美国FDA用无菌工艺生产灭菌药品的指引1987年

美国FDA用无菌工艺生产灭菌药品的指南1987年用无菌工艺消费灭菌药品

的指南1987年TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument".目的 4.导言 4\o"CurrentDocument".厂房和设备 6\o"CurrentDocument".组分 9\o"CurrentDocument"V,容器/密封件 10\o"CurrentDocument".时限 11\o"CurrentDocument".消费和工艺控制验证 11\o"CurrentDocument"vm.实验室控制 16\o"CurrentDocument".无菌检验 17\o"CurrentDocument".参考资料 20I.目的本指南为有关人员提供用无菌工艺消费灭菌药品的一些操作和规程.这些操作和规程是由契合现行药品消费质量管理规范有关局部的合格方法所组成(21CFR210和211局部)。应该留意，对21CFR600-680局部中规则的生物制品而言,210.2(a)和211.1(b)局部规则,同时遵守600-800局部和分篇210与2同的适当规则是不能够的，关于这些生物制品将制定特殊的规则。因此，生物制品的无菌检验和用于这样检验的培育基必需契合610.12局部的要求。n.导言本指南依据21CFR10.90而发布，它所表达的通用原那么和方法不是法定的,但是为FDA所认可。厂家可依据本指南确保FDA的认可，或许遵照其他不同的规程。厂家采用不同规程时，可事前同FDA商榷但并非必需这样)，以免日后为FDA所否认而糜费人力和财力。假设当局以为需求，可以经过它在法规上的努力和有关人员提出的意见与建议，不时地修订本指南。用无菌工艺和用最后灭菌方法消费灭菌药品有不同之处。最后灭菌方法通常包括在高质量环境条件下产品容器的灌装和密封；产品、容器和密封件通常具有高度的微生物学的质量要求，但不是无菌的。为降低产品的微生物含量并确保随后的灭菌处置成功，重要的是灌装和密封在高质量的环境中停止。然后对在其最终容器中的产品停止灭菌处置--通常用加热法或辐射法。在无菌工艺中，产品、容器和密封件都区分经过灭菌处置，然后放到一起。因产品装入其最终容器后不再停止灭菌处置，所以为坚持产品的无菌性，在极高质量的环境下停止产品灌装和容器封锁至关重要。此外，无菌工艺比最终灭菌法通常有更多的变量，这一要素使得确保最终产品无菌更为困难，例如在无菌灌装前，最终产品的不同局部经过不同的灭菌处置----如玻璃器皿的枯燥加热、胶塞经高压蒸汽处置、液体剂型的过滤，每一处置都需求完全有效并处于控制之下。每一处置都有出错的能够性(另一方面，因最终灭菌的药品通常只要一次灭菌处置，因此出错的能够性有限),而且已灭菌的药品、容器、密封件等的操作在直至停止最终包装之前就有污染的风险，必需慎重控制。这些工艺的不同引出了有关无菌工艺的假定干效果，关系到FDA认可的契合现行药品消费质量管理规范规则中某些局部的方法。现行药品消费质量管理规范中的这些局部通常大多是讨论关于厂房和设备、部件、容器/密封件、消费时间限制、验证、实验室控制和无菌检测，尤其由于这些效果大多触及到工艺的验证，本指南将详细说明。本指南预备回答这些效果并廓清灭菌药品的无菌消费工艺中的某些技术方面效果。应该留意，本文件没有提出无菌工艺中其他几个重要的方面----如人员卫生、无菌任务服和洁净室设计。如需求，这些效果及其他效果将包括在本指南以后的修订版本中。虽然本指南的某些局部也可用于最终灭菌药品的制备，但本指南并不论述最终灭菌药品效果。本指南，在21CFR2H分篇的某些章节所规则的现行药品消费质量管理规范要求之后是FDA以为契合这些要求的操作和规程的讨论。应留意，并非用于无菌工艺处置的灭菌药品的全部规则均失掉过鉴定，只是对提出了中肯效果的局部作了鉴定。本指南还包括了能够对读者有用的参考资料的目录。定义关键区域(Cnticalaieas)：翻开灭过菌的产品或容器/密封件的区域。关键外表(Cnticalsuifaces)：与灭过菌的产品或容器/密封件相接触的外表。