ThermoULtimate3000高效液相色谱确认方案解读

ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：1/24ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案编号：VP-AI-2017001生物科技股份有限企业ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001

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2/24确认方案审批表考证项目名称：ULtimate3000液相色谱仪确认方案编号：VP-AI-2017001起草人：日期：年月日审查部门/职务审查人日期备注审核QC/主管QA/主管批准人：日期：年月日履行日期：年月日确认小组人员名单：小组职务姓名所在部门职务组长质管部经理组员化验室主管组员QA主管组员化验室QCULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：3/24目录1.概括............................................................................................................................42.确认目的....................................................................................................................43.确认范围....................................................................................................................44.确认小组人员及职责................................................................................................45.考证有关文件依照....................................................................................................56.考证项目和时间安排................................................................................................57.安装确认..................................................................................................................58运转确认....................................................................................................................89.性能确认..................................................................................................................1410.确认过程中的偏差及办理举措..........................................................................1411．再确认周期..........................................................................................................1412.确认结果评定与结论............................................................................................1413.附件........................................................................................................................14ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：4/24概括高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC）是一种现代液相色谱法，其基本方法是用高压输液泵将流动相泵入到装有填补剂的色谱柱，注入的供试品被流动相带入柱内进行分别后，各成分先后进入检测器，用记录仪或数据办理装置记录色谱图并进行数据办理，获得测定结果。因为应用了各样特征的微粒填料和加压的液体流动相，本法拥有分别性能高、剖析速度快的特色。确认目的：依照GMP的要求，对该仪器进行安装确认、运转确认、性能确认，以确立仪器能否有拥有优秀的检测性能，可否知足平时剖析测试工作的需要。确认范围：本确认方案合用于本企业的ULtimate3000高效液相色谱仪确实认。确认小组人员及职责4.1确认小组考证分工所在部门职务组长质量部经理组员质量部QC主管组员质量部QC组员质量部QA主管4.2考证小组职责组长：负责考证管理的平时工作和考证的协调，考证方案和报告的同意。组员：QC，化验室。草拟考证方案和考证报告，并参加实行考证。组员：QC主管，化验室。审查考证方案和报告，协调与本次考证有关的化验室工作。组员：QA主管，质量保证部。负责审查考证方案和考证报告，假如考证中出现偏差，应付偏差进行检查。ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：5/24考证有关文件依照药品生产质量管理规范（2010年版）药品生产考证指南（2003年版）参照文件药品生产质量管理规范实行指南液相色谱仪国标GBT26792-2011液相色谱仪JJG705-2002考证项目和时间安排计划于年月日-月日对ULtimate3000高效液相色谱仪进行确认，内容严格依照本确认方案，检查ULtimate3000高效液相色谱仪其安装确认、运转确认、性能确认达到规定的标准要求。确认开始前全部参加人员应经过本方案的培训，培训记录见附件1。安装确认7.1.概括ULtimate3000液相色谱仪由赛默飞企业供给，安装于质量控制室的仪器室，用于成品，原料，中间样品的含量和有关物质检测。安装确认目的：证明所供给的设备规格切合要求,设备所应备有的技术资料齐备。开箱查收应合格，并确认安装条件（或场所）及整个安装过程切合设计要求。7.2.安装确认内容7.2.1.基本资料检查：检查能否有各样必要的书面资料，如表1。表1资料检查确认项目有无备注采买定单使用说明书设备的合格证书装箱单保修卡ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：6/247.2.2.设备所需外面环境确认目的：确认设备的安装能否切合原设计的条件，如表2。表2外面环境确认确认项目合格要求能否切合要求备注温度5-40℃□是□否相对湿度≤85%□是□否地面光滑、不易起尘□是□否环境无腐化性气体□是□否7.2.3.设备型号确认目的：确认设备各零件的型号，保证其与订单和装箱单所描绘的一致，如表3。零件输液泵自动进样器柱温箱紫外检测器7.2.4.设备外观确认

