实验室各类移液枪的规范使用叶继立

实验室各类移液枪的规范使用叶继立第1页/共21页实验室移液枪的规范使用第2页/共21页1.移液枪的简介2.移液枪的分类 3.移液枪、分配器的规范使用4.各种移液器材的使用注意事项第3页/共21页1.移液枪的简介移液枪是移液器的一种，常用于实验室少量或微量液体的移取，在实际应用中解决了移液管较难移取微量试剂的困难，各种移液枪规格不同，不同规格的移液枪配套使用不同大小的枪头，不同生产厂家生产的形状也略有不同，但工作原理及操作方法基本一致。移液枪属精密仪器，使用及存放时均要小心谨慎，防止损坏，避免影响其量程。第4页/共21页1.1移液枪的工作原理

移液器（微量加样器）最早出现于1956年，由德国生理化学研究所的科学家Schnitger发明，其后，在1958年德国Eppendorf公司开始生产按钮式微量加样器，成为世界上第一家生产微量加样器的公司。这些微量加样器的吸液范围在1—1000μl之间，适用于临床常规化学实验室使用。微量加样器发展到今天，不但加样更为精确，而且品种也多种多样，如微量分配器、多通道微量加样器等，其加样的物理学原理有下面两种：①使用空气垫(又称活塞冲程)加样；②使用无空气垫的活塞正移动(positivedisplacement)加样。第5页/共21页2.移液枪的分类第6页/共21页2.1空气垫加样器

活塞冲程(空气垫)加样器可很方便地用于固定或可调体积液体的加样。加样器中的空气垫的作用是将吸于塑料吸头内的液体样本与加样器内的活塞分隔开来，空气垫通过加样器活塞的弹簧样运动而移动，进而带动吸头中的液体，使体积和移液吸头中高度的增加决定了加样中这种空气垫的膨胀程度。温度、气压和空气湿度的影响必须通过对空气垫加样器进行结构上的改良而降低，使得在正常情况下不至于影响加样的准确度。一次性吸头是本加样系统的一个重要组成部分，其形状、材料特性及与加样器的吻合程度均对加样的准确度有很大的影响。第7页/共21页2.2活塞正移动加样器

以活塞正移动为原理的加样器和分配器与空气垫加样器所受物理因素的影响不同，因此，在空气垫加样器难以应用的情况下，活塞正移动加样器可以应用，如具有高蒸汽压的、高黏稠度以及密度大于2．0g/cm3的液体；又如在临床聚合酶链反应(PCR)测定中，为防止气溶胶的产生，最好使用活塞正移动加样器。活塞正移动加样器的吸头与空气垫加样器吸头有所不同，其内含一个可与加样器的活塞耦合的活塞，这种吸头一般由生产活塞正移动加样器的厂家配套生产，不能使用通常的吸头或不同厂家的吸头。第8页/共21页2.3多通道加样器和分配器多通道加样器和分配器的原理与上述相同。多通道加样器通常为8通道或12通道，与8X12=96孔微孔板一致。多通道加样器的使用不但可减少实验操作人员的加样操作次数，而且可提高加样的精密度。分配器为半自动加样系统，电子加样器最大的优点是其具有很高的加样重复性，应用范围广。第9页/共21页第10页/共21页3.移液枪的规范使用第11页/共21页3.1单道与8道移液枪的使用1.量程的调节在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。2.枪头（吸液嘴）的装配在将枪头（pipettetips）套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道（如8道或12道）移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。第12页/共21页3.移液的方法移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2－3毫米（不同规格移液枪对此要求不同）。在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）。这时可以采取两种移液方法。一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点（吸取固定体积的液体）。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点，吸上之后，斜靠一下容器壁将多余液体沿器壁流回容器。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。第13页/共21页4.移液器的正确放置使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。第14页/共21页4.分配器的使用1.枪头的选择（瓶口分配器不需要此不操作）根据实验的需要，选择适用的分配器枪头（本实验室的枪头有1=2μL，1=20μL，1=50μL，1=100μL，1=200μL，1=250μL，1=0.5mL，1=1mL），同一实验中的同一种试剂最好用统一规格的分配器枪头移取，尽量减少枪头更换带来的误差；若移取试剂的体积范围较大，也应尽量减少更换分配器枪头规格的次数。2.枪头的安装（实际演示）第15页/共21页3.液体的移取将选定的枪头装在分配器上，将枪头伸入液面以下2-3㎜处，吸取少量液体，将枪头进行润洗，润洗过后的液体打入废液杯中。润洗过后的枪头伸入液面吸取液体，根据实验需要大致吸取液体体积，但最好将液体吸至清透总体积的1/3--2/3处。将枪头拔出液面，若枪头最前端挂有大量液体，用吸水纸将其擦干，并将分配器调至1档，将第一枪液体打入废液杯中，然后开始实验中试剂的添加。在加液体过程中，应保持打每一枪的速度一致，避免速度不同而液体被惯性带出而造成的误差。试剂移取结束后，将枪头内多余的液体放回原试剂瓶中，将枪头取下，清洗。第16页/共21页4.瓶口分配器的使用瓶口分配器在本实验室中只有一台，用于黄曲霉毒素含量检测过程中的甲醇的加液，瓶口分配器被装于4L的旋口瓶上，使用时，先将顶部的旋钮调节至需要的刻度，此调节与移液枪刻度的调节相同，旋开嘴部的旋塞，打开安全阀，进行移液工作，移液结束后，关闭安全阀，旋上旋塞。第17页/共21页4.各种移液器材的使用注意事项第18页/共21页一．设定移液体积：1.从大体积调节到小体积时，为正常调节方法，逆时针旋转刻度即可；2.从小体积调节至大体积时，可先顺时针调至超过设定体积的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证最佳的精确度。二．装配移液器吸头：1.单道移液器，将移液端垂直插入吸头，左右微微转动，上紧即可2.用移液器反复撞击吸头来上紧的方法是不可取的，这样操作会导致移液器部件因强烈撞击而松散，严重的情况会导致调节刻度的旋钮卡住。3.多道移液器，将移液器的第一道对准第一个吸头，倾斜插入，前后稍许摇动上紧，吸头插入后略超过O型环即可。4.分配器在安装枪头时一定要按照专业人员教授方法进行。三.在移液枪与分配器的使用过程中，严禁暴力使用仪器。第19页/共21页四．养护：1、如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物；2、移液器使用完毕后，把移液器量程调至最大值，且将移液器垂直放置在移液器架上；3、根据使用频率所有的移液器应定期用肥皂水清洗或用60%的异丙醇消毒，再用双蒸水清洗并晾干；4、避免放在温度较高处以防变形致漏液或不准；5、发现问题及时找专业人员处理；6、当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水平或倒置放置，以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞；7、正