D值(Dvalue)：在指定温度下，增加微生物数目90%所需求的时间。过度灭菌工艺(OveikiHsterilizationpiocess)：足以使D值小于1分钟的微生物更少降低12个对数值的工艺。除菌过滤器(Stenhzmgfiltei)：以庞大假单抱菌为挑试菌种，在每平方厘米过滤外表的微牛物最小浓度为10-7的条件下能发生无菌滤出液的过滤器。验证(Validation)：树立高度保证的书面证据，保证一个特定的工艺将自始至终消费出契合其预定规格和质量质量的产品。最差状况(Woistcase)：一组消费下限和下限及环境的，包括列入规范操作规程内的条件与理想条件相比，这组条件具有使工艺进程或产品发作效果的最大时机。这些条件并不一定使进程失败或产品不合格。III.厂房和设备要求211.42节（设计和修建特征）要求，在某种水平上，应有隔离的或特定的操作区域以防污染。对无菌工艺而言，应适时提供正压下经过高效过滤器过滤的空气以及控制无菌条件的监测环境和维护设备的系统。211.46节（通风、空气过滤、空气加热和冷却）要求，在某种水平上，应提供足以控制气压、微生物、灰尘、湿度和温度的设备以及为消费区提供空气所用的过滤系统，包括预过滤和高效过滤器。指点在无菌工艺中有要求隔离和控制的假定干种操作区，依各操作区的性质而需求不同级别的空气。有两个区域对药质量量至关重要----关键区域和控制区域。关键区域关键区域是指灭过菌的产品、容器和密封件暴露于环境中的区域。在该区域的任务包括灭过菌的物料/产品灌装/密封前及这些进程中的操作。这些操作在通常称作''无菌中心〃或''无菌工艺〃区中停止。该区域至关重要，由于产品在容器内不再停止处置并且产品易于受污染，因此，为保证质量，特别是产品无菌，在实践操作中直接接触的环境应具有最高的质量。环境质量的一个方面是空气中微粒含量。微粒十分重要，从物理学方面而言,微粒可以进入产品中使产品污染；或从生物学方面而言，微粒可成为微生物的载体。因此，增加空气中微粒含量和有效地去除存在的微粒很重要。已灭菌容器/密封件和灌装/密封操作直接接触的空气的可以接受的微粒质量是：在离任务台不超出1ft处和灌装/密封操作时气流的下流处测量，每立方英尺空气中含0.5mn或大于0.5um的微粒数量不得超越100个（100级）。有些粉末灌装操作可以发生少量的粉末微粒，但从其性质而言没有形成污染的风险。在这些状况下，在1ft距离内测定空气质量不可行，并且更不能区分影响产质量量的空气污染物和粉尘微粒的''背景噪音〃水平。在这些场所下，产品接触的空气的取样尽能够代表外来微粒污染的真实水平，这一点很重要。在关键区域内，必需有运用高效过滤器过滤的层流空气供应，该空气具有足够从灌装/封锁区内去除微粒的速度。虽然在操作发生少量尘粒或设备的结构于扰层流处也需求较高速度，但正常状况下，90ft/分±20%的速度是足够的。空气也应具有高度的微生物学质量要求。每10ft3不多于一个菌落构成单位的发作率是可以到达的和理想的。在灌装/封锁操作左近，空气不是需求具有高的微粒和微生物质量的唯一气体。接触产品、容器/密封件或产品接触的外表的其他气体，如N2和CO2（例如冲洗或复盖）也应经过无菌过滤。此外，紧缩空气应无可检测到的油蒸汽。关键区域相关于临近的洁净要求较低的区域，应有正压差。可接受的压差为0.05uiH20o控制区控制区是预备未灭菌产品、加工进程中的物料和容器/密封件的区域，是第二类重要的环境控制区。它包括组件混合区和组件、加工进程中的物料、药品和经最后冲洗的与药品接触的设备、容器/密封件的外表暴露在工厂环境中的区域。为了降低最终产品中微粒污染物的水平和控制随后停止灭菌的物品及组件的微生物含量（生物负荷），这一环境应具有高的微生物和微粒质量要求。任务时期在暴露物品的左近测量时，假设每立方英尺中0.5Hm和大于0.5mn的尘粒数不高于100000（100000级），该控制区中空气的微粒质量一般以为是可以接受的。可接受的微生物质量为每10ft3中菌落构成单位不多于25个。为了坚持控制区内空气质量，取得足够的空气流，并相关于临近非控制区坚持正压差十分重要。