表设备型号

3

设备型号确认序列号

能否一致□是□否□是□否□是□否□是□否目的：确认设备外观切合标准要求，如表

4。表

4

设备外观确认确认项目

合格要求仪器表面应光洁平坦、笔迹清楚，表面涂覆色

能否切合要求□是□否设备表面面

泽均匀，不该有显然划伤、露底、裂纹、气泡等现象各按键、旋各调理旋钮、按键、开关等工作正常，无松动；钮、开关指示、显示清楚完好7.2.5.公用设备确认

□是

□否目的：确认公用设备，使其知足设计要求，如表

4。表

5

公用设备确认项目

设计要求

确认结果

备注电压

220V

□是

□否电源适配

三孔插座

□是

□否ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：7/247.2.6.软件版本确认目的：确认安装的软件与采买软件版本是同样的。软件版本与采买版本□同样□不同样7.2.7.硬件环境与安装确认目的：依据生产商硬件和系统设计规格标准，确认仪器和控制器工作地区符合要求，如表6。表6硬件环境与安装确认序号描述能否切合要求1仪器放在水平的工作台上，计算机在仪器旁边。□是□否2仪器各零件之间正确连结。□是□否3温度在10-30℃，湿度在20-85%之间。□是□否4室内无强电磁扰乱源及有害有毒气体。□是□否5排风口和进风口对仪器和计算机无污染。□是□否7.2.8.零件清单目的：确认仪器平时保护和操作所需要的耗费品和备用品，如表6。表7零件清单零件名称数目寄存地址备注7.2.9.仪器、仪表、衡器确实认目的：确认仪器、仪表、衡器经过校验，并在校验期内。如表8。表8仪器、仪表、衡器确认记录ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：8/24仪器仪表衡器名仪器仪表衡器编校验周期校考证书编号有效期至称号7.2.10.维修服务确认目的：确认仪器出现故障后能实时的办理，不影响操作。每本操作手册上都有简单的保护方法，经过仪器培训的操作人员能够根听说明书进行简单的维修和零零件的改换。假如有其余比较大的问题，用户不可以解决的，能够电话通知厂家的维修工程师。维修电话：7.3.安装确认结论及同意结论：检查人：日期：同意人：日期：运转确认：8.1.测试项目和认同标准考证零件考证项目

合格标准软件系统确认见“高效液相色谱仪计算机化系统确认报告”VP-CS-20170010.5ml/min:＜5%；1.0ml/min:＜3%；输液泵流量设定值偏差SS＜2%2.0ml/min:ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：9/24流量稳固性偏差SR0.5ml/min:＜3%；1.0ml/min:＜2%；2.0ml/min:＜2%梯度偏差GC：不超出±3%柱温箱柱箱温度设定值偏差TS≤±2℃柱箱控温稳固性TC≤1℃基线噪声≤20uv检测器最小检测浓度≤1×10－7g/mL(萘的甲醇溶液)基线漂移≤200uv/h8.2.运转确认所需的资料8.2.1.玻璃仪器设备计量玻璃仪器需完全冲洗并经检定，一般玻璃仪器要保证干净。8.2.2.试剂、标准溶液萘（AR）甲醇（色谱纯）丙酮（AR）去离子水:电导率不大于0.1μs/cm紫外波长标准物质其余协助设备玻璃仪器：经检定、其余玻璃器皿C18色谱柱铂电阻温度计（Pt100）正确度≤0.3℃秒表分度值不大于0.1秒进样器20μl剖析天平游标卡尺15cm/0.02mm8.3.运转确认的实行8.3.1.输液泵泵流量设定值偏差SS、流量稳固性偏差SR的检定ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：10/24将仪器的输液系统，进样器、色谱柱和检测器联接好，以甲醇为流动相，流量设为1.0mL/min，按说明书启动仪器，待压力安稳后保持10分钟，按表7设定流量，待流速稳固后，在流动相排出口用预先冲洗称重过的容量瓶采集流动相，同时用秒表计时，正确地采集，称重。按式(1)、式(2)计算SS和SR。表7流量设定值（mL/min）0.51.02.0丈量次数333流动相采集时间（min）1055SS5%3%2%接受标准2%2%SR3%SS＝(Fm－FS)/FS×100%(1)SR＝(Fmax－Fmin)/F×100%(2)式中：SS——流量设定值偏差(％)；SR——流量稳固性偏差(％)；Fm＝(W2－W1)/（ρ·t），流量实测值(mL/min)；W2——容量瓶＋流动相的重量(g)；W1——容量瓶的重量(g)；FS——流量设定值(mL/min)；ρ——实验温度下贱动相的密度(g/cm3)；t——采集流动相的时间(min)；Fmax——同一组丈量中流量最大值(mL/min)；Fmin——同一组丈量中流量最小值(mL/min)；F——同一组丈量值的算术均匀值(mL/min)。输液泵泵流量设定值偏差SS、流量稳固性偏差SR的检定记录。见附件2。8.3.2.梯度偏差的检定由梯度控制装置设置阶梯式的梯度洗脱程序，A溶剂为纯水，C溶剂为含0.1%丙酮的水溶液，C经由5个阶梯从0变到100%。将输液泵和检测器连结（不接色谱柱），ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：

11/24开机此后以A溶剂冲刷系统，基线安稳后开始履行梯度程序，画出梯度变化曲线。求出A，C溶剂不一样比率时的输出信号值（或记录仪读数），重复丈量2次，计算均匀值。从C溶剂的含量及对应的输出信号值（或记录仪读数），按式（3）计算梯度偏差Gci，取Gci最大者作为仪器梯度偏差，应不超出±3%。波长为254nm，检定记录见附件3。梯度洗脱表时间A通道：超纯水C通道：0.1%丙酮水溶液0.00min100%0%3.00min100%0%3.0180%20%13.00min80%20%13.01min60%40%23.00min60%40%23.01min40%60%33.00min40%60%33.01min20%80%43.00min20%80%43.01min0%100%53.00min0%100%53.01min100%0%58min100%0%———Gci=（Li–Lm）/Lm×100%式中：Gci——第i段梯度偏差(%)；———第i段输出信号值（或记录仪读数）增量均匀值；Li———各段输出信号（或记录仪读数）增量均匀值的均匀值。LmULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：12/24记录仪

