山东省鬼针草属药材品质评价研究-生药学专业毕业论文

目 目 录引 言…… 1第一部分文献综述……41生物学研究……4.1细胞学研究……4.2种子的PAGE分析……52化学成分研究……52.1黄酮类化合物……52.2挥发油类……72.3氨基酸……72.4无机盐和微量元素……82.5酚酸类……83鬼针草的药理作用研究……83.1抗菌、抑菌作用……83.2抗炎症作用……93.3对胃液酸度和分泌量的作用……93.4对中枢神经系统的作用……93.5对心脏的作用……93.6对血压的影响…… 03.7对血脂及血栓的影响…… 03.8对血小板聚集功能的影响…… 03.9对上呼吸道感染作用…… 03.0对体外血病细胞的抑制作用…… 03.H 抗痢疾作用…… 03.2保肝作用…… H3.3对血糖的影响…… H4鬼针草的临床研究…… H4.1预防感冒、流感…… H44.2治疗阑尾炎…… H4.3治疗急性黄疽型肝炎…… H4.4治疗慢性前列腺炎…… H4.5治疗原发性高血压…… H5开发前景…… H第二部分本草学考证…… 31名称考证…… 32基源考证…… 33功能主治考证…… 44性味归经考证…… 5第三部分生药学研究…… 61原植物鉴定…… 6.1实验仪器…… 6.2实验方法与结果…… 6.2.1植物形态…… 6.2.2植物检索表…… 92性状鉴别…… 92.1实验仪器…… 92.2实验方法与结果…… 92.3小结……03显微鉴别……23.1实验仪器与试剂……23.2实验方法与结果……23.3小结……34理化鉴别……54.1乙醚提取物化学成分试验……54..1实验仪器与试剂……54..2实验方法与结果……54..3小结……544.2乙醇提取物化学成分试验……64.2.1实验仪器与试剂……64.2.2实验方法与结果……64.2.3小结……64.3水提取物化学成分试验……64.3.1实验仪器与试剂……64.3.2实验方法与结果……74.3.3小结……74.4讨论……8第四部分常规检查……91水分测定……9.1实验仪器……9.2实验方法与结果……9.3讨论……02灰分测定……02.1实验仪器与试剂……02.2总灰分测定……02.3酸不溶性灰分测定……12.4讨论……1第五部分含量测定……31浸出物含量测定……3.1水浸出物含量测定……3..1实验仪器与试剂……31.1.2冷浸法……31.1.3热浸法……4..4讨论……5.2醇溶性浸出物含量测定……5.2.1实验仪器与试剂……5.2.2实验方法与结果……6..2.3讨论……7.3挥发性醚浸出物含量测定……7.3.1实验仪器与试剂……7.3.2实验方法与结果……7.3.3讨论……82总黄酮提取工艺研究与含量测定……82.1实验仪器与试剂……82.2测定方法依据……82.3实验方法与结果……82.3.1总黄酮含量的测定……82.3.1.1标准溶液的配制……82.3.1.2最大吸收波长测定……92.3.1.3标准曲线的制作……92.3.1.4样品总黄酮含量测定……02.3.2提取方法的选择……02.3.3提取溶剂的选择……12.3.4提取次数的选择……22.3.5单因素考察实验……32.3.5.1乙醇浓度对鬼针草总黄酮提取率的影响……32.3.5.2液料比对鬼针草总黄酮提取率的影响……42.3.5.3超声时间对鬼针草总黄酮提取率的影响……52.3.5.4提取温度对鬼针草总黄酮提取率的影响……62.3.6正交试验……72.3.6.1正交试验因素水平确实定……72.3.6.2正交试验结果……72.3.7最佳提取工艺验证……82.3.8精密度实验……82.3.9重复性试验……92.3.0稳定性试验……92.2.3.H 加样回收试验……92.3.2样品含量测定……02.3.3讨论……13总糖的含量测定……13.1实验仪器与试剂……13.2实验方法与结果……13.2.1对照品溶液的制备……13.2.2可溶性糖供试品溶液的制备……13.2.3粗多糖供试品溶液的制备……13.2.4显色剂的配制……13.2.5最大吸收波长的测定……13.2.6稳定性试验……23.2.7精密度试验……23.2.8标准线的绘制……33.2.9加样回收试验……33.2.0样品多糖含量测定……33.2.101可溶性糖的测定……43.2.10 粗多糖的测定……43.2.10.3总多糖的计算……43.2.H 讨论……54挥发油含量测定与成分分析……64.1挥发油含量测定……64..1实验材料……64..2实验仪器与试剂……64..3试验方法与结果……64..4讨论……74.2挥发油成分分析……74.2.1实验仪器与试剂……74.2.2实验条件……844.2.2.1气相色谱条件……84.2.2.2质谱条件……84.2.3实验方法与结果……84.2.4讨论……25HPLC法测定鬼针草药材中芦丁、棚皮昔、金丝桃昔的含量……35.1实验仪器与试剂……35.2实验方法与结果……35.2.1色谱条件……35.2.2溶液的制备……45.2.2.1对照品溶液的制备……45.2.2.2供试品溶液的制备……45.2.3含量测定……45.2.4供试品溶液制备条件的考察……45.2.4.1提取溶剂的选择……45.2.4.2提取方法的选择……65.2.5系统适用性实验……85.2.6线性关系考察……95.2.7重复性试验……15.2.8精密度试验……15.2.9加样回收试验……25.2.0稳定性试验……25.2.H 药材含量测定结果……35.3讨论……7第六部分同工酶电泳图谱分析……91材料、仪器与试剂……9.1实验材料……9.2实验仪器……9.3实验试剂……92实验方法……92.2.1凝胶制备……92.2供试品溶液制备……12.3点样……12.4染色……13结果……14讨论……2第七部分结论与建议……4第八部分山东省鬼针草药材质量控制规范(草案)及起草说明……7结 语……3创新点……94参考文献……5附录……9致谢…… H4论文著作…… 1巧引 言鬼引 言鬼针草类药材来源于菊科(Compoe)管状花亚科鬼针草属BdnSLnn(文中均简称为idnSL)一年生草本植物。药用历史悠久，始载于唐陈藏器本草拾遗?，具有清热解毒活血散疲等功效药材资源非常丰富全世界约20余种广泛分布于全球热带和温带地区，尤以美洲种类最为丰富。我国有9个种2个变种，产于华东华中华南西南各省区几乎遍布全国各地生于村旁路边及荒地中。经过调查研究及查阅文献可知山东省有5个种1个变种文献记载鬼针草用治感冒发热、咽喉肿痛痔疮、跌打损伤、冻疮毒蛇咬伤、状腺肿、肠炎、阑尾炎、慢性盆腔炎、附件炎、前列腺炎、慢性气管炎肺气肿、冠心病、慢性胃溃疡、子宫脱垂、神经衰弱等。国内外药理研究发现鬼针草具有抗菌抑菌抗炎、防治胃炎[、中枢抑制、抗心律失常[防止血栓形成促进血小板聚集[治疗上呼吸道感染抑制体外血病细胞保肝的作用尤其对消化系统中枢神经系统及心血管系统显示较强的药理作用[对于急慢性胃溃疡神经衰弱及心血管病的治疗显示较强的疗效。