动物肝脏中DNA的提取及检测实验报告

动物肝脏中DNA的提取及检测试验报告动物肝脏中DNA的提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸，又称去氧核糖核酸，是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分，同时也是组成基因的材料。有时也被称为“遗传微粒”，缘由是在生殖过程中，父代会把它们自己DNA的一局部复制传递到子代中，从而完成性状的传播。DNADNADNA对紫外线有吸取作用，利用这一特性，可以对DNA进展含量测定。当核酸变性时，吸光度上升，称为增色效应；当变性核酸重复性时，吸光尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性，即DNA双链碱基间的DNA在细胞内，DNA46条染色体。染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复G1期-DNAS期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。对于真核生物，如动物、植物及真菌而言，染色体主要存在于细胞核内；而对于原核生物，如细菌而言，则主要存在于细胞质中的拟核内。染色体上的染色质蛋白，如组织蛋白，能够将DNA进展组织并压缩，以帮助DNA与其他蛋白质进展交互作用，进而调整基因的转录。脱氧核糖核酸的构造DNA的构造：DNA的构造一般可划分为一级构造、二级构造、三级构造和四级构造四个水平。DNA即腺嘌呤脱氧核苷酸、胸腺嘧啶脱氧核苷酸、胞嘧啶脱氧核苷酸、鸟嘌呤脱氧核苷酸。而脱氧核糖与磷酸分子借酯键相连，组成其长链骨架，排列在外侧，四种碱基排列在内侧。每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连，这些碱基沿着DNA的合成。读取密码的过程称为转录，是以DNA双链中的一条mRNADNA是很多脱氧核苷酸按肯定碱基挨次彼此用3’，5’DNA长链，也有的DNA为单链，如大肠杆菌噬菌体φX174、G4、M13DNADNA和链状DNADNADNA的5-甲基胞嘧啶特别丰富。在某些噬菌体中，5-羟甲基40年月后期，查加夫觉察不同物种DNA数等于其胸腺嘧啶数，鸟嘌呤数等于胞嘧啶数，因而嘌DNA的构造。浓盐法从动物组织中提取DNA核酸和蛋白质在生物体中常以核蛋白的形式存在，其中DNP能溶于水及高浓度盐溶液，但在M的盐溶液中溶解度很RNP则可溶于低盐溶液，因此可利用不同浓度的NaCl溶液将其从样品中分别抽提出来。将抽提得到的DNP用SDSDNA淀除去可得DNA上清，参加冷乙醇即可将其呈纤维状析出。肝脏细胞肝脏是肝细胞组成，肝细胞微小，肉眼看不到，必需通过显微镜才能看到。人肝约有25亿个肝细胞，5000个肝细胞组成一个肝小叶，因此人肝的肝小叶总数约有50肝细胞为多角形，直径约为20-30/加(微米)，有6-8个面，不同的生理条件下大小有差异，如饥饿时肝细胞体积变大。每个肝细胞外表可分为窦状隙面、肝细胞面和胆小管面三种。肝细胞里面含有许很多多简单的微小构造:如肝细胞核、肝细胞质、线粒体、内质网、溶酶体、高尔基氏体、微粒体及饮液泡等组成。二、试验目的1DNA三、试验原理核酸和蛋白质在生物体中常以核蛋白的形式存在，其中DNP能溶于水及高浓度盐溶液，但在M的盐溶液中溶解度很RNP则可溶于低盐溶液，因此可利用不同浓度的NaCl溶液将其从样品中分别抽提出来。将抽提得到的DNP用SDS处理可将其分别DNA和蛋白质，DNA醇即可将其呈纤维状析出。四、试验器材和材料试剂试验器材： ①匀浆器 ②量筒 ③离心机④离心管 ⑤试管 ⑥吸管 ⑦恒温水浴锅试验材料： ①猪肝试验试剂：①/L/L柠檬酸钠溶液②95%乙醇 ③NaCl固体④5%SDS溶液 ⑤V(氯仿)：V20：1的混合液五、试验操作称量①称取肯定质量的猪肝，参加2倍肝重的/L/L柠檬酸钠缓冲液并用匀浆器磨碎。