在这点上，气流应到达每小时至少换气20次，并且压差一般说来至少为0.05uiH20（一切门均封锁）。当门翻开时，外向气流应足以使污染的侵入减至最低限制。控制区内也可以运用周围空气以外的气体。如通入控制区内，这种气体应具有与周围空气相门同的质量。紧缩空气应无可检测到的油蒸汽。除这些消费区外，对有些设备也应提供高质量的过滤空气。设备中的空气与已灭菌的物料，或微生物和微粒含量均低的物料相接触处尤为重要。例如，除菌过滤器运用于冷冻枯燥器真空间歇和热空气灭菌器的通风口处，以确保与己灭菌产品接触的空气是无菌的。异样，进入盛装已灭菌液体的常压容器中的空气也应是经过过滤的。用于盛装具有高度的微生物学的质量要求的物料贮罐内的空气也应是经过过滤的，并且过滤器应是枯燥的，以防止随后梗塞凝聚，或微生物生长而弄湿(有两种方法可以到达这些要求，给过滤器供热和运用疏水性过滤器)。对这些空气过滤器活期停止完整性检测是重要的。坚持空气质量的合格系统包括检测高效过滤器的完整性。为反省密封垫圈周围、框架之间或过滤介质间的走漏状况，装置初次装置时，应先停止完整性检测。尔后，应在距离适事先期停止完整性检测。通常在关键区域每年至少停止两次这样的测试就足够了。但是，假设发现空气质量低或许作为药品非无菌性调查的一局部，就需求停止更多的测试。运用邻苯二甲酸二辛酯(DOP)气雾剂做应战性实验(challengetest)是检测高效过滤器完整性的一种可以接受的方法。由于高效过滤器能截住99.97%直径大于0.3um的微粒，所以确保用做应战性实验的物质有足够数量的该大小范围内的粒子是十分重要的。一种可以接受的邻苯二甲酸二辛酯应战性实验包括：在过滤器气流出口参与邻苯二甲酸二辛酯气雾剂，浓度为每立升空气80〜100ug,速度为过滤器的设计的气流速度，然后在过滤器气流出口处用适宜的光度计探针扫描，取样速度至少为每分钟lft3o探针应扫描整个过滤器的外表和框架，探针的位置应距过滤器的外表1〜2in。一个探针的读数相当于入口挑试品的0.01%就以为有值得留意的走漏的征兆，应加以修缮。不在过滤器出口处参与大小的微粒而用微粒计数器检测走漏是有效的。应留意，过滤器完整性测试和效率测试有不同之处。完整性测试是查出过滤介质、过滤器框架和密封垫能否走漏。挑试品是一种多分散性的气雾剂，通常由大小为l—3um的微粒组成。测试在固定位置停止并用探针扫描过滤器外表，测量出的出口走漏物作为入口应战性实验的一个百分比。而另一方面，效率测试是测定过滤器的速度。该测试运用微粒为0.3um大小的单一分散性气雾剂，它与过滤介质有关并且通常需求特殊设备。出口处的读数代表着整个过滤器外表的平均值，因此效率测试不能用来检测走漏。由于速度的清楚降低能添加污染的能够性，并且速度的变化能影响气流的层流，因此依据已确定距离时间的工艺，监测气流速度也很重要。应测试气流的类型，湍流会搅扰空气的吹扫作用。IV.组分要求211.80节（总的要求）在〃一定水平上要求对组分的贮存、处置及检测、同意或拒收树立书面顺序。211.84节（组分、药品容器/密封件的检测以及同意或拒收）在一定水平上要求那些易受微生物污染（这些微生物污染就组分的运用而言是不允许的）的组分在运用前必需经过微生物检验。引言经无菌工艺制造的灭菌药品中运用的组分的最重要的方面之一是微生物质量。用无菌工艺消费的成品可以因运用含微生物的一个或多个组分而遭到污染。因此，假设不对组分用过度杀灭灭菌工艺，按惯例说明每种易受污染组分的微生物含量和依据这终身物负荷确定适宜的接受或拒收限制是很重要的。如对组分运用非过度杀灭灭菌工艺，那么这个生物负荷的状况在取得高度无菌保证中尤为重要。在无菌工艺中，可以每一组分独自灭菌或几种组分兼并成混合物后灭菌。组分灭菌有几种方法，如经过严厉的验证，每一种方法均可被接受。一种普遍采用的方法是将组分溶解于一种溶剂（如美国药典注射用水）中构成溶液，过滤该溶液。过滤用无菌膜或筒形过滤器。在组分受热能够有不利影响的状况下可以用这种方法。该方法的另一种状况是使过滤后的溶液停止组分的无菌结晶和沉淀，成为无菌粉末。