分子生物学终极复习资料汇总

成的，这种复制方式称半保留复制6、DNA重组技术又称基因工程，目的是将不同的DNA片段(如某个基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来，受体细胞的新的遗传性状。第1页第2页10、多顺反子：一种能作为两种或多种多肽链翻译模板的信使(即核心酶+σ因子)基通过其16SrRNADE3'端及mRNA5’端起始密码子上游碱基配对第3页21、信号肽：常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的N-末端氨基酸序列(有时不一定在N端)。D-硫代半乳糖苷)。26、葡萄糖效应(代谢物阻遏效应)：有葡萄糖存在时，不论诱质。第4页动子区(P)，不能单独起动合成β-半乳糖苷酶和透过酶的生理操纵基因区没有被阻遏物占据，所以启动子能够顺利起始mRNA术第5页单单链酸酶物骤变性--退火--延伸解旋-起始-延伸结束原则则错配修复恢复错配重组修复复制后的修复，重新启动停滞的复制叉配对原则配对原SOS系统DNA的修复，导致变异下合成新的子链片段。若错配碱基位于切口的5'上游端，则在密度及启动子强度之间的平衡决定了该启动子是否具有转录活性(可用图示说明)？密度及启动子强度之间的平衡决定了该启动子是否具有转录活6、举例说明蛋白质磷酸化如何影响基因表达。第6页第7页络氨酸受体蛋白激酶及表皮生长因子(EGF)相结合后，刺激了该许多转录因子都可以通过cAMP介导的蛋白质磷酸化过程而被这类基因5’区有一个或数个cAMP应答元件，基本序列为TGACGTCA7.如何克隆一个新基因(cDNA的中间片段)？1.在反转录酶的作用下，以基因片段内部特异性引物(GSP1)3.用末端转移酶在cDNA链3’端加入连续的dCTP，形成4.以连有oligodC的锚定引物和基因片段内部特异引物原核生物mRNA的特征：(1)半衰期短(2)多以多顺反子的形(3)5’端无“帽子”结构，3’端没有或只有较短的poly(A)结构。2、多数mRNA3’端具有poly(A)尾巴(组蛋白除外)的形式存在第8页第9页mRNA？磷酸(m7Gppp)。mRNA5’端的这种结构称为帽子结构(cap)。性，由poly(A)聚合酶催化。原核生物：起始密码子AUG所编码的氨基酸并不是甲硫氨酸第10页特定人群的序列和发生频率的研究，主要包括基因芯片技术、Taqman技术、分子信标技术和焦磷酸测序法等。cDNA成包括第一链和第二链的合成酶催化，该酶合成是需要引物引导，常用的引物是Oligo第11页CHAP1肺炎双球菌实验和噬菌体侵染大肠杆菌实验。个基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中及载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。染色质结构紧密包装的结果。核细胞基因组的最大特点是它含有大量的重复序列，而且功能第12页多顺反子mRNA:一种能作为两种或者多种多肽链翻译模板的信cistron●基因不连续性断裂基因(interruptedgene)、内含子intron外显子(exon)多于编码序列(9:1)第13页性性质聚合酶Ⅰ聚合酶Ⅱ聚合酶Ⅲ3'5'外切+++活性5'3'外切+--活性5'3'聚合活+中+很低+很高性新生链合成--+RNA引物并填补其有3’-5’性γγ+线粒体DNA的复制ε+RNA引物去掉后把缺口补全α-成δ+核DNAβ-复碱基基化DNACHAP3第14页第15页启动子：指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段全酶=核心酶+σ因子增强子：能提高转录起始效率的序列被称为增强子或者强化子亚亚基基因相对分子亚基组分功能量数别'σ转转录产对α-鹅膏蕈碱的敏物感性rRNA50-70%不敏感hnRNA20-40%敏感tRNA约10%存在物种特异性酶2.真核生物的原始转录产物需要经过哪些加工才能成为成熟的mRNA？(m7Gppp)。mRNA5’端的这种结构称为帽子(cap)。性启动子和真核启动子的构成第16页第17页核心启动子TATA常在-25bp左右，相当于原核的-10序列TATAAAA85979385638350核心启动子●定义：指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点和转录起始位点上游上游启动子元件，包括CAAT盒(CCAAT)和GC盒(GGGCGG)等第18页基转移酶催化原核生物：起始密码子AUG所编码的氨基酸并不是甲硫氨酸第19页信号肽：常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的N-末N。CHAP5术链体内，温和的环境模板DNA单酸酶物骤变性--退火--延DNA连接酶第20页伸则伸PCR，模板DNa94℃变性1min，引物及模板40~60℃退火s2、在基因操作实践中检测核酸相对分子量的最常用方法是什OD仅及总含量有关，也随构型而有差异。第21页3.如何克隆一个新基因(cDNA的中间片段)？5.在反转录酶的作用下，以基因片段内部特异性引物(GSP1)7.用末端转移酶在cDNA链3’端加入连续的dCTP，形成8.以连有oligodC的锚定引物和基因片段内部特异引物苷酸(A，T，C和G)的突变而引起的多态性。CHAP6第22页CHAP71、操纵子、弱化子、葡萄糖效应(代谢物阻遏效应)、安慰性诱葡萄糖效应(代谢物阻遏效应)：有葡萄糖存在时，不论诱导物动子区(P)，不能单独起动合成β-半乳糖苷酶和透过酶的生理第23页操纵基因区没有被阻遏物占据，所以启动子能够顺利起始mRNA负控阻遏系统:色氨酸操纵子负责色氨酸的生物合成，当培养基阻遏过程(而不是诱导过程)中起作用。弱化调控机制:细菌通过弱化作用弥补阻遏作用的不足，因为阻子？双启动子的生理功能：这及半乳糖在细胞代谢中的双重功能有第24页UDP-葡萄糖合成UDPgal。因为合成细胞壁过程中对异构酶的需要量很小，本底水平的永久型合成就能够满足生理需要。CHAP8