第二章样品的采集与预处理

第二章样品的采集与预处理第一页，共四十四页，2022年，8月28日

一、样品的采集

采样——从大量的分析对象中抽取有代表性的一部分作为分析材料（分析样品），这项工作叫采样。第一节样品的采集

第二页，共四十四页，2022年，8月28日正确采样的原则（1）采集的样品要均匀、有代表性；能反映全部被检食品的组成、质量和卫生状况。（2）采样方法要与分析目的一致。（3）采样及样品制备过程中要设法保持原有的理化指标，避免预测组分发生化学变化或丢失。（如水分、气味、挥发性酸等）。（4）防止带入杂质或污染。（5）采样方法要尽量简单，处理装置尺寸适当。第三页，共四十四页，2022年，8月28日检样由整批食物的各个部分采取的少量样品，称为检样。原始样品把许多份检样综合在一起称为原始样品。平均样品原始样品经过处理再抽取其中一部分作检验用者称为平均样品。应一式三份,分别供检验、复验及备查使用。每份样品数量一般不少于0.5公斤。二、样品的分类第四页，共四十四页，2022年，8月28日三、采样的一般方法第一种采集方法是随机抽样。均衡地、不加选择地从全部产品的各个部分取样。但随机≠随意。随机——要保证所有物料各个部分被抽到的可能性均等。第五页，共四十四页，2022年，8月28日第二种采集方法是代表性抽样：可按不同生产日期也可在流水线上按一定的时间间隔抽样按分析的目的取样第六页，共四十四页，2022年，8月28日

如：粘稠不好混匀的液体，从包装内上、中、下分别取样。蔬菜的营养成分（全菜）要从茎、枝、叶分别取，粉碎后，混匀。测鱼头部分的成分就只取鱼头。总之要根据测定的目的而定采样方法。第七页，共四十四页，2022年，8月28日样品的制备样品的制备——指对样品的粉碎、混匀、缩分等过程。四分法：第八页，共四十四页，2022年，8月28日样品的制备方法因产品类型不同而异液体、浆体或悬浮液体摇匀，充分搅拌。互不相容的液体（如油与水的混合物）先分离，再分别取样。固体样品切细、粉碎、捣碎、研磨等。罐头除核、去骨、去调味品、捣碎。第九页，共四十四页，2022年，8月28日样品保存采取的样品应在短时间内分析，否则应妥善保管。放在密闭、洁净容器内，置于阴暗处保存。易腐败变质的放在0—5℃冰箱内，保存时间也不能太长。易分解的要避光保存。特殊情况下，可加入不影响分析结果的防腐剂或冷冻干燥保存。第十页，共四十四页，2022年，8月28日第二节样品的预处理目的：1、测定前排除干扰组分；2、对样品进行浓缩。方法：主要有8种。原则：①消除干扰因素；②完整保留被测组分；③使被测组分浓缩；以便获得可靠的分析结果。第十一页，共四十四页，2022年，8月28日一、粉碎法由于颗粒尺寸大，分析成分被包埋在颗粒内部，没有暴露出来，从而使得分析结果偏差。干样品：谷物、饲料、油粕粉等；研钵、粉碎机、球磨机。湿样品：禽肉、海产品、面糊等；绞肉机、组织磨碎机等。第十二页，共四十四页，2022年，8月28日二、灭酶法对于样品含有成分含量已经确定的，没有必要灭酶，如果检测糖、脂肪、蛋白质等成分时，需要灭酶。常用灭酶手段是加热。第十三页，共四十四页，2022年，8月28日三、有机物破坏法

测定食品中无机成分的含量，需要在测定前破坏有机结合体，如蛋白质等。操作方法分为干法和湿法两大类。1.干法灰化原理：将样品至于电炉上加热，使其中的有机物脱水、炭化、分解、氧化，在置高温炉中灼烧灰化，直至残灰为白色或灰色为止，所得残渣即为无机成分。第十四页，共四十四页，2022年，8月28日