国内外一系列药理活性和临床研究也表明该属植物在治疗原发性高血压抗疟、调节血糖、预防癌症等方面具有很好的作用，人们已经将其开发成制剂应用于临床;在我国民间人们也改变了视其为一种杂草的认识开始大量采收利用，同时在台湾和本等地也相继开始将其作为一种代茶饮期达到抗炎和预防癌症等疾病的效果。研究发现鬼针草全草含有黄酮昔氨基酸茎叶含挥发油皂昔生物碱靴质、胆碱无机盐和微量元素等]从中分离得到的活性成分主要包括黄酮多炔昌体、生物碱、靴质、葱酮类等。黄酮类化合物是鬼针草中的主要有效成分具有活血化疲通脉降压功效用于原发性高血压心脑血管疾病具有抗血栓形成的作用对动脉硬化血管栓塞有预防和治疗的作用。前从鬼针草中已经分离到多个黄酮类化合物其中查尔酮类的奥卡宁类最多有5种、噢瞬类化合物有8种、黄酮醇类化合物8种、二氢黄酮类5种黄酮类4种研究发现水提聚酞胺吸附分离法提取鬼针草中的总黄酮方法可行。同时从鬼针草的正丁醇、乙酸乙酷部分首次得到多种黄酮类化合物。分析得出在鬼针草挥发油中共分离出9种成分鉴定出3种化合物。主要成分为为炔类、菇烯化合物及其衍生物。研究发现一些炔类化合物具有抗肿瘤的作用分析结果表明鬼针草挥发油含有丰富的多炔化合物具有深入研究开发利用的价值。鬼针草水提取液测出6种氨基酸其中8种为人体必需的氨基酸总氨基酸含量达39599kg其氨基酸含量相当于牛99479g羊肉97499kg猪肉06859kg)的13一14倍是鲤鱼的55539kg16倍对虾76099kg)的18倍鸡蛋5849kg)的23倍小麦粉39239kg稻米33399kg的4倍牛奶3.659kg的0倍因此鬼针草是应用价值很高的植物药材。鬼针草在民间验方有小儿参之称该药草可治小儿疮积，营养不这与鬼针草中含有丰富的氨基酸和维生素有关尤其与组氨酸有密切关系，因为组氨酸是儿童的必须氨基酸而成人可以在体内合成组氨酸另外含量最高的谷氨酸具有促进细胞生成改善脑细胞营养活跃思想的作用除了可治疗神经衰弱和记忆力减退外还是很好的胃酸调节剂。由此可见鬼针草所含有的氨基酸具有十分广阔而诱人的开发前景。植物染色体的数目形态等是最稳定的细胞学特征之一在不同的种间染色体有不相同的数目核型及体积等特征区别植物染色体的核型类型等也表明该种系统演化位置以及和相近种的亲缘关系的重要依据。在对中草药进行深入研究的同时，对每种系药用植物染色体进行系统的研究在中药的生药鉴定、种培育及驯化等方面具有重要的意义葛氏王冰等对鬼针草属细胞学领域进行了研究得到染色体核心公式，发现染色体的数量、形态清晰，为进一步的深入研究打下了基础。石俊英等采用聚丙烯酞胺凝胶电泳法对山东鬼针草属植物小花鬼针草等六种植物种子进行电泳分析结果显示各样品的蛋白电泳图谱明显不同为该属药用植物的化学分类和鉴定提供了科学依据5。鬼针草作为一种常用的民间药应用非常广泛具有好的应用价值和广阔的发展前景已经受到越来越广泛的关注国内外对于它们的化学成分和药理活性方面的研究也很多但是前该植物在我国除了一些地方标准之外在中国药典?中并未收载。作为民间草药，中国药典?977年版对鬼针草属药材狼把草从来源、性状、炮制性味功能主治用法用量贮藏几个方面进行了简单的描述记载但是在中国药典?修订时，因为狼把草资源贫乏无法确定质量好产量高的产地对采收利用无法进行有效的指导，因此在之后的中国药典?中并未对其进行收载，而民间不同的地方对鬼针草的使用品种非常混乱调查发现鬼针草属中有数种都作为鬼针草草药材以供药用为了控制其药材质量开发应用价值规范应用标准对鬼针草属药材进行科学系统的鉴定和质量评价建立规范科学的鬼针草质量标准评价系统已成为函待解决的问题。本课题主要采用传统经验与现代技术相结合的方法，对鬼针草进行了原植物鉴定性状鉴别显微鉴别理化鉴别等系统的生药学研究;对鬼针草名称演化植物来源等进行了本草考证;并对其水分灰分浸出物常规项进行了检查;采用分光光度法对总黄酮、总糖含量进行了测定;对挥发油进行了含量测定并采用GCMS进行了成分分析选择同工酶物质来进行种间的品质评价研究采用同工酶电泳技术对不同种鬼针草进行了分析;采用高效液相色谱法对三种黄酮昔类成分进行了含量测定为鬼针草的品种鉴定和质量评价提供科学的依据以期为临床用药和鬼针草的产业化规范化种植提供指导和依据为高新技术产业发展做好技术成果储备为鬼针草制定质量标准以及规范应用提供可靠的理论依据。第一部分第一部分文献综述鬼针草类药材来源于菊科Compote管状花亚科鬼针草属idnsL一年生草本植物又名婆婆针鬼钗草小鬼针粘身草等药用历史悠久始载于唐陈藏器本草拾遗?鬼钗草味苦平无毒主蛇及蜘蛛咬杆碎傅之亦杆绞汁服。生地畔有娅方茎子作钗脚着人如衣针北方呼之为鬼针2中药大辞典载鬼针草苦平无毒。功能:清热解毒、散疲消肿。主治:疟疾、腹泻、痢疾、肝炎、急性肾炎、胃痛、噎隔、肠痈、咽喉肿痛、跌打损伤、蛇虫咬伤3。文献记载用治感冒、状腺肿、前列腺炎慢性气管炎肺气肿、冠心病慢性胃溃疡慢性盆腔炎、附件炎、子宫脱垂、神经衰弱等对原发性高血压有较好疗效。鬼针草属药材资源非常丰富约230种我国有9个种和2个变种遍布全国各地山东有六个种，一个变种]作者经过大量文献考证，以及实地调研分析，确定山东省有五个种一个变种而分类中所述的鬼针草和婆婆针属于异名同种并非两个不同的品种。文中为了与鬼针草商品相区别，鬼针草这一种用婆婆针这一命名表述。1生物学研究11细胞学研究植物染色体的数目、形态等是最稳定的细胞学特征之一在不同的种间染色体有不同的数目核型及体积等特征区别植物染色体的核型类型等是判断该种系统演化位置以及和相近种的亲缘关系的重要依据。在对中草药进行深入研究的同时对每种系药用植物染色体进行系统的研究在中药的生药鉴定、种培育及驯化等方面具有重要的意义。葛氏研究了婆婆针根尖中期制成的染色体其核心公式为KZ3x367m+3+6sAT染色体相对长度Zn366L+9M2+N+35核型为ZA型染色体体积变化范围在18m3一42m间全组染色体总体积为77m3。证明此种在进化上处于较原始的状态染色体存在核Zn243682和4的倍性变异没有发现非整倍性变异。小花鬼针草染色体存在Zn=4、36、8、2、4和6的二倍体、三倍体、四倍体、六倍体、七倍体和八倍体多倍体系列。狼把草也存在多倍体。通过研究葛氏认为作为原始的二倍体祖先有可能将逐渐消失多倍体现象在植物中普遍存在它是物种然进化的一个重要途径。虽然鬼针草染色体数存在如此大的倍体差异但在个体发育的表现上没有大的明显差异。王冰等王冰等4采用常规制片方法结合显微摄影对染色体进行检测分析对鬼针草、小花鬼针草染色体核型等进行了系统研究鬼针草染色体除观察到正常的n2外还发现有Zn70的非整倍体核型公式是KZ6X236m+8m++染色体相对长度组成为Zn72SL+26M+34M+45属于ZB型全组染色体总长是834m长臂总长32m核型不对称系数为23%染色体总体积77m3小花鬼针草体细胞染色体数目Zn8核型公式是KZ4X484mlsm+6染色体相对长度组成为Zn486L+6M+22M+45属于ZB型。