ABO血型鉴定-玻片法资料

ABO血型鉴定目录一.实验目的二.实验原理及相关知识三.实验材料四.实验步骤五.注意事项六.实验结果七.实验小结一.实验目的(1)学习辨别ABO血型的方法(2)掌握ABO血型鉴定的原理(3)认识血型鉴定在输血中的重要性

在ABO血型系统中，红细胞膜有A和（或）B两种凝集原，而血清中有抗A和抗B两种抗体。A凝集原加抗A抗体或B凝集原加抗B抗体会出现红细胞凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B凝集原以判断血型。二.实验原理含某种凝集原的红细胞+含相应凝集素的血清红细胞凝集反应(agglutination)1.实验原理血型不相容的两人血液混合,则红细胞可凝集成簇抗A抗B三.实验材料一次性采血针玻片消毒牙签试管及吸管标准抗A和抗B血清毛细吸管及胶头75%乙醇消毒棉签记号笔材料筐2、5%的受检者红细胞悬液配制：于小试管中加入NS5滴，用75％酒精消毒指尖或耳垂，用一次性采血针迅速刺破消毒部位的皮肤，毛细吸管取血加入小试管中，混匀，即得约5％红细胞悬液。四.实验步骤1、生理盐水配制：称取0.9gNaCl加入少量ddH2O使之完全溶解，再用ddH2O定容至100ml即可。3.取清洁玻片一块，两端分别标明“抗A”

和“抗B”。4.在相应玻片上的中央处分别滴加标准抗A

和抗B血清各一滴。5.用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。6.竹签两头分别混合，搅匀。7.观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块为阳性。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。8.判断血型根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断血型。五.实验结果判断抗A型标准血清抗B型标准血清B型抗A型标准血清抗B型标准血清A型抗A型标准血清抗B型标准血清抗A型标准血清抗B型标准血清O型AB型示意图六、实验结果记录本实验的结果七、临床应用1、玻片、试管都要标记！！！2、A及B标准血清绝对不能相混,不要依靠用染料颜色标记血清。3、所用玻片、试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。4、红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面，牙签一端混匀一侧就不能去接触另一侧。5、一般先加血清，然后再加红细胞悬液，便于核实是否漏加血清。试验用血清和试剂红细胞都应标准化。6、要在光亮的背景下观察凝集,可使用光镜检查小的凝集,同时应注意观察凝集强度，有助于A、B亚型的发现，观察后立即记录观察结果。八．注意事项谢谢!附录资料：不需要的可以自行删除急性中毒的救治中毒的定义中毒（poisoning）：化学物质作用人体造成全身性损害，称之为中毒分为：急性中毒和慢性中毒毒物来源中毒的救治特点多数中毒临床表现类似于其他系统疾病，临床检验直接提示中毒为数不多。中毒的治疗，除去病因治疗以外，多数情况下实行综合、对症、支持治疗。急性中毒的治疗，反映急救医学的特点。中毒患者的体检要点针对性体检，明确与中毒相关体征：1、皮肤黏膜2、呼吸功能3、心血管功能4、神经功能5、消化功能6、急性肾功能衰竭7、血液系统8、瞳孔变化中毒患者的处理要点应高度重视生命特征的变化及时准确判断威胁患者生命的主要矛盾，及时处理并联系相关专科会诊，选择最佳的救治方案交代病情认真、准确，并及时准确记录。中毒患者病情危重的指标中枢神经系统抑制肺水肿严重的心律失常心脏骤停严重缺氧（紫绀）急性溶血性贫血，血红蛋白尿急性肾衰竭中毒性脑病急救处理措施1、终止接触毒物2、加强生命支持3、清除尚未吸收的毒物催吐、导泻、洗胃4、促进已吸收毒物的排泄

血液净化：血液透析、血液灌流、血浆置换5、特殊解毒剂6、对症支持治疗呼吸支持、循环支持、抗生素、高压氧疗洗胃一般主张在服毒后6小时之内洗胃。近年来研究表明：洗胃并不能有效的排除中毒药物。洗胃的过程应注意并发症的发生，可能对病人的预后产生一定的影响。并发症：食管破裂、吸入性肺炎、脂质性肺炎血液净化用于中毒抢救的指证严重中毒，内科保守治疗无效，病情进行性恶化重度中毒导致脑功能障碍、呼吸功能障碍主要脏器功能不全药物、毒物正常排泄途径受损产生毒性代谢产物或延迟毒性的药物中毒（甲醇中毒、百草枯中毒）血液净化的禁忌症严重感染严重贫血严重心功能不全严重出血倾向严重高血压有机磷中毒救治的若干问题急性有机磷中毒（AOPP）的救治中热点：中间综合征（IMS）