为了缩短灰化时间，促进灰化完全，防止有些元素的挥发损失，常常向样品中加入硝酸、过氧化氢等灰化助剂，不增加残灰质量，可起到加速灰化的作用。有时可添加氧化镁、碳酸盐、硝酸盐等助剂，可是碳粒不被覆盖，但应做空白试验。第十五页，共四十四页，2022年，8月28日干法灰化方法特点①此法基本不加或加入很少的试剂，故空白值低。②因灰分体积很小，因而可处理较多的样品，可富集被测组分。③有机物分解彻底，操作简单。优点①所需时间长。②因温度高易造成易挥发元素的损失。③坩埚对被测组分有吸留作用，使测定结果和回收率降低。缺点第十六页，共四十四页，2022年，8月28日2.湿法消化原理：样品中加入强氧化剂，并加热消煮，使样品中的有机物质完全分解、氧化，呈气态逸出，待测组分转化为无机物状态存在于消化液中。常用的强氧化剂有浓硝酸、浓硫酸、高氯酸、高锰酸钾、过氧化氢等。第十七页，共四十四页，2022年，8月28日湿法消化的优缺点①产生有害气体，需在通风柜中进行。②初期易产生大量泡沫外溢。③试剂用量大，空白值偏高。优点①有机物分解速度快，所需时间短。②由于加热温度低，可减少金属挥发逸散的损失。缺点第十八页，共四十四页，2022年，8月28日3.紫外光分解法

高压汞灯提供紫外光。85±5℃，加双氧水。4.微波高压消煮器。食品样品最多只要10分钟（2.5MPa);第十九页，共四十四页，2022年，8月28日四、蒸馏法利用液体混合物中各种组分挥发度的不同而将其分离。常压蒸馏减压蒸馏水蒸气蒸馏扫集共蒸馏共沸蒸馏萃取精馏精馏第二十页，共四十四页，2022年，8月28日第二十一页，共四十四页，2022年，8月28日第二十二页，共四十四页，2022年，8月28日第二十三页，共四十四页，2022年，8月28日五、溶剂抽提法浸提法溶剂萃取（LIE）超临界萃取（SCFE）（SFE）固相萃取（SPE）微波萃取（MAE）超声波萃取（UE）利用混合物中各种组分在某种溶剂中溶解度的不同而是混合物分离的方法。第二十四页，共四十四页，2022年，8月28日（一）浸提法（从固体中萃取有效成分）用适当的溶剂将固体样品中某种待测成分浸提出来，又称“液——固萃取法”。1.提取剂的选择由相似相溶原理选择第二十五页，共四十四页，2022年，8月28日选溶剂沸点在45～80℃之间的，低，易挥发；高，不易提纯，浓缩，溶剂与提取物不好分离。选稳定性好的溶剂。

2.提取方法：1）振荡浸渍法2）捣碎法3）索氏提取法第二十六页，共四十四页，2022年，8月28日

（二）溶剂萃取法（溶剂分层、液液萃取、抽提）1.原理:用一种溶剂把样品溶液中的一种组分萃取出来，这种组分在原溶液中的溶解度小于在新溶剂中的溶解度，即分配系数不同。用于原溶液中各组分沸点非常相近或形成了共沸物，无法用一般蒸馏法分离的物质。新溶剂——萃取剂（新溶剂+被溶解组分）——萃取相比重（原溶液+被溶解组分）——萃余相不同第二十七页，共四十四页，2022年，8月28日2.方法：

工业上用萃取塔

实验室用分液漏斗3、关于萃取剂的选择：（1）萃取剂与原溶剂不互溶且比重不同。（2）萃取剂与被测组分的溶解度要大于组分在原溶剂中的溶解度。对其它组分溶解度很小。（3）萃取相经蒸馏可使萃取剂与被测组分分开，有时萃取相整体就是产品。第二十八页，共四十四页，2022年，8月28日（三）超临界萃取（SFE）