全组染色体总长是3503m长臂总长253m核型不对称系数为432%染色体总体积13四3认为染色体的数量形态清晰可为进一步的深入研究打下基础。12种子的AGE分析石俊英等采用聚丙烯酞胺凝胶电泳PAGE)对山东鬼针草属植物小花鬼针草等6种植物种子进行电泳分析结果显示各样品的蛋白电泳图谱明显不同为该属药用植物的化学分类和鉴定提供了科学依据。2化学成分研究在本草拾遗?中记载鬼针草可主治蛇及蜘蛛咬。另外泉洲本草?也有消疲镇痛敛金疮。〞等记载。经现代研究发现鬼针草全草含有黄酮昔、氨基酸茎叶含挥发油、皂昔、生物碱、靴质、胆碱、无机盐和微量元素等。21黄酮类化合物黄酮类化合物具有活血化淤、通脉降压功效用于原发性高血压心脑血管疾病，具有抗血栓形成的作用对动脉硬化血管栓塞有预防和治疗的作用。据中华本草?记载鬼针草属植物中含有的活性成分有黄酮类中查尔酮类的奥卡宁类最多有25种、噢瞬类化合物有8种、黄酮醇类化合物8种、二氢黄酮类5种、黄酮类4种黄酮类化合物是鬼针草中的主要有效成分。前从鬼针草中已经分离到多个黄酮类化合物。中药大辞典?中收载有金丝桃昔脚tse)、异奥卡宁70葡萄糖昔(0oknn7OpDgaopynod·奥卡宁Oknn、海生菊昔Mnn。李帅匡海学等采用硅胶ODs柱色谱分离并结合ephdxLH0和PLc分离纯化通过理化鉴定和波谱分析。从鬼针草的正丁醇部位得到2个化合物，其中十种化合物首次得到，包括黄酮化合物606乙酞基pD毗喃葡萄糖基6734四轻轻基噢瞬、棚皮素3pD毗喃葡萄糖昔、棚皮素3aL鼠李糖昔。姜涛等采用硅胶sPhdxLH0柱色谱等方法对鬼针草乙醇提取物的乙酸乙酷萃取部分进行化学成分研究并利用RHNMRcNMRMs等光谱技术鉴定其化学结构首次从鬼针草中分离得到了6个黄酮类化合物经鉴定分别为5轻基67二氧基黄酮、山奈70aL鼠李糖昔2棚皮素70葡萄糖昔3、棚皮素30aL鼠李糖昔45734四轻基3氧基黄酮5和p谷昌醇6)针对分离得到的化合物进行测定小鼠血清MDA水平SOD和GSHZPx活性研究发现化合物2)(3)(4)和(5)具有较强的抗脂质过氧化作用。黄敏珠等2对鬼针草具有降血糖作用的活性部位的化学成分进行了研究采用0%乙醇渗流提取硅胶反相硅胶ephadxLH0柱层析分离纯化化学反应和波谱分析鉴定其化学结构首次从鬼针草乙酸乙酷萃取部分分离得到棚皮素棚皮素70-鼠李糖昔6734四轻基橙酮45双咖啡g酞奎宁酸豆昌醇3葡萄糖昔34-二轻基苯甲酸乙酷、木犀草素7个化合物。蒋海强等]采用乙醇提取，硅胶柱、聚酞胺柱层析分离纯化，波谱分析鉴定其结构，研究了鬼针草乙酸乙酷提取物与正丁醇提取物的化学成分，得到5个化合物，首次从本属植物中得到棚皮素70pD葡萄糖昔。钟明媚8等采用L3正交设计对从鬼针草中提取鬼针草总黄酮的工艺进行优化。以总黄酮含量为考察指标考察乙醇浓度、提取时间、乙醇用量、提取次数4个因素对提取的影响得到最佳提取工艺为2倍量0%乙醇提取2次次夏勤等采用正交设计法及聚酞胺吸附分离法以提取物中总黄酮含量为指标考察鬼针草的提取工艺并应用分光光度法测定提取物中总黄酮含量，结果每次加0倍量的水提取2次每次提取0m所得提取液中的总黄酮含量最高并应用聚酞胺吸附分离其中的总黄酮，所得提取物中总黄酮的相对含量为最高认为应用水提聚酞胺吸附分离法提取鬼针草中总黄酮的方法可行。冯强等以芦丁为标准品采用比色法对鬼针草全草不同部位所含黄酮量进行了比拟分析实验结果表明鬼针草花果期在叶片和花序中总黄酮含量较高果实中偏低，而茎中总黄酮含量很低。薛德华等对鬼针草茎叶和果实中总黄酮含量进行了测定，结果表明，花果期全草的总黄酮含量比茎叶期高25655%。所以建议鬼针草中黄酮类成分开发利用重点选择叶片部位。陈豪陈豪对鬼针草不同生长期叶片的总黄酮含量进行了测定，结果表明三叶鬼针草茎叶期叶片和结果期叶片总黄酮含量差异不显著。茎叶期植株叶片繁茂茎枝例低相反到了结果期叶片黄化稀疏果实极易脱落茎枝木质化全草重量的绝大部分。故笔者建议假设以三叶鬼针草中黄酮类成分为目的那么应采收茎叶期植株为佳。22挥发油类近几年来研究发现一些炔或炔化合物具有抗肿瘤的作用我们的分析结果表明鬼针草挥发油含有丰富的多炔化合物具有深入研究开发利用的价值。现在对鬼针草中的挥发油类经仪器分析得出在鬼针草挥发油中共分离出69种成分鉴定出53种化合物。主要成分为炔类、菇烯化合物及其衍生物，含量较高的化合物有Z1十三二烯3579四炔94%一376%石竹烯568%一662%大牛儿烯D552%一550%等。采用GCMS联用对鬼针草的全草进行挥发油成分分析时得到以下数据峰面积相对百分含量占挥发油总量的百分数分别为茎中占78%叶中占74%花果中占50%主要为挥发性炔类化合物、菇稀化合物及其衍生物等。花果的挥发油含量最高而且其组分也较多，其中含量有高沸点化合物例如十六酸、植醇等)但其挥发油的率最低。鬼针草全草挥发油成分主要有脂肪烷和脂肪酸类另外含有少量的醛、酮烯睛等成分其中脂肪酸类化合物比例较高而十六酸含量最高76%)其次是804三基十五酮21567%和十五酸56%。23氨基酸鬼针草在民间验方有小儿参之称该草药可治小儿疮积营养不这与鬼针草中含有丰富的氨基酸和维生素有关尤其与组氨酸有密切关系因为组氨酸是儿童的必须氨基酸而成人可以在体内合成组氨酸但儿童时期只能由外界提供另外含量最高的谷氨酸具有促进细胞生成改善脑细胞营养活跃思想的作用除了可治疗神经衰弱和记忆力减退外鬼针草还是很好的胃酸调节剂。由此可见鬼针草所含有的氨基酸具有十分广阔而诱人的开发前景。鬼针草全草水提取液测出6种氨基酸其中8种为人体必需的氨基酸总氨基酸含量高达999g其氨基酸含量相当于牛肉9479kg)、羊肉7499kg)、猪肉06859kg)的13一14倍是鲤鱼的85539kg16倍对虾76099kg)的18倍鸡蛋5849kg的23倍小麦粉39239kg、稻米33399kg)的4倍牛奶3659kg的0倍，是应用价值是应用价值很高的植物药材。24无机盐和微量元素鬼针草中的常量元素中以钙的含量最高钙在血液凝固和维持心脏内肌神经的兴奋性膜的通透性方面及其在心血管病的治疗和预防方面都起重要作用这与鬼针草可以治疗原发性高血压有着密切的联系]磷的含量也很丰富这对调节神经催眠镇静等有一定的作用3。微量元素以铁的含量最高其次是铜、锌、埋、艳。现代研究证明这些微量元素均参与人体各种生理活动过程起到防病、治病的作用如铁能促进血红细胞和血色素的形成铜参与造血系统从而加速铁的吸收锌对生物体有清热生肌之功效艳对肿瘤的预防和抑制作用被验证。鬼针草含铬和镍很少所以说明其药材中毒性很小可以在临床上应用3因此，鬼针草所含的这些人体必须无机元素与该药具有的各种生理活性及治疗功效有密切的关系]。砷是中草药中常见的微量元素一般把它视为有害元素但假设只从总砷量上来评价中草药的毒副作用是不恰当的。王亮等应用离子交换树脂和溶剂萃取相结合的分离技术分离了云南中草药鬼针草中微量砷的四种形态化合物:无机的AI、As(V)和有机的一甲基砷MMA)、二基砷DMA)。