小白鼠缺氧耐受性试验

小白鼠缺氧耐受性试验第一页，共三十页，2022年，8月28日相关知识复习缺氧的概念缺氧的分类及各类的缺氧机制第二页，共三十页，2022年，8月28日5.细胞内氧化代谢外呼吸内呼吸气体运输第三页，共三十页，2022年，8月28日①乏氧性②血液性③循环性④组织性缺氧类型供氧↓用氧↓第四页，共三十页，2022年，8月28日实验目的复制乏氧性、血液性和组织性缺氧动物模型，掌握缺氧的分类；观察不同类型缺氧时

呼吸、皮肤粘膜颜色的变化，了解解救措施；了解成年、新生小鼠对缺氧耐受性的差异，并分析机制。第五页，共三十页，2022年，8月28日实验动物成年小白鼠（7只）新生小白鼠（1只）单独放置第六页，共三十页，2022年，8月28日实验器材和药品缺氧瓶+软胶塞，CO中毒瓶+解救瓶、烧杯钠石灰，铁纱网，镊子，注射器，

氧气，CO，5％亚硝酸钠,1％美兰

0.1％氰化钾,10％硫代硫酸钠，生理盐水第七页，共三十页，2022年，8月28日实验步骤乏氧性缺氧一氧化碳中毒性缺氧亚硝酸钠中毒性缺氧氰化物中毒性缺氧动物尸检第八页，共三十页，2022年，8月28日成年小白鼠新生小白鼠步骤1观察正常状态,一般指标(呼吸频率,口唇颜色)步骤2缺氧瓶+钠石灰+成年鼠+铁网包裹乳鼠观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)、口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色1.乏氧性缺氧呼吸频率观察小白鼠腹部的起伏实验中尽量减少对小白鼠的刺激第九页，共三十页，2022年，8月28日2.CO中毒性缺氧小白鼠A(中毒)小白鼠B(中毒＋解救)步骤1观察正常状态，一般指标步骤2放入中毒瓶放入中毒＋解救瓶步骤3注入3mlCO注入3mlCO步骤4软瘫后立即输入O2观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)，口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色第十页，共三十页，2022年，8月28日3.NaNO2中毒性缺氧小白鼠A(中毒)小白鼠B(中毒＋解救)步骤1分别用烧杯罩住，观察正常状态及一般指标步骤2背部皮下注射0.3mlNaNO2背部皮下注射0.3mlNaNO2步骤3腹腔注射0.3ml生理盐水

腹腔注射0.3ml1％美兰

观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色防止美兰沾到身体、衣物及地面第十一页，共三十页，2022年，8月28日4.氰化物中毒性缺氧小白鼠A(中毒)小白鼠B(中毒＋解救)步骤1分别用烧杯罩住，观察正常状态一般指标步骤2背部皮下注射0.3mlKCN背部皮下注射0.3mlKCN步骤3腹腔注射0.4ml生理盐水腹腔注射0.4ml

Na2S2O3观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色防止KCN沾到身体、衣物及地面第十二页，共三十页，2022年，8月28日动物尸检观察对象实验1、2、3、4中的小鼠观察指标1皮肤颜色观察指标2肝脏颜色（剖腹）血液颜色第十三页，共三十页，2022年，8月28日实验结果缺氧类型缺氧前缺氧后存活时间肝脏颜色R(次/10秒)皮肤口唇颜色3’,6’,9’……乏氧性缺氧成幼CO中毒ABNaNO2中毒ABKCN中毒AB第十四页，共三十页，2022年，8月28日小鼠捕捉技巧右手抓鼠尾略向后拉左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后项背部皮毛无名指及小指夹住鼠尾左手翻转使鼠腹部朝上，头略朝下小白鼠的捉拿方法

第十五页，共三十页，2022年，8月28日三通管的使用第十六页，共三十页，2022年，8月28日腹腔注射鼠头朝下针头倾斜45度不要太靠近中线针头尖向下避开肝脏和膀胱图2小白鼠的腹腔注射

第十七页，共三十页，2022年，8月28日皮下注射第十八页，共三十页，2022年，8月28日实验结果缺氧类型缺氧前缺氧后存活时间肝脏颜色R(次/10秒)皮肤口唇颜色3’,6’,9’

……乏氧性缺氧成幼CO中毒ABNaNO2中毒ABKCN中毒AB第十九页，共三十页，2022年，8月28日一、乏氧性缺氧钠石灰有何作用？成鼠、幼鼠哪个存活时间长？为什么？小白鼠呼吸频率有何变化？为什么？小白鼠是否出现发绀？什么叫发绀?实验分析第二十页，共三十页，2022年，8月28日1.钠石灰=CaO+NaOH,吸收CO2,消除CO2对实验的影响2.成鼠、幼鼠哪个存活时间长？为什么？⑴幼鼠新陈代谢低，耗氧量少，相对成鼠需氧量少；⑵幼鼠呼吸中枢发育不完善，对缺氧不敏感；⑶幼鼠Hb含量高，相对不易缺氧；⑷幼鼠主要靠糖酵解供能，成鼠主要以有氧呼吸供能，故幼鼠需氧少。第二十一页，共三十页，2022年，8月28日呼吸频率变化先加快，后减慢，最后死亡PaO2呼吸中枢(+)，呼吸深快化学感受器(+)颈动脉体主动脉体呼吸中枢(-),呼吸减慢PaO24.乏氧性缺氧时，毛细血管中氧合Hb减少，脱氧Hb浓度增多超过5g/dL以上，可使皮肤与粘膜呈青紫色，称发绀。第二十二页，共三十页，2022年，8月28日二、CO中毒性缺氧CO中毒性缺氧属于哪种类型的缺氧?什么叫血液性缺氧?CO中毒性缺氧的发生机制是什么?樱桃红色是哪种物质的颜色?第二十三页，共三十页，2022年，8月28日失去携氧能力CO＋HbHbCO(樱桃红色)与1个血红素结合，其余对氧亲和力

↑

CO中毒机制抑制RBC糖酵解，2,3-DPG↓氧离曲线左移,亲和力↑,释氧↓亲和力高第二十四页，共三十页，2022年，8月28日三、NaNO2中毒性缺氧属于哪种类型的缺氧?发生机制是什么?注射美兰的小白鼠是否存活，为什么?4.咖啡色是哪种物质的颜色?第二十五页，共三十页，2022年，8月28日不能携氧其余Fe2+-O2亲和力↑

Hb-Fe3+-OH

氧化剂硝酸盐亚硝酸盐肠道细菌(棕褐色)高铁血红蛋白血症

Hb-Fe2+氧离曲线左移,释氧↓

还原剂第二十六页，共三十页，2022年，8月28日四、KCN中毒性缺氧1.属于哪种类型的缺氧？2.发生机制是什么?3.注射Na2S2O3的小白鼠是否存活？为什么？4.玫瑰红色是怎样产生的?第二十七页，共三十页，2022年，8月28日

KCN与氧化型细胞色素酶的三价铁结合为氰化高铁细胞色素氧化酶，使之不能还原成还原型细胞色素氧化酶，呼吸链中断，组织细胞不能利用氧。cytaa3Fe3+cytaa3Fe3+-CNCN-+氧化型氰化高铁细胞色素氧化酶cytaa3Fe2+还原型第二十八页，共三十页，2022年，8月28日3、存活机制：Na2S2O3与KCN生成无毒的硫氰酸钠，随尿液排出体外；4、小白鼠皮肤粘膜、肝脏呈玫瑰红色。因为组织利用氧障碍毛细血管中的HbO2