100%C0%A80%C60%C40%C读数20%C0%A100%C时间t8.3.3.前后进样带入量确实认方法：采用4.6mm×250mm的C18或C8柱，流动相：甲醇：水=75：25，检测器254nm，流速1.0ml/min,进样量5ul，使用以下商业标准品进样。标准溶液(a):咖啡因溶液100ug/ml标准溶液(b):咖啡因溶液1ug/ml空白溶液:水备注：标准溶液的剖析证书一定作为附件以证明标准溶液是合用的。进以下序列样：——咖啡因溶液100ug/ml，1针——水，1针——咖啡因溶液1ug/ml，1针记录色谱并对咖啡因峰进行积分。可接受标准空白溶液中相应的峰面积百分比不超出标准溶液(a)中咖啡因峰面积的0.1%；标准溶液(b)中咖啡因的峰面积是标准溶液(a)中咖啡因峰面积的0.9%-1.1%。记录见附件4.8.3.4.柱温箱柱箱温度设定值偏差TS和控温稳固性TC的检定将数字温度计探头固定在柱温箱内，选择20℃和50℃进行检定。按仪器说明书操作，通电升温，待温度稳固后，记下温度计读数并开始计时，此后每隔10min记录一次读数，合计7次，求出均匀值。均匀值与设定值之差为TS，7次读数ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：13/24中最大值与最小值之差为控温稳固性TC。柱温箱柱箱温度设定值偏差TS和控温稳固性TC的检定原始记录见附件5。8.3.5.检测器的检定检测器基线噪声和基线漂移的测定取C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，检测器波长设定为254nm,开机预热，待仪器稳固后（约60min）记录基线60min，从30min内基线上读出噪音值；从60min基线上读出基线漂移值。接受标准：基线噪音应不超出5×10-4AU；基线漂移应不超出5×10-3AU/h。记录见附件6。检测器最小检测浓度的测定取C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，检测器波长设定为254nm,开机预热，待仪器稳固后取1×10-7g/ml的萘/甲醇溶液进样20μl，记录色谱图，由色谱峰峰高和基线噪声峰峰高计算最小检测浓度CL。公式以下：CL=(2×Nd×C)/H式中CL——最小检测浓度，g/ml；Nd——基线噪声峰峰高，mm；C——标准溶液浓度，g/ml；H——标准溶液峰峰高，mm。接受标准：应不超出1×10-7g/ml检测器的最小检测浓度原始记录。见附件7。8.4.运转确认结论及同意结论：检查人：日期：同意人：日期：ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：

14/24性能确认9.1.取C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，检测器波长设定为254nm,柱温设定为40℃。开机预热待仪器稳固后取0.1mg/ml的萘/甲醇溶液进样20μl，连续进样6次，记录其峰面积和保存时间，以保存时间计算其定性丈量重复性偏差，以峰面积计算其定量测定重复性偏差，以保存时间计算其定性重复性偏差。接受标准：定量重复性RSD≤1.0%，定性重复性≤0.5%。性能确认记录见附件89.2.性能确认结论及同意结论：检查人：日期：

同意人：

日期：10.确认过程中的偏差及办理举措：见附件

9。再确认周期：11.1.正常状况下每年做一次确认。11.2.发生了影响仪器性能的零件改变或维修后，应进行再考证。确认结果评定与结论：见附件10.附件附件1：人员培训、参加状况确认记录附件2：输液泵确认记录附件3：梯度偏差检定记录附件4：前后进样带入量确认记录附件5：柱温箱确认记录附件6：基线噪声、基线漂移测定记录附件7：最小检测浓度测定记录ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：15/24附件8：性能确认结果记录附件9：偏差办理审批表附件10：考证结果综合评论表ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：16/24附件1人员培训、参加状况确认记录日期年月日课时1讲课方式面授讲课地址会议室讲课人部门岗位培训人质量部QC主管质量部QA人员质量部QC人员确认标正确认结果确认全部参加履行本确认的人员已经获得培训，并在培训记录中署名。确认结论：备注或附件：检查人/日期复核人/日期ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：17/24附件2输液泵确认记录流量采集时间次接受标准W1W2W2-W1SSSR（ml/min）min数10.5102311.052312.0523结果评定：检定人复核人

SS≤5%SR≤3%SS≤3%SR≤2%SS≤2%SR≤2%日期日期ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：

18/24附件3梯度偏差确认记录第一阶段第二阶段第三阶段第四阶段第五阶段次数—读数读数读数Lm读数读数12Li—Li——Li-LmGci可接受标准：Gci≤±3%结果评定：检定人

日期复核人

日期ULtimate3000高效液相色谱仪确认方案淮北智信堂生物科技股份有限企业编号：VP-AI-2017001页码：19/24附件4前后进样带入量确认记录溶液名称标准溶液(a)空白溶液标准溶液(b)咖啡因峰面积(mAu*S)结果空白溶液/标准溶液