但是这种方法比其他方法触及更多的处置和操作，因此在操作中污染的能够性更大。假设一种组分对受热无不利影响，且该组分是可溶性的，这种组分可以制成溶液并且用独自的高压釜或在有蒸汽套的加压制备容器中停止蒸汽灭菌。关于受热动摇且不溶性组分，干热灭菌是一种适宜的方法。但这种方法的效果是热穿透深度和散布不够。例如，由于粉末的隔热效果，用这种方法处置粉末需求停止适当的热穿透深度和散布的研讨。环氧乙烷外表灭菌是另一种对组分灭菌的方法，但是作为主要灭菌的方法，其有效性是有效果的，由于这种灭菌剂对粉末晶核的耐久穿透性不够。在灭菌处置进程中，环氯乙烷可用于预防能够的微生物污染的粉末外表灭菌。对要求无热原的产品而言，对热原敏感组分的接受或拒绝应有书面规程。被热原污染的组分应当拒绝或停止除热原性质的处置，以使处置后的组分契合规范、规格和特性。V,容器/密封件要求211.94节（药品容器和密封件）在一定水平上要求药品容器和密封件洁净，并依据药品性质，要求无菌和无热原。规范测试方法以及洁净、灭菌和除热原的处置的方法必需写出书面规程并遵照执行。引言在用无菌工艺制备灭菌药品的状况下，灌装和密封操作前容器和密封件的预备不只仅是除去外表碎屑的清洁任务。对注射剂最终产品的完整性而言，容器和密封件的无菌、无热原至关重要。灭菌和除热原处置的方式主要取决于构成容器/密封件的资料的性质。任何严厉验证过的处置方式均可被接受。在运用玻璃容器的状况下，灭菌前的预备一般包括一系列的洗濯及冲洗循环。不但洗濯有效地除去碎屑很重要，而且最终冲洗用水的质量也很重要。最终冲洗用水应契合美国药典注射用水的要求。除热原有各种方法，如先用化学溶液洗濯，随后用注射用水冲洗。干热可用于玻璃容器的灭菌和除热原。干热灭菌/除热原的验证应包括热穿透性和热散布的研讨以及有代表性的处置周期和负载结构以模拟实践消费进程。无论运用什么除热原方法，验证资料应证明该进程将使内毒素含量降低3个对数值。除热原处置能否彻底的一个估价方法是用含量规范内毒素的容器模拟该处置进程并测定内毒素降低的水平。但是，FDA已看法到用内毒素挑试品估价某些洗濯工艺的一个潜在效果，效果发生于将粉状内毒素挑试品宜接用于测试外表而不是先溶解该内毒素并在该外表上停止空气枯燥。粉状物质能够比用空气重新枯燥的物质更易溶于冲洗水中，并且比正常存在于容器/密封件外表的内毒素更易溶于水中。这使人们觉得所研讨的工艺在去除内毒素方面的效果超越厂实践状况。因此，从目的物外表除去内毒素挑试品不应该比除去原来存在的内毒素愈加容易。未经控制的装卸及贮存的塑料容器是热原的来源，因此必需除热原。塑料容器可以用环氧乙烷气体灭菌，生物指示剂可用于监测这样的顺序。同时要监测和控制温度、压力、湿度和环氯乙烷浓度，容器外表和容器内能够存在的残留物（如环氧乙烷和其降解产物）也要测定。胶塞是微生物和热原（如产品要求无热原）污染的另一个能够的来源。在最终蒸汽灭菌前，胶塞一般经过屡次洗濯循环，最后冲洗用美国药典注射用水。增加洗濯和灭菌之间的时间距离也很重要，由于胶塞上的水分有助于微生物生长和热原发生。因胶塞导热差，所以胶塞灭菌工艺的适当验证尤为重要。VI.时限要求21LH1节（消费时间）在一定水平上要求，为确保药质量量，对每终身产阶段的完成时间限制都要确定。引言在无菌工艺制备灭菌药品中，确定时限通常对假定干操作是适宜的。例如，为了防止滤出物因微生物生长或经过过滤器时间过长而遭到污染，产品过滤和灌装操作的全部时间应限制在一个限定的最大值内。这样的限制也防止了过滤器出口端微生物数目的增多，微生物的增多将招致热原发生。vn.消费和工艺控制验证要求211.113节（微生物污染的控制）在一定水平上要求树立和遵守为防止微生物污染灭菌药品而制定的适宜的书面规程。该规程必需包括一切无菌工艺的验证。指点为保证经无菌工艺消费的灭菌产品的无菌，两种操作类型，即灭菌和无菌条件下的灌装/密封的严厉验证最为重要。假设产品的无菌的组件----药品、容器和密封件在容易招致污染这些组件的条件下放在一同，即使最有效的无菌工艺也难以到达目的。相反，假设这些状况没有形成任何污染，但产品组件组装时不是无菌的，那么产品的灭菌也将受影响。