天然药物化学实验课程教学大纲

天然药物化学实验课程教学大纲课程编号：10041580课程名称：天然药物化学实验/Naturalmedicinalchemistryexperiment课程属性：选修实验属性：独立设课开课学期：4学时：36适用专业：制药工程学分：1.5开课部门：化学与生物工程学院考核要求：实验报告课程简介：天然药物化学是一门实践性很强的学科，天然药物化学实验是天然药物化学课程的重要组成部分，学生必须在学好理论知识的同时高度重视实验课，通过实验课的学习使学生能印证并加深理解课堂讲授的理论知识，要求同学们掌握煎煮法、回流法、连续回流提取等提取法，两相溶剂萃取法、沉淀法、结晶法、薄层色谱、纸色谱、柱色谱的基本操作技能。熟悉它们在天然药物化学成分提取、分离、检识和鉴定中的应用。同时通过实验可进一步巩固课堂所学的理论知识，使理论与实践密切结合。由于天然药物化学所含化学成分复杂，一些有效成分含量较低等特点，实验中着重训练常量、半微量成分的提取、分离及检识方法。使学生具有初步设计提取天然药物中主要类型成分的能力，并对其进行鉴别的基本方法和技能，提高学生独立动手、观察分析、解决问题的能力，培养学生严谨的科学态度和良好的科研作风。一、实验项目设置及学时分配项目编号实验项目名称实验类型开出要求学时分配大黄素的提取、分离和鉴定综合必做12芦丁的提取、分离和鉴定综合必做12防己中粉防己碱的提取及检识综合必做12学时总计36二、实验内容及教学要求实验项目1：大黄素的提取、分离和鉴定教学目标（1）了解学习羟基蒽醌类化合物的鉴定方法。（2）熟悉蒽醌提取分离方法（3）掌握pH梯度提取法的原理和操作技术；教学内容1、大黄蒽醌成分的提取：20g大黄粉，20%H2SO4直火加热，抽滤，水洗，干燥，滤饼，加入乙醚160ml回流提取1h，抽滤，乙醚液溶液，药渣弃去。2、大黄蒽醌成分的分离：用5%NaHCO3溶液80ml分4次对乙醚溶液进行振摇萃取，合并水液。5%NaHCO3溶液，盐酸调pH3，放置，析晶，抽滤，水洗，得大黄酸。乙醚液溶液，用5%Na2CO3溶液80ml分4次对乙醚溶液进行振摇萃取，合并水液。5%Na2CO3溶液，盐酸调pH3，放置，析晶，抽滤，水洗，得大黄素。其中乙醚液中含有大黄酚及大黄素甲醚。3、实验数据及处理结果：（1）化学检视：取大黄素4mg，加甲醇8ml溶解，做如下实验：=1\*GB3①tranboragon反应，=2\*GB3②醋酸镁反应，=3\*GB3③1%AlCl3反应。（2）薄层色谱检视=1\*GB3①0.5%羧甲基纤微素钠为黏合剂的硅胶G板，（10cm×10cm）；=2\*GB3②展开剂：石油醚（bp：60~90℃）-乙酸乙酯（7：3）=3\*GB3③供试样品：乙醚总提取液、大黄素对照品、大黄素样品、萃取后的乙醚液=4\*GB3④显色剂：日光-UV（365nm）-氨气熏。实验项目2：芦丁的提取、分离和鉴定教学目标（1）掌握通过芸香苷提取与精制，掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理和操作。（2）掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷、苷元和糖部分的检识方法。（3）掌握由芸香苷水解制取槲皮素的方法。教学内容芦丁的提取：槐花米粗粉20g，加水200ml，加热煮沸，另取140ml饱和石灰水，分次加入（约5ml/次），滤过。药渣弃去，滤液加热至70℃，浓盐酸调pH3～4，析晶2小时，滤过。滤液弃去，沉淀，室温下晾干，芸香苷粗品。芦丁的精制：芸香苷粗品1g，加蒸馏水200ml，煮沸溶解20min趁热抽滤。滤渣弃去，滤液，静置析晶（静置3小时以上），抽滤。滤液，结晶。室温下晾干，精制芸香苷。芦丁苷的水解：精制芸香苷1g，加1％硫酸100ml，加热回流30min，至沉淀不再增加为止，放冷抽滤。滤液弃去，沉淀用少量水洗去余酸，晾干，槲皮素粗品。芸香苷、槲皮素及糖的检识：取芸香苷、槲皮素少许，分别用8ml乙醇溶解，制成试样溶液，按下列方法进行实验，比较苷元和苷的反应情况，观察并记录颜色变化。（1）Molish反应：（2）盐酸-镁粉反应：（3）醋酸镁反应：（4）三氯化铝反应：（5）锆-柠檬酸反应：（6）聚酰胺薄层色谱检识：薄层板：聚酰胺薄膜展开剂：80％乙醇显色剂：可见、uv，氨水，1％三氯化铝。实验项目3：防己中粉防己碱的提取及检识教学目标（1）熟悉生物碱的一般理化性质。（2）熟悉粉防己碱和防己诺林碱的检识方法。（3）掌握生物碱的溶剂提取法和粉防己碱与防己诺林碱的分离方法。（4）掌握回流法、萃取法、结晶法等的基本操作过程及注意事项。教学内容1、防己总生物碱的提取萃取法：将50g汉防己粗粉置于1000ml圆底烧瓶中，分别用85％乙醇400ml，回流提取1小时，过滤，得乙醇液。浓缩至近干，得乙醇提取物。2、防己总生物碱的精制提取物用50ml1％盐酸分3次溶解，与50℃水浴中搅拌促溶，过滤除去树脂物，合并滤液于分液漏斗中，用浓氨水调至pH9，用环己烷－乙酸乙酯－（25：75）（30ml×4次）萃取，合并萃取液，以适量无水硫酸钠干燥，过滤，蒸馏回收溶剂，即得亲脂性叔胺总碱。3、防己生物碱的检识（1）生物碱沉淀反应取粉防己碱的盐酸水溶液8ml分置于4支试管中，分别滴加下列试剂2～3滴，观察并记录有无沉淀产生及颜色变化。①碘化铋钾试剂②碘化汞钾试剂③碘－碘化钾试剂④硅钨酸试剂（2）薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：粉防己乙醇溶液亲脂性叔胺总碱乙醇溶液对照品：粉防己碱对照品乙醇溶液防己诺林碱对照品乙醇溶液展开剂：氯仿-丙酮-甲醇（4∶5∶1）显色剂：喷雾改良碘化铋钾试剂三、考核方式及要求考查，签到占5%，实验卫生5%，实验操作20%，产品收率及纯度10%，实验报告60%。操作共考查安全操作，回流提取、滤过、抽滤、蒸馏、重结晶、萃取、薄层层析、喷雾显色等规范化操作。四、主要仪器设备及实验材料项目编号实验项目名称主要仪器设备及台（套）数实验材料大黄素的提取、分离和鉴定电炉、水浴锅、冷凝管、圆底烧瓶、分液漏斗。循环水真空抽滤泵，旋转蒸发器、电热套大黄、大黄素对照品。硫酸、乙醚、NaHCO3、Na2CO3、NaOH、石油醚、乙酸乙酯、薄层板芦丁的提取、分离和鉴定电炉、水浴锅、冷凝管、圆底烧瓶、分液漏斗。循环水真空抽滤泵，旋转蒸发器、电热套槐米、芦丁、槲皮素对照品。硫酸、石灰、盐酸、乙醇，甲醇，镁粉，枸橼酸、聚酰胺薄膜、