同时采用电感祸合等离子体发射光谱(CPAE)进行含量测定，其含量大小顺序为:AI>A(V>MMA>DMA无机砷含量大于有机砷含量就四种形态化合物毒性而言无机AI大于AV有机砷中MMA毒性大于DMA无机砷毒性大于有机砷4。其研究为从分子水平准确认识中草药中微量元素与中草药的药理生理活性关系提供了新思路。郝海玲等6对不同时期的两种鬼针草样品中维生素K的含量了进行定性和定量研究发现鬼针草中维生素K的含量是变化的随着生长期的增长而增加这些为鬼针草在医学上的临床应用提供了依据和参考。25酚酸类酚酸类具有抗菌止血利胆和升高血球的数量的功效鬼针草全草含有水杨酸、原儿茶酸、没食子酸及脂肪酸类化合物。3鬼针草的药理作用研究31抗菌、抑菌作用鬼针草的乙醇浸液在体外对革兰氏阳性细菌有好的抑菌作用李国利等网的研究也发现并证实了其对金黄色葡萄球菌枯草杆菌结核杆菌和真菌有较好的抑菌作用;其水煎用;其水煎剂对分枝杆菌有较强的抗菌作用最低抑菌浓度为smgm;Khn等的实验结果表明三叶鬼针草的乙醇提取物具有广谱抗菌作用;Ge等四通过实验证明了三叶鬼针草的乙醇提取物能有效的抑制枯草杆菌和结核杆菌具有很好的抗菌作用;主治泌尿性疾病、霉菌性阴道炎、足癣、毒蛇咬伤。32抗炎症作用将等量的鬼针草与海洲常山混合制成的水煎剂或酒精浸制剂与大鼠服实验结果表明鬼针草与海州常山混合水煎剂或酒精浸制剂对醛性及蛋清性关节炎均有明显的消炎症状但单用鬼针草与海洲常山对其均无明显作用]。王建平等通过5种抗炎试验模型筛选发现从鬼针草中分离到的新天然成分鬼针聚炔昔对急慢性炎症均有很强的抗炎效果这种抗炎作用与剂量呈正相关其中某些抗炎效果与地塞米松组相当或略强于地塞米松组黄酮类成分通过三种实验模型的初步筛选也显示有较好的抗炎作用充分证明鬼针聚炔昔为该植物的抗炎有效成分之一。主治感冒、肝炎、阑尾炎、急性肾炎。33对胃液酸度和分泌量的作用注射鬼针草生药注射液0一59kg能明显减少大鼠胃液分泌量和降低胃液酸度，且对离体胃平滑肌无影响而对在体平滑肌的运动有抑制作用。主治胃溃疡、胃痛。34对中枢神经系统的作用鬼针草有较好的中枢抑制作用其作用部位似在脑干的网状结构而对骨髓作用不明显。小白P腹腔注射鬼针草注射液5一09生药kg可延长戊比妥钠的睡眠时间，减少小白鼠主活动可对抗苯丙胺兴奋有主活动协同氯丙嗦抑制主活动对骨髓兴奋药硝酸士的宁引起的强制性惊厥无作用小P鬼针草注射液5一69生药g，扭体反应次数明显减少且随剂量增大有增效趋势镇痛试验对小鼠热板法的痛闽有提高作用。主治头痛。35对心脏的作用经主动脉插管分别给予不同浓度的鬼针草提取液结果均使兔离体心脏出现心律减慢心肌收缩力减慢心肌收缩力减弱mn后心律恢复正常心肌收缩力增强]。主治慢性心脏病。36对血压的影响乌拉坦麻醉大鼠颈动脉插管给药159生药l的鬼针草水和醇提取浸液能分别使大鼠血压下降5516Pa和6519P与给药前相比差异显著<00)并均持续Omn左右。主治高血压低血压。37对血脂及血栓的影响大白9(灌胃给药)鬼针草29生药kg无论是预防给药还是治疗给药均有降低胆固醇和p脂蛋白的作用与生理盐水对照组相比有显著差异P<00;大白鼠颈总动脉和颈外动脉、股静脉给药鬼针草浸膏69及39生药kg对实验性血栓形成有明显的抑制作用抑制率分别为6%及6%对照组9乙酞水杨酸50mgkg时血栓形成抑制率为40%较有非常显著性差异P<000]。主治高血脂、血栓。38对血小板聚集功能的影响鬼针草浓度为2smgmL生药和65mgmL生药时能明显抑制大鼠血小板聚集反应且随剂量加大作用加强呈剂量依赖关系[。主治促进血小板聚集的功能的作用。39对上呼吸道感染作用鬼针草煎剂混入饲料中)治疗鹅传染性上呼吸道卡他疗效明显高于氨苯磺胺治疗组混入饲料和饮水中和青链霉素治疗组混入饲料中其疗程短抗霉抗菌作用强，无毒副作用是治疗上呼吸道卡他的理想药物]。主治感冒、咳嗽。30对体外血病细胞的抑制作用鬼针草五种提取成分对体外培养的二种不同血病细胞HL0、V均有较强的抑制作用尤其对人组织淋巴瘤细胞v7的抑制作用其中聚炔昔混晶和鬼针聚炔昔为最佳。主治对血病有一定功能。31抗痢疾作用Bnao等对9种Bnao等对9种鬼针草属植物提取物进行抗痢疾试验其中7种具有体外抑制寄生虫生长作用以三叶鬼针草抗痢疾活性最强活性成分为苯基3二炔5烯7醇-乙酸酷。小花鬼针草和金盏银盘不具有抗痢疾活性2。主治:家畜肠炎、腹泻、尿血、跌打损伤。32保肝作用鬼针草提取液可用四氯化碳对乙酞氨基酚诱发肝损伤使大鼠升高的SGOT和SPT水平下降表明其有明显的保肝作用。主治保肝护肝。33对血糖的影响鬼针草5种提取物以0%的浓度按09kg剂量给高血糖小鼠和正常小鼠灌胃乙酸乙酷、正丁醇提取物能使高血糖小鼠和正常小鼠血糖下降其余提取物小鼠血糖无显著下降作用。主治:糖尿病。4鬼针草的临床研究]41预防感冒、流感野菊花39鬼针草69每周剂可以降低感冒的发生率。临床上在治疗外感之药中加用鬼针草效果更佳。42治疗阑尾炎鬼针草单味药39煎服治疗阑尾炎35例亚急性2例结果痊愈5例有效8例无效2例。43治疗急性黄疽型肝炎黄牛木叶69鬼针草69每日1剂0天为一疗程治疗黄疽型肝炎治愈率为9017%。44治疗慢性前列腺炎0%一40%鬼针草液采用直流电透入法0m/次1次天7一4天为1疗程治疗06例慢性前列腺炎患者结果痊愈6例其余有不同程度好转。45治疗原发性高血压用鬼针草制成的悦年片治疗原发性高血压9例结果显效。5开5开发前景鬼针草含有多种化学成分具有多方面的药理活性尤其对心血管系统、消化系统显示较强的药理作用。鬼针草属植物氨基酸含量高可作为提取氨基酸的原料其所含的黄酮类成分是抗菌消炎的活性成分而其对中枢神经系统的镇痛作用、抑制血小板聚集作用防血栓和胆固醇作用等的生理活性成分尚需进行深入的研究鬼针草还可应用于急、慢性胃溃疡神经衰弱及心血管病的治疗也显示较强的疗效值得进一步研究与探讨。第二部分第二部分本草学考证1名称考证本草拾遗?:陈藏器曰生池畔，方茎，叶有娅，子作钗脚，着人如衣服。北人谓之鬼针南人谓之鬼钗鬼针之名便被大多文献沿用下来但随着人类对于医药认识的进一步发展，由于其在全国分布较广故别名较多实际应用中品种也较混乱，闽东本草?名勃身草; 全国中草药汇编?名刺针草; 中国植物志?名婆婆针;福建民间草药?名鬼黄花、山东老鸦草; 江苏植物药志?名鬼骨针; 浙江民间草药?名引线包针包草、一把针; 中国药用植物图鉴?名刺儿鬼、鬼疾黎; 泉州本草名乌藤菜清胃草跟人走;闽东本草?名粘花衣鬼菊;江苏药材志?名脱力草、小鬼针; 江西草药?名索人衣、一包针; 上海常用中草药?名家脱力草; 全国中草药汇编?名刺针草; 中药大辞典?名粘身草而同时其在民间的叫法也有很多别名如江西安徽名一包针索人衣跟人走、小鬼针;北京混称稀签草、小叶稀签草、北山稀签草、大黄袍;山东名锅钗;江苏名鬼骨针、止血草鬼葛草粘花衣草脱力草;上海名家脱力草;浙江名引线包针包草一把针竭力草、刺儿鬼鬼蕉黎针线包;江西名叉子草;福建名鬼黄花、山东老鸦草、盲肠草跳虱草粘花衣鬼菊糯粘草老鸦草、山虱母粘衣草、咸丰草、金丝苦令、针刺草烛台草、内月红黄花老鸦草家蚤刺、大头锁、山苦令;湖南名饿蚂蜗、攀倒颤、鸦婆针、斑头颤;四川名豆渣菜、豆渣草;贵州名锥叉菜、毛锥子草、钢叉草、叉婆子、乌藤菜、清胃草、跟人走、粘花衣、鬼菊、刺针草。