就验证灭菌产品组件的无菌组装和这些组件灭菌的可以接受的方式而言，已有效果发生，但是，一些人以为灭菌产品组件的无菌组装操作最为困难且已发生较多效果。因此，本指点重点为验证无菌组装（即灌装和密封）操作。无菌组装操作验证无菌组装工艺的一种可以接受的方法，包括用一种微生物生长培育基模拟灭菌产品灌装操作，这种方式称作''无菌培育基灌装〃。运用该营养培育基，使之暴露于操作者、设备、外表和环境条件下，以尽能够模拟产品将阅历的相反暴露条件。密闭的药品容器中灌装了培育基，然后停止培育以反省微生物的生长,并且评价结果以确定在实践灌装和密封操作中一切给定的药品单位被污染的能够性。培育基灌装连同片面环境监测在验证无菌溶液、悬浮液和粉末的无菌工艺中尤有价值。灌装液体培育基作为验证粉末的无菌工艺的一局部，能够需运用设备和（或）工艺步骤。而这些设备及顺序步骤不会出如今惯例的粉末顺序操作中。但是，这样一些任务关于说明粉末暴露受污染的特性是有价值的，并且是重要的。培育基灌装方面已出现了假定干效果，触及到培育基污染设备、灌装的周期和次数、灌装的规模、培育基自身、环境条件和实验结果。.受培育基污染：一些药品消费厂对培育基灌装操作中营养培育基对设备和用具能够形成污染表示关注。但是，假设培育基经过适当处置，并随后立刻停止设备的清洗、消毒，必要时停止灭菌，那么培育基灌装操作对后来运用同一设备和用具处置的产质量量不会有影响。.频次和实验次数：当一个工艺最后被验证时，每一个独立的培育基灌装均应重复足够次数以保证结果的分歧和有意义。由于一次单一实验的结果可以有误，屡次实验失掉的偏向很大的结果能够标志着该工艺的失控，这是很重要的。FDA以为，在许多状况下，至少需求停止三次独立的实验，这一最少的次数被以为是工业中的一个总的验证原那么。初期验证后，需添加培育基灌装的频次将取决于事故的次数和能够影响该无菌工艺除去灭菌产品组件污染的才干的变化。例如设备和用具的改良、人员的严重变卦、环境测试结果的失常和最终产品无菌检验显示产品遭到污染等都需重新验证该系统。但是，没有上述变化或事故时，普通可以接受的频次是每个灌装/密封消费线，每一班每年至少做两次。全体人员每年必需参与至少一次的培育基灌装。由于运用培育基灌装再验证该工艺，每次再验证中培育基灌装独自实验的次数不用象初期验证时那样多，例如假设实验结果与初期验证的一致，并且环境监测数据证明灌装环境质量在规则的限制内，那么做一次实验就可以了。但是，当数据相反或数听说明该工艺失控时，应确保添加起确定作用的培育基灌装实验。.实验的规模：培育基灌装单位的数目应对检测低污染发作率的概率高得多。曾有报道，要到达95%的牢靠率（信任率），污染率为1/1000,至少需检测3000单位。决议实验规模时，无菌工艺操作继续的时间也是首先要思索的。班次继续的时间尤其要足以掩盖实践正常消费的全部操作。实验单位的数目必需反映出在灌装速度下暴露时间的''最差状况〃，这一灌装速度相当于或低于实践灌装速度。为使培育基接触容器内外表（例如，旋转装有培育基的容器），并易于目检微生物的生长状况，每一容器应灌装足够的培育基，这一点也很重要。.培育基：培育基最重要的方面是它们促进微生物生长的才干。选择用于验证实验的培育基前，应证明其可以支持微生物生长。在这点上，与培育基灌装实验一道培育阳性控制单位是有价值的。普通说来，支持广谱需氧微生物生长的培育基（如胰酶酪陈大豆培育基）是可以接受的。美国药典/国度处方集（USPXXI/NFXI1）所列的用于无菌实验生长促进检测的微生物可用于此目的。在选择适宜的培育基时，也应思索它们能否有才干使经过环境监测和阳性无菌实验结果确证的哪些种类微生物生长。用足够的时间（周期不少于14天）和温度培育培育基单元用以检测由于环境条件和取样方法能够形成的影响致使在其他培育条件下不能生长的微生物生长，这一点也很重要。.环境条件:培育基灌装应在模拟实践和作用为消费质量限制所确定的''最差状况〃的环境条件下停止。在规范操作规程内，这样强调条件在一定水平上是允许的，重要的是用来评定这些规程所包括的顺序的某些培育基灌装进程中存在这些条件。