.....T.....C........T.....G..C..C..G...................G........G.G.CAC..A....C..CTTG..