细菌的接种和注意事项终极版

关于细菌的接种和注意事项终极版第一页，共三十四页，编辑于2023年，星期三第二页，共三十四页，编辑于2023年，星期三灭菌接种环1.要充分灭菌接种环，以免污染其标本。2.要适当冷却再取标本，以免带不出标本中的菌种。第三页，共三十四页，编辑于2023年，星期三第四页，共三十四页，编辑于2023年，星期三取标本1.蘸取标本时应适量，以免标本太少漏检。2.液体标本，如尿液，应注意混匀。第五页，共三十四页，编辑于2023年，星期三接种1.细菌的接种方法有很多，如平板划线法、斜面接种法、穿刺接种法，等等。但我们用的最多的是：★平板划线法—意义指把混杂在一起的微生物，用接种环在平板培养基表面，通过分区划线，稀释得到较多的独立分布的单个菌落，即将样本在固体培养基表面多次做由点到线稀释而达到分纯的目的。第六页，共三十四页，编辑于2023年，星期三★一区：所占区域大约是平板面积的1/5~1/4二区：由一区向二区带出三四条平行线三区：由二区引出三四次，但三区面积最大第七页，共三十四页，编辑于2023年，星期三第八页，共三十四页，编辑于2023年，星期三CO2在细菌培养中的意义第九页，共三十四页，编辑于2023年，星期三1有些细菌在初次分离培养时，需要5﹪-10﹪的CO2。因为细菌在生长过程中能够分解培养基中的某些含氮物质产生氮，对该菌有杀灭作用，而CO2能中和细菌产生的氮，以减少对细菌的毒性。如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布鲁菌等。

2.为细菌提供碳源，促进细菌的生长。如肺炎链球菌，草绿色链球菌。在细菌室的培养箱上有一个CO2的开关，为什么要用CO2呢？第十页，共三十四页，编辑于2023年，星期三常见细菌的鉴别及其特点第十一页，共三十四页，编辑于2023年，星期三阳性球菌葡萄球菌---金黄色葡萄球菌第十二页，共三十四页，编辑于2023年，星期三金葡特点是人类化脓性感染最常见的病原菌，可以引起局部感染，也可以引起全身感染。血浆凝固酶，阳性。血平板上呈黄色菌落，大而凸起，表面光滑，有β溶血环。G+阳性球菌，葡萄状排列，无芽孢，无荚膜。1.2.3.4.第十三页，共三十四页，编辑于2023年，星期三葡萄球菌---表面葡萄球菌第十四页，共三十四页，编辑于2023年，星期三表葡特点正常存在于人体皮肤、黏膜表面，多见于院内感染，如体内异物留置，静脉导管等血浆凝固酶，阴性表葡形态同金葡相似，但是为白色、扁平菌落，无溶血环1.2.3.3.第十五页，共三十四页，编辑于2023年，星期三链球菌

常见的链球菌主要有化脓性链球菌、草绿色链球菌、肺炎链球菌。

根据抗原结构不同可以把链球菌分为A、B、C、D等二十个群，但对人类有致病性的大多数属于A群，少量属于B群。第十六页，共三十四页，编辑于2023年，星期三根据在血平板上溶血分为以下三种：甲型（α型）溶血性链球菌，又称草绿色链球菌，菌落周围有草绿色溶血环，致病力弱，是条件致病菌。乙型（β型）溶血性链球菌，产生强烈的溶血毒素，在血平板上可使菌落周围出现2～4mm的无色透明溶血环。丙型（r-）链球菌，菌落周围无溶血环，又叫不溶血性链球菌，通常不致病。

第十七页，共三十四页，编辑于2023年，星期三肺炎链球菌菌落特点：在血平板上0.5～1.5mm,灰白色半透明，表面光滑，扁平，周围环绕草绿色溶血环，培养放置24h以上的菌落，还会因为产生自溶酶的作用，而致菌落中央塌陷而边缘隆起，呈脐窝状。第十八页，共三十四页，编辑于2023年，星期三肺炎链球菌、Ａ群、Ｂ群的区分：

Ｏpt试验抑菌环>14,鉴定为肺链＋杆菌肽试验－＋－Ａ群CAMP试验＋B群第十九页，共三十四页，编辑于2023年，星期三Opt实验第二十页，共三十四页，编辑于2023年，星期三杆菌肽实验第二十一页，共三十四页，编辑于2023年，星期三11第二十二页，共三十四页，编辑于2023年，星期三葡萄球菌与链球菌的鉴别：1.涂片—涂片革兰染色，葡萄球菌呈葡萄串样，链球菌呈链状。2．M-H试验—当染片不能区别时，接种到M-H平板，长成菌落之后，可挑单个菌落做触酶试验，+是葡萄球菌，－是链球菌。第二十三页，共三十四页，编辑于2023年，星期三肠球菌肠球菌属特点：Ｇ+，成圆球形或椭圆形，单个，成对，或短链，均可。在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑，0.5~1.0mm大小的菌落，可有溶血现象。第二十四页，共三十四页，编辑于2023年，星期三以粪肠球菌和屎肠球菌为常见：

阿拉伯糖山梨醇屎肠球菌阳性阴性粪肠球菌阴性阳性

第二十五页，共三十四页，编辑于2023年，星期三阴性杆菌大肠杆菌：G-杆菌，有鞭毛、菌毛，无芽胞。菌落2~3mm,圆形凸起，灰白湿润，光滑半透明，边缘整齐。某些菌落可产生有透明溶血环。第二十六页，共三十四页，编辑于2023年，星期三鲍曼不动杆菌菌落特点：圆形、凸起光滑、边缘整齐不透明、灰白色有粘性的菌落多数菌落不溶血在中国兰上为粉红色菌落第二十七页，共三十四页，编辑于2023年，星期三菌落特点：较大菌落、凸起、灰白色黏液型、相邻菌落容易发生融合可挑出长丝状细丝肺炎克雷伯杆菌

第二十八页，共三十四页，编辑于2023年，星期三变形杆菌迁徙生长菌落特点：G-，两边钝圆，有明显的多形性，呈球形或丝状，无芽胞无荚膜，有鞭毛，运动活泼。普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株呈迁徙扩散生长，迅速弥漫。波纹状薄膜布满整个培养基表面。第二十九页，共三十四页，编辑于2023年，星期三嗜麦芽假单胞菌菌落特点：G-杆菌，细长略弯曲。不透明，灰黄色菌落，在血平板上可产生氨味。本菌氧化酶阴性，与大多数假单胞菌不同。第三十页，共三十四页，编辑于2023年，星期三在普通琼脂培养基上能产生水溶性绿色素，使整个培养基变为绿色菌落灰绿色、半透明、大而扁平、表面湿润、边缘不齐；有金属光泽；有生姜样芳香气味；菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌第三十一页，共三十四页，编辑于2023年，星期三流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌在巧克力平板上生长，菌落为灰白色，扁平，半透明的小菌落第