临床上口服中毒患者中，IMS发生率为20%，临床表现多样性，严重者常需机械通气治疗。目前认为有机磷诱导的肌病参与了IMS的发生，两者因果关系尚难以确定。

IMS发病机制可能包括：遗传因素、解毒药物用量不足等等有机磷中毒的药物治疗（一）在AOPP中毒早期，及时足量的使用阿托品可解除中枢抑制，为洗胃、复能剂的应用争取时间。原则上，复能剂应用足量后，阿托品应适量减量。阿托品化后维持治疗，直至ChE恢复60%以上，阿托品逐渐减量。长托宁不同于阿托品，对胆碱能受体（M受体）亚型有选择性阻断作用，比阿托品的毒副作用小，有效剂量小，持续作用时间长。长托宁的使用不以瞳孔扩大、心率加快作为判断疗效的指标有机磷中毒的药物治疗（二）AOPP复能剂常用药物有解磷定、氯解磷定等。WHO使用推荐：先予氯解磷定30mg/kg的负荷剂量，然后以每小时8mg/kg的速度静脉持续用药。AOPP产生的磷酰化胆碱酯酶“老化”（脱烷基反应），时间为24~36小时，所以复能剂应在48小时之内使用。AOPP部分研究进展基础研究显示：丁酰胆碱酯酶（BChE）、对氧磷酶（PonE）是机体内参与有机磷解毒的羧基酯酶。BChE有间接解毒作用，PonE直接解毒作用。有研究表明该羧基酯酶的基因多态性与接触有机磷的敏感性有关。谷胱甘肽硫转移酶M1（GSTM1）缺失基因型可能是AOPP的IMS易感性生物标志物之一。百草枯中毒救治（一）百草枯对人畜属于中等度毒物，人口服致死量约为3g（50mg/kg），也有口服1g致死的报道中毒机制尚不完全清楚，一般认为百草枯是一种电子受体，中毒产生超氧自由基，化学级联反应消耗大量的氧化还原物质，脂质过氧化导致肺纤维化（呼吸衰竭）。基因水平的研究表明：胶原酶活性激活与上皮细胞的死亡参与肺纤维化过程。尽管大量研究百草枯中毒机制和潜在的有效治疗，如今只有早期胃肠道清除毒物的措施和一些支持治疗得到认可。百草枯中毒救治（二）洗胃：白陶土洗胃碱性液体洗胃效果较佳血液净化治疗肺移植手术近年来主张后期肺移植百草枯中毒预后的有关因素：1服毒量2是否空腹3白细胞计数wbc>10×109/L或N>85%4肾功能5肺损害CO中毒救治的若干问题（一）典型的临床表现：头痛、头晕、肌无力以及意识障碍，有3%~13%的病人以昏迷为初始表现。CO中毒时，神经系统的体检常有肌张力增高、腱反射亢进、病理征阳性等神经症状及体征。COHb对于疑似CO中毒病例有较大的诊断价值（诊断时间性），对吸烟和非吸烟患者，COHb浓度分别大于10%和6%应考虑CO中毒。CO中毒迟发性脑病的临床特点：部分患者经过积极治疗，意识恢复后，经过2~60天的“假愈期”，突然又出现意识障碍、锥体外系或锥体系为主的脑病变，称为CO中毒迟发性脑病。迟发性脑病的发病机制尚不完全清楚。迟发性脑病的发生与CO中毒程度不成比例。CO中毒救治的若干问题（二）治疗：高压氧疗（HBO）CO中毒发生6小时之内，尤其是对儿童、怀孕妇女、有神经-精神症状患者、有心肺异常变化的患者应尽早进行高压氧疗。

重复的高压氧疗，是否能减轻患者的神经系统并发症，目前没有很好的随机对照证明。CO中毒救治的若干问题（三）精神类药物中毒的救治若干问题（一）药物的分类：1苯二氮卓类BZD2巴比妥类3非巴比妥类/非BZD4吩噻嗪类（氯丙嗪、奋乃静等）药理/中毒机制：BZD增强GABA，巴比妥类对GABA作用类似于BZD，但作用部位不同。吩噻嗪类抑制中枢多巴胺受体，阻断肾上腺素能受体，抗