在空气微粒和微生物质量超出正常的状况下和在特别留意的状况下，停止培育基灌装会得出不正确的评定（形成该工艺比实践状况似乎更洁净）。与其那样，不如在确定的人员数目和活动、温度及湿度的限制下对该系统做应战性实验。.实验结果：具有高度牢靠性的实验结果说明产品单位在无菌工艺中被污染的能够性极小。普通说来，1/1000的污染概率是可以接受的。FDA可以接受的这一污染概率并不意味着在1000个单位以无菌工艺消费出的灭菌药品中能够有1个是非无菌的。消费厂对一切非无菌产品的发货负有全部法律责任。FDA仅供认关于如何正确并准确地验证一个控制体系扫除污染的特性方面有迷信和技术的限制。灭菌操作过滤过滤是消毒药品溶液常用的方法，过滤后将药品溶液在无菌条件下参与到灭过菌的容器中。灭菌过滤器是指用最低浓度为107庞大假单胞菌/cm2过滤器外表做应战性实验，能滤出无菌滤液的过滤器。这种过滤器的孔隙直径为0.22um或更小些。在某些状况下，产品粘度高或有胶体性质，不能经过0.22um的孔隙,可以延续运用0.45um的过滤器除去微生物。但是，最好选用比过滤更能保证较高的无菌水平，而对产质量量无不利影响的其他灭菌方法。无论运用什么过滤器或组合过滤器，验证均应包括微生物应战性实验以模拟''最差状况〃消费条件，尤其要思索待过滤物料中微生物的大小。微生物应足够小，不但能挑试过滤器的孔隙，而且能模拟消费中存在的最小微生物。就这一点而言，庞大假单抱菌是可以接受的微生物，由于它是最小的细菌之一（直径0.3um）o假设适当的生长、采集和运用，它可以经过孔隙大于0.22um等级的过滤器。应战性实验中微生物的数目很重要，由于一个过滤器能够有假定干个大于标示等级的孔隙，这些孔隙可以使微生物经过〃卜这样经过的能够性随着待滤物料中微生物数目的添加而添加。可以接受的庞大假单抱菌挑试浓度为每平方厘米过滤器外表上不少于107,确保实践流入溶液的生物负荷不包括一定大小和（或）浓度的微生物，它们会降低滤液的无菌水平，这一点很重要。有内在杀菌力的药品溶液和油质药品溶液，不可用庞大假单胞菌做过滤器的应战性实验。在上述状况下，要运用粘度和其他物理性质十分接近实践产品，对微生物应战性实验无相反作用的挑试液。过滤器验证的应战性实验条件应模拟消费的其他方面以及流入液的生物负荷，例如，待过滤物料的pH和粘度、流速、压力、温度、物料与过滤器自身的顺应性和水力冲击作用都是消费的诸多方面，它们能影响过滤器的任务，在验证过滤顺序中应模拟这些要素。这些要素中许多与它们对过滤器截获微生物方法的作用有关，即筛子截留和（或）吸附。过滤器验证实验，包括微生物应战性实验不用在实践消费场地停止。但是，重要的是实验室应按上述讨论模拟实践消费条件。一些较复杂的过滤器验证实验超出了某些过滤器用户的才干。在上述状况下，由外部实验室或过滤器制造者停止实验是可以的。FDA以为取得有效的实验数据是过滤器用户的责任。这些数据必需适用于用户的产品和运用条件，由于对各种不同条件和产品，过滤器功用清楚不同。一类产品的性质和影响过滤器效能的顺序条件相似时，不用对该类产品逐一停止验证研讨。更确切地说，可将延伸法用于该类产品最具应战性实验特性的有关产品、产品性质的验证数据和工艺条件。这种延伸法的正确性应有书面证明。对一个特定的产品、工艺和过滤停止适当的过滤工艺验证后，重要的是确保消费中运用的相反过滤器配件（膜或滤筒）以相反的方式运转。到达这一目的的一种方法是将过滤器操作数据与过滤器完整性实验数据联络起来。正常状况下，过滤器完整性实验是在过滤器装配终了并且用前灭菌之后停止。但是更重要的是，这样的实验应在过滤器运用事先停止，这种运用的目的是检测过滤进程中会发作的一切过滤器渗漏或穿孔。''向前活动〃''泡点〃和''坚持压力〃实验都是可以接受的完整性实验方法。设备与灭菌药品或无菌容器/密封件外表相接触的设备外表当然也必需是无菌的。在无菌工艺中严厉验证用于设备外表的灭菌工艺和验证药品和容器/密封件的灭菌工艺同等重要。设备（如灌装设备、衔接收线和过滤器固定物）用高压釜蒸汽灭菌时，思索高压釜中确定的装载方式是很重要的，由于不同的结构方式会影响热量散布和灭菌效能（确保验证条件的重复性的一种方法是遵照已树立的装载结构图，该图是无菌工艺记载的一局部）。