利用超临界流体SCF作为溶剂，用来有选择性地溶解液体或固体混合物中的溶质。对溶质的溶解度大大增加。

超临界流体——流体的温度、压力处于临界状态以上。常用CO2作为超临界流体（临界温度为31.05℃，临界压力7.37Mpa）,不可燃、无毒、廉价易得、化学稳定性好。第二十九页，共四十四页，2022年，8月28日温度压力固体液体气体流体CTAB第三十页，共四十四页，2022年，8月28日六、色层分离法又称色谱分离、色层分析、层析、层离法。色层分析——使多种组分混合物在不同的载体上进行分离。第三十一页，共四十四页，2022年，8月28日1906年，俄国植物学家茨威特分离植物叶绿体中色素而得名，玻璃管中装CaCO3,石油醚溶解植物叶绿体倒入管内，再用石油醚做淋洗剂，结果，柱子中被分成几个不同颜色的谱带。第三十二页，共四十四页，2022年，8月28日两相物质：固定相流动相样品要制备成液体或气体。按固定相材料及使用形式分类柱色谱——固定相装在色谱柱中纸色谱——层析滤纸为支持剂，滤纸上结合水为固定相。薄层色谱（TLC）——将固定相粉末制成薄层。气相色谱（GC）——流动相为气体。液相色谱（HPLC）——流动相为液体。第三十三页，共四十四页，2022年，8月28日按不同的分离原理分：吸附层析分配层析离子交换层析凝胶层析（一）吸附色谱——利用吸附剂对不同组分的物理吸附性能的差异进行分离。吸附力相差越大分离效果越好。固定相——固体吸附剂流动相——气体或液体第三十四页，共四十四页，2022年，8月28日（二）分配色谱

利用不同组分在两相中的不同分配系数来进行分离。（溶解度的不同）固定相——固体支持剂（担体）+固定液流动相——气体或液体（与固定相不相溶）纸层析：纸是支持剂，结合水为固定相，溶剂作为流动相。第三十五页，共四十四页，2022年，8月28日

（三）离子交换色谱法——利用各组分与离子交换树脂的亲和力的不同来分离。阳离子交换：R—H+M+X-R—M+HX阴离子交换：R—OH+M+X-R—X+MOH第三十六页，共四十四页，2022年，8月28日七、化学分离法（一）磺化法和皂化法用来除去样品中脂肪或处理油脂中其它成分，使本来憎水性油脂变成亲水性化合物，从样品中分离出去。第三十七页，共四十四页，2022年，8月28日1.硫酸磺化法（磺化法）用浓硫酸处理样品，引进典型的极性官能团SO3使脂肪、色素、蜡质等干扰物质变成极性较大，能溶于水和酸的化合物，与那些溶于有机溶剂的待测成分分开。主要用于有机氯农药残留物的测定。第三十八页，共四十四页，2022年，8月28日2.皂化法原理:酯+碱酸或脂肪酸盐+醇（1）用于白酒中总酯的测定，用过量的NaOH将酯皂化掉，过量的碱再用酸滴定，最后由用碱量来计算总酯。（2）用于植物油的皂化价的测定。（皂化价高示含游离脂肪酸量大。常用碱为NaOH或KOH，NaOH直接用水配制，而KOH易溶于乙醇溶液。第三十九页，共四十四页，2022年，8月28日(二）沉淀分离法利用沉淀反应进行分离。在试样中加入适当的沉淀剂，使被测组分沉淀下来或将干扰组分沉淀下来，再经过滤或离心把沉淀和母液分开。常用的沉淀剂：碱性硫酸铜、碱性醋酸铅等。第四十页，共四十四页，2022年，8月28日例如，测冷饮中糖精钠含量时，，加入碱性硫酸铜，将蛋白质及其它干扰物、杂质沉淀出来，而糖精钠留在试液中，取滤液进行分析。（三）掩蔽法向样品中加入一种掩蔽剂使干扰成分仍在溶液中，而失去了干扰作用，多用于络合滴定中。第四十一页，共四十四页，2022年，8月28日八、浓缩为了提高待测组分的浓度，常对样品提