可知，现代文献中常用的鬼针草、婆婆针的命名与历代本草名称基本一致，但是民间的用药及名称比拟混乱。2基源考证鬼针草始载自本草拾遗?，其中对鬼针草有详细的描述方茎，叶有娅，子作钗脚，着人衣如针〞植物名实图考?卷十四亦载有鬼针草并有附图，其附图特征与三叶鬼针草idnspsaL相符。本草纲拾遗?云:铁宪帚，山间多有之，绿茎而方，上有紫线纹，叶似紫顶龙芽，微有毛，七月开小黄花，结实似宪帚形，能刺入手。故又名千条针。其特征与菊科鬼针草属植物金盏银盘相似。山东省中药材标准?:本品茎略成方形，幼茎有短柔毛。叶对生或互生，纸状分裂小裂片三角状或菱状披针形边缘具不规那么细齿或钝齿两面略有短毛，质而质而脆多皱缩破碎头状花序直径5一Om，总花柄长2一cm总苞片条状椭圆形，先端尖或钝，被细短毛，舌状花黄色，通常有1一3朵不发育，筒状花黄色，发育，长约smm。气微，味淡。，中华人民共和国药典?977年版:本品根呈圆柱形，灰黄色，多分枝，有须根。茎圆柱形，长0一6cm，表面暗绿色或暗紫色，有纵纹。叶对生，多皱缩或破碎完整叶片展平后呈椭圆形或长圆状披针形长6一2m;上部叶常3裂下部叶常5裂绿色边缘有锯齿，叶柄有狭翅头状花序顶生或腋生，总苞片多数外层叶状，有毛。管状花黄色。瘦果扁平，两侧边缘各有一列倒钩刺，冠毛芒状，多为2枚。气微，味苦。以色绿、叶多、有花者为佳7。可见现在所用鬼针草与历代所用鬼针草的植物来源基本一致。3功能主治考证本草拾遗?:主蛇及蜘蛛咬，杆碎敷之，亦杆绞汁服本草纲目?:涂蝎蚕伤。药性考?:疗虫伤，风热烦躁。福建民间草药?:散疲活血，消痈解毒。江苏省植物药材志?:捣汁敷，止血。中国药用植物图鉴?:煎服，治痢疾，咽喉仲痛，噎隔反胃，责门痉挛及食道扩张等症。有解毒，止泻，解热功效。近用治盲肠炎。泉州本草?:消疲，镇痛，敛金疮。治心腹结痛，产后疲血，月经不通，金疮出血，肠出血，出血性下痢，尿血。闽东本草?:治肠痈，淋浊，疟疾，黄疽，小便不利，跌打损伤。中国植物志?:为我国民间常用草药，有清热解毒、散疲活血的功效，主治上呼吸道感染、咽喉肿痛、急性阑尾炎、急性黄疽型肝炎、胃肠炎、风湿关节疼痛、疟疾，外用治疮疖、毒蛇咬伤、跌打肿痛。杭州药用植物志?:强壮剂，活血，通经。沙漠地区药用植物?:祛风湿。全国中草药汇编?:清热解毒，祛风活血。主治上呼吸道感染，咽喉肿痛，急性阑尾炎，急性黄疽型传染性肝炎，胃肠炎，消化不良风湿关节疼痛疟疾;外用治疮疖，毒蛇咬伤，跌打肿痛。浙江浙江药用植物志?:主治肺炎，肝炎。可见，现代鬼针草的应用与古代鬼针草功能主治基本一致。4性味归经考证本草拾遗?:味苦，平，无毒。泉州本草?:性温，味苦，无毒。药性考?:寒。青岛中草药手册?:微寒。可知，鬼针草性微寒，味苦，无毒。第三部分生药第三部分生药学研究本实验中所用鬼针草属药材，经山东中医药大学生药教研室彭艳丽教授鉴定为菊科(Compote)管状花亚科鬼针草属idnsL一年生草本植物。鬼针草属药材实验材料见表1。表1鬼针草属实验药材编号 样品名称 产地 生长环境 采收时间 加工方法1 鬼针草商品 建联药店 购买 2008年8月 未知2 大狼把草 济南长清 校园内 2008年9月 阴干3 金盏银盘 临沂蒙山 山上低海拔 2008年9月 阴干4 小花鬼针草 临沂蒙山 山上高海拔 2008年9月 阴干5 婆婆针 临沂蒙山 半山腰 2008年9月 阴干6 狼把草 菏泽 路边 2008年9月 阴干7 矮狼把草 菏泽 路边 2008年9月 阴干1原植物鉴定11实验仪器数码相机、放大镜、直尺等12实验方法与结果对野外的原植物进行观察用直尺进行测量并用数码相机进行拍照各品种的特征分述如下121植物形态大狼把草:一年生草本，高0一15Om。茎直立，分枝，常带紫色，被疏毛或无毛。叶对生，叶柄有狭翅;一回羽状复叶，小叶3一5枚，披针形，长3一0m，宽1一3m先端渐尖边缘有粗锯齿通常背面被稀疏短柔毛顶生叶具明显的柄。头状花序顶生或腋生，直径1一3m;总苞片钟状或半球形，外层苞片5一0枚，通常8枚，披针形或匙状倒披针形，叶状，边缘具缘毛，花为两性管状花，花冠冠檐5裂。瘦果较宽，扁平，倒卵状狭楔形，长5一0mm，顶端芒刺2枚，少有3一4枚，有侧刺毛。(附图1)金盏银盘:一年生草本，高0一OOm茎直立呈四棱形无毛或被稀疏卷曲短柔毛。叶对生;一回羽状复叶，下部的叶有时为单叶，顶生小叶3枚，有时5枚，具具柄，卵形或卵状椭圆形，长2一cm，宽1一2sm，先端渐尖，基部楔形，边缘具稍密的锯齿;头状花序花序梗长1一cm总苞绿色基部被细柔毛外层苞片7一8枚，线形，先端渐尖，背面密被短柔毛，内层苞片长圆状披针形，背面褐色，有深色条纹被短柔毛;花杂性舌状花通常3一5朵不育舌片色或黄色先端3~5齿裂，或有时无舌状花;管状花两性，黄褐色，冠檐5齿裂。瘦果条形，略扁，色，具4棱，先端渐狭，多少被硬毛，顶端芒刺3一4枚，具倒刺毛。(附图2)小花鬼针草:一年生草本，高0一7Om。茎直立，多分枝，下部圆柱形，有条纹，中上部常为钝四方形，常带暗紫色，无毛或被稀疏短柔毛。叶对生;叶柄长2一3m，背面微凸或扁平，腹面有沟槽，槽内及边缘有疏柔毛;叶片长6一0m，二至三回羽状分裂裂片条形或条状披针形有齿或全缘先端锐尖上面被短柔毛下面无毛或沿叶脉被稀疏柔毛上部叶2回羽状全裂最上部叶线形不分裂头状花序近圆柱形，具细长梗;总苞筒状2一3层黄褐色基部被柔毛外层苞片绿色，4一5枚，线状披针形，边缘被疏柔毛，内层常仅1枚，托片状;托片边缘透明;无舌状花;管状花两性花冠筒状冠檐4齿裂瘦果条形略具4棱长3一6mm，先端渐狭，有小刚毛，顶端芒刺2枚，有倒刺毛。(附图3)婆婆针:一年生草本，高0一8cm茎直立，下部略带淡紫色，四棱形无毛，或于上部的分枝上略具细毛。中部和下部叶对生;具长柄;叶片长5一4m二回羽状深裂裂片再次羽状分裂小裂片三角形或菱状披针形先端尖或渐尖边缘具不规那么细齿或钝齿两面略具短毛;上部叶互生，较小，羽状分裂。头状花序直径5一0mm;总花梗长2一0m;总苞杯状，苞片线状椭圆形，先端尖或钝，被细短毛;花杂性，边缘舌状花黄色，通常有1一3朵不发育;中央管状花黄色，两性，全育，长约smm，裂片5枚;瘦果条形，长1一cm，宽约mm，具3一4棱，有短毛;顶端冠毛芒状，3一4枚，长2一smm。(附图4)狼把草:一年生草本，高0一9cm。茎直立，圆柱状或具钝棱而稍呈四方形，绿色或带紫色无毛，上部分枝。叶对生，下部的较小不分裂，边缘具钝齿通常于花期枯萎;中部叶具柄，柄长08一2sm，有狭翅，叶片长椭圆状披针形，长4一3m，不分裂或深裂，裂片3一5枚，裂片披针形至狭披针形，顶生裂片较大，两端渐狭具锯齿;上部叶较小披针形三裂或不裂头状花序顶生具较长的花序梗;总苞盘状，外层苞片5一9枚，线形或匙状倒披针形，先端钝，叶状，具缘毛。