ABO血型鉴定周高健

【基本原理】常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有：①正向定型：用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。②反向定型：用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定：凡红细胞出现凝集者为阳性，呈散在游离状态为阴性。

当前1页，总共30页。一、血型BloodGroup/type血型：是对血液分类的方法，血细胞（红细胞）膜上存在的特异抗原性物质的类型。当前2页，总共30页。血型分类的依据是红细胞表面是否存在某些可遗传的抗原物质。红细胞凝集Agglutination：血型不相容的血液混合后，其中的红细胞聚集成簇并溶血。当前3页，总共30页。当前4页，总共30页。造成凝集的机制是抗原-抗体反应红细胞表面上含有的特异性糖蛋白抗原物质统称为凝集原Agglutinogen。在血浆中则含有与之相应的特异性抗体，称为凝集素Agglutinin。当前5页，总共30页。已经发现并为国际输血协会承认的血型系统有30种，包括超过600种抗原，其中大部分都非常罕见，最重要的两种为“ABO血型系统”和“Rh血型系统”。血型系统对输血具有重要意义，以不相容的血型输血可能导致溶血反应的发生，造成溶血性贫血、肾衰竭、休克以至死亡。当前6页，总共30页。二、ABO血型系统1901年Landsteiner首先发现分类依据：血型 凝集原 凝集素A型 A 抗BB型 B 抗AAB型 A＋B 无O型 无 抗A＋抗B当前7页，总共30页。当前8页，总共30页。血型与遗传当前9页，总共30页。A、B抗原的前体物质是H抗原，受H基因控制，H基因产物为L-岩藻糖转移酶-1IA基因产物为N-乙酰-D-半乳糖胺转移酶，IB基因产物为D-半乳糖转移酶隐性纯合体hh个体，特殊的O型——孟买型。当前10页，总共30页。前驱物质H抗原A抗原B抗原半乳糖N-乙酰葡萄糖胺半乳糖葡萄糖当前11页，总共30页。按一般血型遗传规律，O型和AB型双亲只能生下A型或B型子女。而在深圳，一对O型和AB型夫妇生下了罕见的O型和AB型的孩子。当前12页，总共30页。♂AB♀A×♂A♂AB♀O×♀O♂O♂ABOB(A)当前13页，总共30页。血型与性格A型人小时候比较任性，年轻时性格果断刚毅，时时处处要强。走向社会后，随着年龄的增长和社会经验的积累，他们开始克制自己的情绪，表现出稳重谦虚的态度，容易成为不愿过份表现自己的谨慎派。A型人在老年时，则显得很固执。当前14页，总共30页。B型人大都有一个天真浪漫的幼年期，随着年龄的增长，逐渐分成心直口快和不擅交际应酬型两种倾向。B型人由于性格自幼到老变化不大，相对来说会让人感到他们越活越年轻。当前15页，总共30页。O型人年少时比较温顺，但随着年龄的增长，他们会积极地呈现出强烈的自我主张和自我表现，甚至成为非常有魄力的人。O型人从小至老的变化是最大的，往往是少年温顺，老来强硬。当前16页，总共30页。AB型人大多小时候怕陌生人，很闭塞，但长大以后善交朋友，交际广泛。AB型人因过于自信，容易自满，老年时给人感觉很傲慢。不过他们兼具A型与B型的特质，做事有计划，但没有耐性，容易冲动，直觉敏锐，不喜欢墨守成规，性情多变，有时表现极端的个性。善于待人接物，很注意合情合理性，讨厌口是心非的人，具有强烈的批评精神。AB型是不讲人情，不谈爱情的，男女关系在AB型看来是件极具单纯的事情，不会像其他血型的人弄得那样复杂。性格=遗传+后天环境当前17页，总共30页。血型的成因人类的血型是由饮食和进化决定的。O狩猎血型A农耕血型B游牧血型AB混合血型当前18页，总共30页。血型鉴定（正定型法）用已知的IgM类特异抗体（标准血清）与被检红细胞在室温条件下、盐水介质中反应，根据红细胞是否出现凝集现象来测定被检红细胞膜上有无与血型抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定被检者的血型。当前19页，总共30页。当前20页，总共30页。三、Rh血型系统

人类红细胞含有一种与恒河猴Rhesusmacacus的红细胞相同的凝集原称为Rh因子含Rh因子(8种，主要是D抗原)──Rh阳性不含Rh因子──Rh阴性当前21页，总共30页。Rh血型的临床意义输血溶血新生儿溶血当前22页，总共30页。分娩后72h内进行Rh抗体被动免疫胎儿红细胞进入母体即被破坏（不能诱导母亲抗Rh免疫反应）Rh+Rh–初孕健康新生儿

健康新生儿Rh–再孕Rh+新生儿溶血的预防？当前23页，总共30页。【器材与试剂】载玻片、记号笔、刺血针、消毒牙签、酒精棉球、干棉球A型和B型标准血清离心机、显微镜当前24页，总共30页。【方法与步骤】（1）标记玻片：取洁净的载玻片或白瓷板1块，用蜡笔画出小格，标明抗A、抗B。（2）加标准抗血清：在玻片已标记的区域内分别滴加抗A、抗B标准抗血清各l滴。当前25页，总共30页。（3）加被检红细胞：在滴加抗A、抗B标准抗血清的小格中分别加被检者血液各1滴，不断轻轻转动玻片或用牙签使血清与红细胞充分混匀，连续约1～5min，室温放置15～30min。当前26页，总共30页。（4）观察结果：肉眼观察有无凝集(或溶血)反应，再用低倍镜观察，判定阴性、阳性和阳性强度。凝集判断标准：如红细胞呈均匀分布，无凝集颗粒，显微镜下红细胞分散存在，无凝集靠拢现象为阴性；红细胞出现凝集为阳性。当前27页，总共30页。【注意事项】1．所用器材必须干燥清洁、防止溶血；为避免交叉污染，各器皿均一次性使用为佳。2．被检血液标本新鲜，无细菌污染。。3．玻片等均应严格标记。4．分型血清质量性能合格，从冰箱取出待其平衡至室温后再用，用毕后应尽快放回冰箱保存，减少细菌污染；一般先加血清，然后再加红细胞。当前28页，总共30页。5.玻片法定型时，转动玻片动作要轻。注意防止悬液干涸，以免将玻片边缘干涸引起的红细胞凝集误认为抗原抗体反应凝集。玻片法反应时间不能少于10min，否则较弱凝集不能出现，造成假阴性。6.理论上IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4℃最强，但为了防止冷凝集