诸如大罐和固定管线等设备采用通加压蒸汽的方法在现场灭菌，验证时要思索各个不同位置的温度和压力以便找出没有足够热量到达灭菌目的的潜在''死角〃。例如，在管线系统中，一些在线过滤器致使一端发生清楚的压差，从而招致过滤器出口端温度清楚下降。确定这样的温度下降能否对灭菌规程发生不利影响的方法有在适宜的出口处放置生物指示剂。验证也应包括测定各个不同点的温度和压力。W.实验室控制要求211.160节（总的要求）在一定水平上要求树立正确的和适宜的规格规范、规范、取样方案以及为保证组件、药品容器、密封件、消费进程中的物料和药品契合适宜的质量规范而设计的实验规程。引言在无菌工艺中，最重要的实验室控制之一就是树立环境监测顺序。样品应从组件和产品暴露于环境的区域（诸如混料室和组件预备区）搜集。监测无菌工艺区的微生物质量以确定灌装/密封任务时能否坚持了无菌条件，这一点尤为重要。监测工艺应含环境（包括房间空气、空中、墙壁和设备外表）的惯例取样和实验。这样的工艺能证明设备以及产品接触外表洁净和卫生的有效性，并可以确定潜在的污染物能否能被控制到适当水平。确保消毒剂坚持对正常微生物群的效能很重要。书面的监测顺序应有迷信的取样时间表，包括取样地点和频次。此外，最高微生物限制和发现样品超越这一限制时采取举动的明白进程均应确定。监测环境的微生物质量有几种可以接受的方法。一种是运用主动空气取样器，如落盘法---装有暴露于环境中的营养琼脂的陪替氏培育皿。这些用具在定量监测中的价值有限，由于它们不能检测未落到琼脂外表的微生物。但是，假设在产品污染风险最大的关键区把落盘作为定性指示剂放在适当的位置，并且它们可以有效地俘获微生物，那么落盘是有价值的。当与其他型式的空气取样器的数据联络起来时，上述取样器的数据是有用的。评价空气微生物质量的另一可接受的方法是运用更,'自动〃的用具，诸如缝隙琼脂取样器、离心取样器和那些运用液体冲击和膜过滤的用具。虽然允许用一切这些用具经过检测单位体积空气取样的无机体数目来停止定量测试，但每一种用具都有它不利的方面。在无菌区运用这种用具是必要的，在消费中至少每天都要用。在多班消费的状况下，每班每日都要监测。环境监测应包括关键外表微生物质量的实验。停止这类实验通常用接触盘、棉花杆和凸盘。控制区的其他外表也要活期测试以说明洁净和卫生规程的适当水平以及检测人员招致的污染。环境监测顺序应包括对获取微生物的惯例鉴别。为了对环境微生物质量停止合理评价，鉴定应足以区分''正常菌〃和偶然污染物。虽然不用鉴别每个分别物的菌属和类别，但这些特征足以树立一个有效的数据库并足以证明洁净和卫生继续有效，这一点是重要的。确定分别物的特征足以确定无菌培育基灌装和产品无菌实验中发现的无机体的一种潜在的关系，这也很重要。在研讨灭菌失败的缘由时，这种关系有很高的价值。用于环境监测的微生物培育基不但要能检测细菌，而且要能检测霉菌和酵母菌，并应在适宜的时间和温度条件下培育。除监测空气的微生物质量外，还应监测微粒质量。关键区域在正常运用时期,至少每天做一次微粒监测，微粒检测装置应在接进任务区的空气中取样。应停止活期监测以反省微粒数目背叛正常水平的一切清楚变化，由固定地点测得的颗粒数目超量较多预示着出现了不正常状况，应停止调查并迅速矫正。IX.无菌检验要求211.167节（特殊检验要求）在一定水平上要求，每批灭菌药品均应有适当的实验室检验，以确定其无菌。引言无菌检验的某些方面尤为重要。这些方面包括控制实验环境、明确实验限制以及阳性结果的解释和复试。实验室环境检验与灌装/密割操作所运用的设备和控制应相似。无菌检验设备或控制较差或缺乏会使无菌检验失败的比例增高。假设消费设备和控制清楚好于无菌检验中所运用的，那么假设被检验产品实践上并非无菌，也会有把阳性无菌检验的结果归咎于不完善的实验室检验的风险，因此，无菌顺序中的一些效果就不能发现。普通说来，无菌检验的效能仅限检测低水平污染。例如，美国药典XXI和国度处方集刈表达的无菌检验规程的取样要求是：''一批产品假定有10%被污染,10次中就有9次能经过检验〃。