内层苞苞片褐色，有纵条纹，具透明或淡黄色的边缘;托片线状披针形，背面有褐色条纹，边缘透明;无舌状花，管状花两性，冠檐4裂;花药基部钝，先端有椭圆形附属器，花丝上部增宽。瘦果扁平，楔形或倒卵状楔形，边缘有倒刺毛，先端芒刺通常2枚，两侧有倒刺毛。(附图5)矮狼把草:一年生草本高0一2cm茎直立，圆柱状或具钝棱而稍呈四方形，绿色或带紫色无毛，上部分枝。叶对生，下部的较小不分裂，边缘具钝齿通常于花期枯萎;中部叶具柄柄长08一2sm有狭翅;叶片披针形长4一cm不分裂的单叶或3一5裂，两侧裂片披针形，顶生裂片长圆状披针形，边缘具不整齐的粗齿;上部叶较小披针形三裂或不裂头状花序单生，具较长的花序梗;总苞盘状外层苞片5一9枚线形或匙状倒披针形先端钝，叶状，具缘毛层苞片褐色，有纵条纹，具透明或淡黄色的边缘;托片线状披针形，背面有褐色条纹，边缘透明;无舌状花管状花两性冠檐4裂;花药基部钝先端有椭圆形附属器花丝上部增宽。瘦果楔状条形，长5一smm，先端宽约Zmm，边缘光滑或仅具有纤细的疏刺毛，先端芒刺2一3枚，有倒刺毛。18122植物122植物检索表1一回羽状复叶2瘦果较宽扁平倒卵状狭楔形顶端芒刺2枚少3一4枚具侧刺毛……1大狼把草BondoaLnn.)2瘦果条形，具4棱，先端渐狭，顶端芒刺3一4枚，具倒刺毛。……2金盏银盘(BdensbnaMe.tche)1叶羽状分裂或3一5深裂3叶二至三回羽状分裂;瘦果条形，有4棱，先端渐狭。4叶二至三回羽状分裂，末回裂片宽1一Zmm;瘦果顶端芒刺2枚，有倒刺毛。……3小花鬼针草(Bdnspoawd)4叶二回羽状分裂，末回裂片三角状或菱状披针形，宽3mm以上;瘦果顶端芒刺3一4枚。……4婆婆针BdnsbpnnaLnn)3叶3一5深裂，中上部叶常3深裂。5茎高0一9cm，瘦果较宽，扁平，楔形或倒卵状楔形，边缘有倒刺毛，顶端芒刺2枚，两侧有倒刺毛。……5狼把草idnsipiain)5茎高0一2cm瘦果楔形条状边缘光滑或仅具有纤细的疏刺毛顶端芒刺2一3枚有倒刺毛……6矮狼把草BdnspaLnnv.pnsoDon)Sef狼把草变种)由分种检索表可以看出原植物的区分主要从叶形果实的形状和芒刺数目植株高度三个方面进行区分鉴别。2状鉴别21实验仪器数码相机、放大镜、直尺等22实验方法与结果对干燥后各不同种鬼针草属药材进行观察用直尺进行测量并用数码相机进行拍照，各品种的性状鉴别特征分述如下大狼把草:表面灰褐色有纵条纹质硬而脆茎四棱多分枝长0一oom，直径05一cm，易折断，断面黄色，中央有髓部。叶对生，多皱缩，质薄易碎，完整叶展开后为一羽状复叶小叶披针形叶缘具粗锯齿长3一7m宽1一2sm，先端先端渐尖背面被稀疏短柔毛;花序干枯瘦果易脱落而残存圆形的花托瘦果较宽，扁平倒卵状狭楔形长5一0mm顶端芒刺2枚少有3一4枚气微味苦。(附图6)金盏银盘:表面棕褐色茎四棱，有棱线，长0一oom，直径03一ocm完整叶展开后为羽状复叶卵形或卵状披针形叶缘具细齿长2一7m宽1一2sm，有叶柄先端渐尖瘦果条形，略扁，黑色，具4棱先端渐狭顶端芒刺3一4枚，气微，味淡。(附图7)小花鬼针草:表面暗褐色质脆茎下部圆柱形中上部常为钝四方形长5一6om，直径02一o3m，中央有髓部，有时中空。完整叶展开后为二至三回羽状分裂小叶片条状披针形，叶缘全缘稍向上翻卷上面被短柔毛下面无毛或沿中脉被稀疏柔毛长14一1cm宽5一o2m瘦果条形黑色略具4棱两端渐狭，顶端芒刺2枚，气微，味微苦。(附图8)婆婆针:表面黄绿色质韧茎方形或圆柱形，幼茎有稀疏短柔毛尤以节处为多长0一IOOm，直径2一cm，不宜易折断，断面黄绿色，中央有髓部完整叶展开后为二回羽状深裂叶裂片三角状或菱状披针形叶缘具细齿或钝齿上面无毛，下面主脉有稀疏毛，长1一3m，宽1一2sm。瘦果条形，具3一4棱，顶端芒刺3一4枚，气微，味淡。(附图9)狼把草:表面绿色略带紫红色，质硬。茎四棱，有棱线，长0一5om，直径04一osm易折断断面黄棕色中央有髓部或老化中空完整叶展开后为羽状叶，卵圆形或矩圆状披针形，叶缘具锯齿，长2一sm，宽05一1sm，有叶柄，叶柄具狭翅。瘦果扁，楔形，或倒卵状楔形，顶端芒刺2枚，气微，味微苦。(附图0)矮狼把草:表面黄绿色质硬茎四棱有棱线长0一2cm直径01一o3m，易折断断面黄棕色中央有髓部或老化中空完整叶展开后披针形或长圆状披针形，叶缘具粗齿，长2一cm，宽05一1m，有叶柄，叶柄具狭翅。瘦果楔状条形顶端芒刺2一3枚，气微，味微苦。23小结为了便于比拟各品种之间药材的性状特点将上述药材品种的主要性状特征列于表2表表2鬼针草属药材性状鉴别特征茎 叶 果实是 顶品 长 叶 否 端形状 形状 宽(m) 形状 长~ )m) 缘 具 芒草 (门 05~色 四棱 羽状 3~7 1~25 齿 短 平，狭 5一0 枚07毛 楔形草色 条形，03~ 齿 毛四棱 羽状 2~7 1~25 略扁， 10~1806具4棱下部圆色 条状 毛 条形，柱形中 45~ 02~ 005~ 缘披针 略具4 10~16 枚上部钝 012形 棱四方形三角 齿针 色 状或 毛 条形，方形或 2()门 02~菱状 么气 具3一4 10~17柱形 06披针 棱形带卵圆扁，楔草 形或 齿04~ 05~ 毛 形，或四棱 矩圆 2~5 5~7 枚05 15 倒卵状状披楔形针形披针狼色 形或 粗10~ 住毛 楔状条四棱 长圆 2~4 05~1 5~7形状披针形由表2可知由表2可知干燥后不同品种的鬼针草的外观性状与原植物相差不大品种之间有所差别我们在鉴别的时候主要根据完整叶展开后形状果实的形状和芒刺的数等特征来进行初步的鉴别。3显微鉴别31实验仪器与试剂载玻片盖玻片酒精灯水合氯醛牙签oMwBAZOOVC显微镜MocmgesAvned32测量系统、Mic互动教室数码显微镜(麦克奥迪实业集团有限公司)直J一。32实验方法与结果取鬼针草属样品粉碎过4号筛混合均匀用水合氯醛加热透化后装片观察粉末特征并且用数码显微镜进行拍照用测量系统对显微特征进行测量将鬼针草属药材的粉末显微特征分述如下:大狼把草:可见非腺毛，1一5个细胞组成，先端较尖，表面具疵点，单细胞非腺毛壁多平直长06一08m;导管以具缘纹孔导管多见偶有螺纹导管和网纹导管，长00一00m，直径00一0m;气孔不等式;花粉粒圆形，直径2一03m外壁表面有细密刺状雕纹;纤维成束或单个散在两端平截壁厚木化或微木化狭长胞腔线性;棕色块可见直径为01一04m;有时可见方晶针晶。(附图11)金盏银盘:非腺毛由2一0个细胞组成先端较尖长05一03卯m;导管以螺纹导管为主，长0巧一02m，直径01一02m;气孔多为不等式;花粉粒圆形，直径02一03m外壁表面有细密刺状雕纹;纤维多成束细长两端平截胞腔线性;可见方晶。