骨髓细胞染色体制备与观察_第1页
骨髓细胞染色体制备与观察_第2页
骨髓细胞染色体制备与观察_第3页
骨髓细胞染色体制备与观察_第4页
骨髓细胞染色体制备与观察_第5页
已阅读5页，还剩6页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

关于骨髓细胞染色体制备与观察第1页，共11页，2023年，2月20日，星期日骨髓细胞染色体制备与观察实验目的：掌握制备方法，计算分裂中期染色体数目，观察端着丝点的形态特点．实验原理：小鼠骨髓细胞中的造血干细胞，具有高度的分裂能力，可得到较多的细胞中期的分裂相．第2页，共11页，2023年，2月20日，星期日骨髓细胞染色体制备与观察

实验用品：材料：小白鼠（2n=42）．用品：显微镜、冰箱、恒温箱、恒温水浴锅、离心机、注射器、解剖剪、镊子、移液器、载玻片、烧杯等。药品：0.1%(W/V)秋水仙素、2%(W/V)柠檬酸钠溶液、0.07M氯化钾溶液、（或0.35%氯化钾溶液）、蒸馏水、Giemsa原液，甲醇、乙酸等。第3页，共11页，2023年，2月20日，星期日骨髓细胞染色体制备与观察实验步骤：预处理取股骨冲洗骨髓离心低渗固定离心滴片染色观察第4页，共11页，2023年，2月20日，星期日骨髓细胞染色体制备与观察1、取健康小白鼠（约65-90天龄），腹腔注射0.1%秋水仙素溶液0.1ml，剂量为4ml/Kg动物体重。2、2-3小时后，用损伤脊椎法处死小白鼠，取出股骨，把肌肉刮净，剪下，用2%柠蒙酸钠溶液洗净血污及残渣。3、剪去关节头，用3-5ml2%柠檬酸钠溶液冲洗股骨断面至粉白色，制备了骨髓细胞悬浮液。第5页，共11页，2023年，2月20日，星期日骨髓细胞染色体制备与观察4、将骨髓细胞悬液，1000rpm离心10分钟。5、吸去上清液，加入0.075M氯化钾溶液5ml，立即将细胞团吹打均匀，置37℃水浴25-30分钟。6、加入卡诺氏固定液5-6滴，搅拌均匀进行预固定10分。7、再以1000rpm离心10分钟。第6页，共11页，2023年，2月20日，星期日骨髓细胞染色体制备与观察8、弃上清液，仅留约0.2-0.3ml的细胞团与部分上清液，吹均匀制成细胞悬浮液涂片观察。注意：如果细胞分散的不好，可再按上述方法再固定1-2次，使染色体进一步分散。9、取预先冰冻的载玻片，滴2-3滴细胞悬浮液于其上，立即吹气均匀打散、过火、置室温中自然干燥。第7页，共11页，2023年，2月20日，星期日骨髓细胞染色体制备与观察10、用Giemsa染液,染色15-20分钟，自来水冲洗，空气干燥。11、在低倍镜下观察中期分裂相细胞，计算染色体的数目，以确定其细胞2n的染色体数目。第8页，共11页，2023年，2月20日，星期日骨髓细胞染色体制备与观察绘图：绘制一个图像清晰、形态典型的小白鼠染色体组形图。思考：思考实验中应注意的事项，积累经验。第9页，共11页，2023年，2月20日，星期日骨髓

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论