这一有限的灵敏度使得有必要确保检验适宜数量的产品并且这些被检产品能均一地代表这一批产品以使一批产品经过。此外，思索到检验有限的灵敏度，一切阳性结果（在检验容器中观察到微生物生长）应做十分准确的评价。对灭菌检验阳性结果的评价应包括调查研讨，以在能够的范围内确定微生物的生长来自于产品污染还是实验室错误。虽然这种确定不相对牢靠，但取得这样或那样有压服力的证据通常是能够的。当有压服力的证听说明无实验室过失或失掉的数据无压服力时，公司能够在平安方面犯了错误，并且这些批产品应因不契合无菌要求而被拒收。调查研讨应思索到关于产品制造和样品检验的一切有关要素。就这一点而言，仅仅由于重复检验中没检测到微生物生长而将最后的阳性结果归咎于实验室过失是不适宜的。更确切地说，污染缘由的有压服力的证据至少应基于以下各点。.无菌检验中微生物鉴别（至少鉴别出属类）。假设这种微生物在实验环境中很少见，那么产品更能够污染。假设这种微生物在实验室和消费环境中都罕见,那么不应自动扫除产品的污染。无机体对灭菌方法的敏理性以及对产品中一切防腐剂的敏理性也有助于确定污染源。当无机体能对立灭菌方法或防腐剂时，应思索是内在产品污染。另一方面，当缺乏污染来源的相反证明时，在无机体没有对立力的状况下，污染源更能够是来自于实验室污染。.实验室记载的临时检验。仔细审查实验室数据的倾向可以有助于扫除或认定实验室为污染源。在FDA的阅历中，一个实验室在全部灭菌检验中初次阳性的无菌检验失败率低于0.5%是正常的。关于第一次检验而言，高于0.5%的失败率可以说明实验室或消费有效果，因此应停止调查研讨。假设初次阳性结果呈上升趋向，就应该着手调查研讨。上升趋向与片面调查研讨中的其他要素联络起来，可以证明一个疑心为污染缘由的要素。异样，假阳性结果上升趋向也应停止调查研讨，这种上升可以成为消费或实验室效果的先兆。为了更正确地监测潜在污染源，依据影响这些来源的特性区分这些倾向是很重要的。例如，可用产品、容器类型、灌装线和样品管理水平区分这些倾向。最后灭菌产品和无菌工艺产品的样品管理是相反的，无菌工艺产品的初次无菌检验失败率较高可视为消费效果。实验室环境的临时微生物监测可以提醒一些倾向，这些倾向可提供信息。实验室中微生物负荷上升的倾向应停止调查研讨并加以矫正。但是这样的倾向更预示着无菌检验失败是实验室过失形成的。.消费区环境监测。尤为重要的是在关键区域能生活的无机体的倾向剖析。上升倾向预示着无菌检验失败的缘由在于产品。思索环境微生物负荷不限于与有疑问的批产品有关的批、日或班的消费环境监测结果，这一点很重要。低水平的可生活无机物的结果能够会形成错觉，尤其是依据可以成为一种倾向的局部较高的生物负荷的数据分类时，因此，重要的是思索环境监测数据范围要宽。.产品灭菌前的生物负荷。产品生物负荷的倾向可以显示与无菌检验失败有关的效果。生物负荷上升倾向与无菌检验失败同时发作是产品污染的更有力的说明。.消费记载审查。应审查完整的批和消费控制记载以查出与产品无菌有关的失败或不正常的一切迹象，例如灌装线空气质量监测记载可以显示出有异常的高微粒计数的时间。.无菌复检。一种可以接受的复检包括运用供试品数量至少为原来瓶数的两倍，应能代表一批产品的各局部。复检未发现微生物生长与其他调查研讨相比不显得那么重要。但是，假设复检中发现微生物生长，该批产品应被拒收，除非一个新的彻底的研讨任务结论性地说明污染来自于取样或检验规程。在这样状况下，可停止第二次复检。第二次复检的样品量应是第一次复检的2倍。如第二次复检发现微生物生长，该批产品应被拒收并不允许进一步复检。生物产品的第一次无菌复检不要务实验瓶数为原来的2倍(21CFR,610.12节)。关键在于能否允许做第二次复检。散装的生物物料不允许停止第二次复检。X.参考资料FederalStandard209B,CleanRoomandWorkStationRequiiements,ControlledEnvironment,Apnl24,1973.TeclmicalOlder00-25-203,ContaminationControlofAe