(附图2)小花鬼针草:非腺毛由2一4个细胞组成，先端较尖，长00一05m;导管以螺纹导管多见，偶有网纹导管，长02一5m，直径1一04m;气孔为不等式或不定式表皮细胞表面有明显的层纹;花粉粒圆形直径01一005m外壁表面有细密刺状雕纹;纤维多成束细长两端平截壁厚平直胞腔线性;棕色块可见，直径为001一5m;可见方晶与针晶，针晶长Ol一007m。(附图3)婆婆针:非腺毛由2一7个细胞组成先端较尖表面可见层纹长05一08m;导管主要为螺纹导管有时可见导管呈分枝状长02一06m直径01一02m;气孔气孔不等式;花粉粒多见，圆形直径02一005m外壁表面有细密刺状雕纹;纤维多成束细长两端平截壁厚平直胞腔线性;棕色块可见直径为01一03m;可见大量针晶。(附图4)狼把草:非腺毛单细胞，先端较尖，壁厚，胞腔明显，长9一025m;导管以螺纹导管多见，偶有网纹导管，长02一07m，直径05一015m;气孔不等式;花粉粒圆形直径01一02m外壁表面有细密刺状雕纹;纤维多成束或单个散在两端平截壁厚木化或微木化胞腔线性;棕色块可见直径为03一O5m;无晶体。(附图5)矮狼把草:非腺毛由2一6个细胞组成，先端较尖，表面可见层纹，长1一003m;导管以螺纹导管多见，偶有网纹导管，有时可见导管呈分枝状，长00一015m，直径01一03m;气孔不等式;花粉粒圆形，直径02一03m，外壁表面有细密刺状雕纹，具3孔沟;纤维多成束细长两端平截壁厚平直胞腔线性;棕色块可见，直径为01一4m;可见方晶与针晶。(附图6)33小结综合以上各品种鬼针草属药材的粉末显微特点将鬼针草属药材的主要粉末显微特征列于表3。表表3鬼针草属药材粉末显微特征非腺毛 导管 花粉粒表皮细细胞 晶胞 先 表 类 直径 状 直径 壁及气个 端 囱 长(m) _、长(m) (m) (m)L大 纹 晶式狼一 疵 006一 010~ 010~ 002~ 001~草 气 点 08 050 030 003 004 晶针卜 005~ 纹 015~ 001~ 002~ 晶无1O 030 022 002 003细密纹 不等 晶日2一 尖 010~ 002~ 001~ 式、 001~状4 015 025 004 不定 005 005 晶雕式纹2~ 层 005一 纹 002~ 001~ 002~ 001~ 晶7 纹 08 016 002 005 003纹草009~ 002~ 0005~ 001~ 003~无025 007 0015 002 005狼 方2~ 层 001一 010~ 001~ 002~ O1一 晶6 纹 003 015 003 003 004 针(1)表3可以看出鬼针草属各品种药材在粉末显微特征方面有一定的差别，可以作为品种鉴别的依据。24(2)鬼针草属(2)鬼针草属各品种药材的粉末显微特征的相同点为:非腺毛先端较尖;导管大多为螺纹导管;表皮细胞及气孔为不等式或不定式;花粉粒圆形表面有细密的刺状雕纹;薄壁细胞圆形，木栓细胞多边形。(3)鬼针草属各品种药材的粉末显微特征的不同点为:非腺毛的细胞个数和长度不同，且有的表面有层纹;导管的长度和直径不同;花粉粒的直径不同。4理化鉴别41乙醚提取物化学成分试验411实验仪器与试剂试管、滤纸、硅胶板、乙醚、三氯化铝、5%香草醛浓硫酸试液均为分析纯412实验方法与结果取各品种的鬼针草药材各9分别加乙醚Om振摇提取h过滤滤液备用。4121取各滤液m，分别加%ALCL2滴进行试管反应。4122取各滤液分别点样在滤纸、硅胶板上观察荧光现象。4123取各滤液osm，分别滴入蒸发皿中，再滴加5%香草醛浓H504各1滴进行反应。结果见表4。表4 鬼针草属药材乙醚提取液成分试验结果结果检查项目 反应现象 鬼针草 大狼 金盏 小花鬼 婆婆 矮狼狼把草商品 把草 银盘 针草 针 把草黄酮类化合物色混浊，片刻(l%ALCL:试管 + + + 色转为无色澄清反应)荧光反应(点样于 橙红色周橙红色或红色 红色 红色 红色 红色 红色滤纸上) 围淡蓝色荧光反应(点样在 淡蓝色或红色荧淡蓝色 红色 红色 红色 淡蓝色 红色硅胶板) 光挥发油类(5%香草紫红色沉淀 + + + + +醛浓HSO4)注:+表示阳性结果。413小结通过对不同品种的鬼针草乙醚提取液进行的成分预试验结果表明:鬼针草属各种药材所含成分种药材所含成分基本相似反应现象无明显差别其乙醚浸出液中含有黄酮类化合物和挥发油类成分。42乙醇提取物化学成分试验421实验仪器与试剂试管、具塞锥形瓶、毛细管、滤纸、滴管、水浴锅;5%乙醇、盐酸、镁粉、三氯化铝、硅钨酸试液均为分析纯422实验方法与结果取各品种的鬼针草属药材适量，剪碎，各称取1克，置于具塞锥形瓶中，加0毫升5%乙醇，浸泡4小时，过滤，滤液备用。4221用毛细管吸取各滤液在滤纸上点样，于365nm下用紫外灯观察荧光。4222取以上各醇滤液各5滴分别置于试管中加%三氯化铝醇溶液2滴进行试管反响。4223取以上各醇滤液各2m分别置于试管中加入盐酸数滴及少量镁粉置水浴中加热，溶液显棕红色。(2002版山东省中药材标准规定)4224加硅钨酸试液2滴进行试管反响。实验结果见表5。表5鬼针草乙醇提取液成分试验结果检查项目 反应现象 结果荧光反应 红色荧光 均+%ALCL3试管反应 黄色 均+(狼把草稍显红色)多加三氯化铝醇溶液 不变色 均+盐酸镁粉反应 棕红色 均+硅钨酸试液反应 淡红色 均+423小结通过对不同品种的鬼针草属药材乙醇提取液进行的成分预试验结果表明:鬼针草属各种药材所含成分相似反应现象无明显差别其乙醇提取液中含有黄酮类化合物、生物碱、挥发油类成分。43水提取物化学成分试验431实验仪器与试剂试管、酸度计、毛细管、滤纸、滴管、水浴锅;613项下样品提取挥发油后的水溶液;盐酸、镁粉、荀三酮硫酸铜、酒石酸钾钠、嗅酚蓝、氢氧化钠、浓硫酸、醋配、三醋配、三氯化铁三氯化铝、碘、碘化钾、碘化汞钾、苦酸3，5二硝基甲苯、3，5二硝基苯甲酸均为分析纯。432实验方法与结果将挥发油含量测定项(第五部分)下各样品挥发油提取后的水溶液过滤、浓缩，备用用常规特异显色反应沉淀反响或荧光反应进行化学成分类别的鉴别实验结果见表6。表6鬼针草水提取液化学成分试验结果检查项目 试验名称 反应现象 反应结果碘化汞钾反应 色沉淀 ++生物碱碘碘化钾反应 棕色沉淀三氯化铝反应 黄绿色黄酮类化合物 盐酸镁粉反应 红色荧光试验 黄色荧光菲林(Fhng)试验 红色沉淀糖、多糖莫里希(Moh)试验 界面有紫色环亚硝酸铁氰化钾试验 未出现红色 均强心昔 3，5二硝基苯酸试验 无紫红色沉淀碱性苦味酸试验 未出现橙红色碱液反应 出现红色 ++蕙类3，5二硝基苯反应 紫红色沉淀醋酸配浓硫酸反应 紫红色皂昔 浓硫酸反应 蓝紫色泡沫试验 有三氯化铁铁氰化钾反应 色酚类三氯化铁反应 绿色氯化钠明胶试验 色沉淀靴质三氯化铁反应 绿色澳酚蓝反应 黄色有机酸PH值 5~6蛋质、氨基酸 荀三酮试验 紫红色:均表示各样品都是阳性结果;均表示各样品都是阴性结果。433小结表6表6试验结果表明，鬼针草属药材各样品的水提液中均含有生物碱、黄酮、糖、多糖、葱酮、皂昔酚类、靴质、有机酸、蛋质、氨基酸等化学成分，不含有强心昔等化学成分。