实验五影响酶活性的因素

实验五影响酶活性的因素第一页，共十页，2022年，8月28日酶的活性受环境pH的影响极为显著。通常，各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的活性。一种酶表现其活性最高时的pH值，称为该酶的最适pH。低于或高于最适pH时，酶的活性逐渐降低。唾液淀粉酶的最适pH值约为6.8。停止反应。当酶促反应速度达到最大值时的温度，称为酶作用的最适温度。唾液淀粉酶的最适温度为37℃。第二页，共十页，2022年，8月28日酶的活性常常受某些物质的影响，有些物质能使酶的活性增加，称为酶的激活剂；有些物质能使酶的活性降低，称为酶的抑制剂。Cl-是唾液淀粉酶的激活剂，而Cu2+为其抑制剂。本实验以唾液淀粉酶为例，此酶只能催化淀粉的水解，最终产物为麦芽糖和少量的葡萄糖

；淀粉水解程度不同，遇碘呈色反应不同。因此，可以通过呈色反应，了解淀粉水解的程度，从而间接判断唾液淀粉酶活力第三页，共十页，2022年，8月28日的大小。淀粉水解如下：淀粉紫色糊精红色糊精麦芽糖及少量葡萄糖蓝色紫色红色无色三、操作

1.稀释唾液的制备：先用自来水漱口以清洁口腔

，然后取20mL蒸馏水含于口中，并做咀嚼动作，2min后吐入小烧杯中，加倍稀释备用。附:pH5.0、6.8、8.0三种缓冲液的配制锥形瓶号pH值0.2mol/LNa2HPO4（mL）0.1mol/L柠檬酸（mL）15.010.309.7026.815.454.5538.019.450.55遇碘呈色第四页，共十页，2022年，8月28日项目试管编号123稀释唾液(mL)111pH6.8的缓冲液（mL）

222温度预处理5min(℃)

037100

0.2%淀粉溶液(mL)22（冷却后加淀粉液）2反应温度(℃)03737检查淀粉水解程度每隔1min,从2号管中取出1滴反应液置于白瓷板上，用碘液检查淀粉水解程度，直至反应液不再变色（为橙黄色）

，取出所有试管，冷却。碘液（滴）222摇匀观察结果并解释2．温度对酶活性的影响取3支试管编号，按下表操作第五页，共十页，2022年，8月28日项目试管编号123pH5.0的缓冲溶液(mL)2

—

—pH6.8的缓冲溶液(mL)

—2

—pH8.0的缓冲溶液(mL)

—

—20.2%淀粉溶液（mL）222稀释唾液（mL）111检查淀粉水解程度将上述各管溶液混匀后在37℃水浴中保温，然后每隔1min,从2号管中取出1滴反应液置于白瓷板上，用碘液检查淀粉水解程度，直至反应液不再变色（为橙黄色），取出所有试管，冷却。碘液（滴）222摇匀观察结果并解释3．pH值对酶活性的影响取3支试管编号，按下表操作。第六页，共十页，2022年，8月28日4．激活剂和抑制剂对酶活性的影响取3支试管编号，按下表操作。

项目试管编号123蒸馏水（mL）1

—

—0.9%NaCl溶液（mL）

—1

—1%CuSO4溶液（mL）

—

—10.1%淀粉溶液（mL）333稀释唾液（mL）111检查淀粉水解程度将上述各管溶液混匀后，在37℃水浴中保温，然后每隔1min,从2号管中取出1滴反应液置于白瓷板上，用碘液检查淀粉水解程度，直至反应液不再变色（为橙黄色）

，取出所有试管，冷却。碘液（滴）222摇匀观察结果并解释第七页，共十页，2022年，8月28日锥形瓶号pH值0.2mol/LNa2HPO4（mL）0.1mol/L柠檬酸（mL）15.010.309.7026.815.454.5538.019.450.55四、结果观察记录实验结果，并解释之。附:pH5.0、6.8、8.0三种缓冲液的配制第八页，共十页，2022年，8月28日试剂和器材1.试剂：（1）0.2%淀粉溶液（含0.3%氯化钠）称取0.2g淀粉溶于100mL0.3%氯化钠溶液中，煮沸2～3min。（2）碘液将碘化钾20g及碘10g溶于100mL水中，使用前稀释10倍。

（3）0.2mol/L磷酸氢二钠溶液

（4）0.1mol/L

柠檬酸溶液（5）0.1％淀粉溶液

(不含NaCl)

（6）0.9％氯化钠溶液

（7）1％硫酸铜溶液

第九页，共十页，2022年，8月28日2.器材：

(1)试管与试管架（2）恒温水浴锅（3）冰浴（4）沸水浴（5）吸管（6）烧杯（7）锥形瓶（8）滴管

（9）白瓷板等。附:pH5.0、6.8、8.0三