44讨论鬼针草属药材乙醚提取液试验乙醇提取液试验以及水提取液试验表明:其含有生物碱、葱酮、皂昔、酚类、靴质、有机酸以及大量的黄酮类化合物、糖、蛋质、氨基酸挥发油等物质可以将鬼针草属药材中的黄酮蛋质和氨基酸类成分变废为宝充分加以开发利用同时可以进一步研究开发鬼针草药材挥发油的药理活性，开发其在抗肿瘤领域的应用。第四部分第四部分常规检查1水分测定11实验仪器A104电子天平(上海天平仪器厂)、扁形称量瓶、烘箱、干燥器等。12实验方法与结果照水分测定法(中国药典210年版一部附录XH)第一法(烘干法)测定:把样品粉碎使能通过二号筛混合均匀取供试品粉末约29平铺于干燥至恒重(连续两次称量差异在o3mg以下)的扁形称量瓶中，厚度不超过smm，精密称定，打开瓶盖在05℃干燥5小时将瓶盖盖好移置于干燥器中冷却0分钟精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过smg为止，根据减失的重量，计算供试品中含水量(%)。结果见表7、图1。表7鬼针草属药材水分含量水分含量(%)编号 样品 平均值(%) RSD(%)1组 2组 3组l 鬼针草 1051 104 109 108 0332 大狼把草 02 08 04 04 0283 金盏银盘 982 90 987 986 044 小花鬼针草 934 94 939 939 0535 婆婆针 108 103 105 105 0286 狼把草 8051 81 855 856 0587 矮狼把草 90 92 91 91 03鬼针草水分鬼针草水分含量分析图1鬼针草量 2大狼把草{:3金盏银盘4小花鬼针草5婆婆针6狼把草7矮狼把草图1鬼针草水分含量13讨论(1)水分含量受干燥方法、贮存条件、运输等影响。文中所测定样品为相同采收期相同的干燥条件下平行进行处理样品，减小了外在因素造成的影响。(2)不同品种鬼针草水分含量有差异，其中婆婆针水分含量最高，为05%，狼把草水分含量最低为86%其水分含量从高到低为婆婆针一鬼针草商品一大狼把草一金盏银盘一矮狼把草一小花鬼针草一狼把草。2灰分测定中药的总灰分包括中药本身经过灰化后的不挥发性无机盐类，又称生理灰分，和外界的无机搀杂物灰化后遗留下的残留物各种中药在无外来掺杂物时总灰分应在一定的范围之内如有变异那么说明该中药的质量受到了影响灰分的测定可以从一定程度上反映中药的质量。21实验仪器与试剂柑祸A104电子天平(上海天平仪器厂)、马福炉、电炉、干燥器、烘箱、漏斗、水浴锅、表面皿、无灰滤纸等;蒸馏水、稀盐酸等。22总灰分测定照灰分测定法(中国药典200年版一部附录XK)总灰分测定法测定:把鬼针草样品粉碎，使能通过二号筛，混合均匀后，取供试品39，置炽灼至恒重的柑祸中，称定重量(准确至19)，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至50度至500600℃，使完全灰化并至恒重根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量%)，结果见表8。表8鬼针草属总灰分含量总灰分含量%)编号 样品 平均值(%) RSD(%)1组 2组 3组l 鬼针草 75 770 732 756 2722 大狼把草 95 92 90 96 073 金盏银盘 774 758 71 74 1104 小花鬼针草 875 875 870 873 0345 婆婆针 92 939 930 937 0706 狼把草 66 621 635 634 1657 矮狼把草 72 711 76 76 0423酸不溶性灰分测定照灰分测定法(中国药典200年版一部附录XK)酸不溶性灰分测定法测定:取上项所得的灰分在柑祸中小心加入稀盐酸约0m用表面皿覆盖柑祸置水浴上加0mn，表面皿用热水5ml冲洗洗液并入柑祸中用无灰滤纸滤过柑祸内的残渣用水洗于滤纸上并洗涤至洗液不显氯化物反应为止滤渣连同滤纸移置同一柑祸中干燥炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量(%)，结果见表9。表9鬼针草属药材酸不溶性灰分含量酸不溶性灰分含量(%)编号 样品 平均值(%) RSD(%)1组 2组 3组l 鬼针草 105 102 104 104 1052 大狼把草 O5 06 09 07 223 金盏银盘 O1 02 03 02 084 小花鬼针草 128 123 111 121 7285 婆婆针 086 083 084 084 1866 狼把草 139 141 142 141 1047 矮狼把草 16 19 10 15 4924讨论由表8、表9可得柱形图进行，如图2所示。定4…………… 酸分6 分目…… …………4号图2鬼针草属药材灰分含量(1)不同品种鬼针草总灰分的含量有一定差别。总灰分含量由高至低依次为婆婆针一大狼把草一小花鬼针草一金盏银盘一鬼针草商品一矮狼把草一狼把草其中以婆婆针总灰分含量较高97%，狼把草含量最低，为64%。可见，生长环境和海拔对于不同品种灰分含量的影响较大。(2)不同品种鬼针草属药材酸不溶性灰分的含量由高至低依次为狼把草一小花鬼针草一矮狼把草一鬼针草商品一金盏银盘一大狼把草一婆婆针其中酸不溶性灰分的含量以狼把草含量最高，为11%，金盏银盘含量最低，为04%。(3)由灰分和酸不溶性灰分的排序，我们可以看出品种间的总灰分含量和酸不溶性灰分含量有一定的正相关性。第五部分含量测第五部分含量测定1浸出物含量测定11水浸出物含量测定111实验仪器与试剂FA14电子天平(上海天平仪器厂)烘箱干燥器水浴锅20l具塞锥形瓶、滤纸、减压泵、布什漏斗、移液管、蒸发皿、球形冷凝管、电炉等;蒸馏水等。112冷浸法照浸出物测定法(中国药典200年版一部附录XA)水溶性浸出物测定法冷浸法测定:把鬼针草样品粉碎，使能通过二号筛，混合均匀，取供试品约49，精密称定置20ml的锥形瓶中精密加入蒸馏水0Om，密塞冷浸，前6小时内时时振摇再静置8小时用干燥滤器迅速滤过精密量取续滤液0ml置已干燥至恒重的蒸发皿中在水浴上蒸干后，于5℃干燥h，置干燥器中冷却0mn迅速精密称定重量，除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(%)，结果见表0、图3。表0鬼针草属水浸出物含量(冷浸法)水浸出物含量(%)编号 样品 平均值(%) RSD(%)1组 2组 3组l 鬼针草 28 1515 303 355 1022 大狼把草 1174 58 357 36 253 金盏银盘 2121 2275 2101 2166 4l4 小花鬼针草 2070 2304 2121 2165 5665 婆婆针 1502 178 166 1635 9176 狼把草 242 2552 246 2457 3357 矮狼把草 57 953 727 732 2O冷浸冷浸法30.000015U0000含0000门 门 共井00