提取DNA4ml于104000r/min10min，沉淀中再参加8ml4000r/min5min；②弃上清，取沉淀；10ml5ml氯仿-异戊醇混合液、1mlSDS30min；NaCl1mol/L；⑤将2104000r/min5min，取上清水相；95%乙醇，边加边用玻棒渐渐朝一个方向搅动，将缠绕在玻棒上的凝胶状物用DNA8mlDNA10ml③在粗提取DNA操作中，频繁地将DNA提取液转移至各个仪器内，可能有微小局部DNA提取液未倒净，残留在仪器壁上损耗掉，导致试验误差；④在使用移液枪的过程中，可能由于操作不当或移液枪DNA样液不准确，消灭试验误差；⑤在水相中参加乙醇析出DNADNA均析出，DNA⑥标准曲线制作过程中消灭些许误差；总的来讲，本次试验结果是相比照较成功的，较为粗略地测量出猪肝中DNA的含量，并且较为娴熟地把握了浓盐法从动物组织中提取DNA的原理与技术，根本到达了本次试验的目的。在今后的试验中会着重留意试验操作的严谨性，严格依据试验前拟定完全的试验步骤进展，保证将试验操作过程中可能消灭的误差概率降到最低，尽可能到达预期的试验效果，完成自我的学习及熬炼过程。动物肝脏中DNA的提取及检测一、前言脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸，又称去氧核糖核酸，是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分，同时也是组成基因的材料。有时也被称为“遗传微粒”，缘由是在生殖过程中，父代会把它们自己DNA的一局部复制传递到子代中，从而完成性状的传播。DNADNADNA对紫外线有吸取作用，利用这一特性，可以对DNA进展含量测定。当核酸变性时，吸光度上升，称为增色效应；当变性核酸重复性时，吸光尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性，即DNA双链碱基间的DNA在细胞内，DNA46条染色体。染色体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复G1期-DNAS期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。对于真核生物，如动物、植物及真菌而言，染色体主要存在于细胞核内；而对于原核生物，如细菌而言，则主要存在于细胞质中的拟核内。染色体上的染色质蛋白，如组织蛋白，能够将DNA进展组织并压缩，以帮助DNA与其他蛋白质进展交互作用，进而调整基因的转录。脱氧核糖核酸的构造DNA的构造：DNA的构造一般可划分为一级构造、二级构造、三级构造和四级构造四个水平。DNA即腺嘌呤脱氧核苷酸、胸腺嘧啶脱氧核苷酸、胞嘧啶脱氧核苷酸、鸟嘌呤脱氧核苷酸。而脱氧核糖与磷酸分子借酯键相连，组成其长链骨架，排列在外侧，四种碱基排列在内侧。每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连，这些碱基沿着DNA的合成。读取密码的过程称为转录，是以DNA双链中的一条mRNADNA是很多脱氧核苷酸按肯定碱基挨次彼此用3’，5’DNA长链，也有的DNA为单链，如大肠杆菌噬菌体φX174、G4、M13DNADNA和链状DNADNA中，5-甲基胞嘧啶可在肯定限度内取代胞嘧啶，其中小麦胚DNA的5-甲基胞嘧啶特别丰富。在某些噬菌体中，5-羟甲基40年月后期，查加夫觉察不同物种DNA数等于其胸腺嘧啶数，鸟嘌呤数等于胞嘧啶数，因而嘌DNA的构造。浓盐法从动物组织中提取DNA核酸和蛋白质在生物体中常以核蛋白的形式存在，其中DNP能溶于水及高浓度盐溶液，但在M的盐溶液中溶解度很RNP则可溶于低盐溶液，因此可利用不同浓度的NaCl溶液将其从样品中分别抽提出来。将抽提得到的DNP用SDSDNA淀除去可得DNA上清，参加冷乙醇即可将其呈纤维状析出。肝脏细胞肝脏是肝细胞组成，肝细胞微小，肉眼看不到，必需通过显微镜才能看到。人肝约有25亿个肝细胞，5000个肝细胞组成一个肝小叶，因此人肝的肝小叶总数约有50肝细胞为多角形，直径约为20-30/加(微米)，有6-8个面，不同的生理条件下大小有差异，如饥饿时肝细胞体积变大。每个肝细胞外表可分为窦状隙面、肝细胞面和胆小管面三种。肝细胞里面含有许很多多简单的微小构造:如肝细胞核、肝细胞质、线粒体、内质网、溶酶体、高尔基氏体、微粒体及饮液泡等组成。二、试验目的1.把握浓盐法从动物组织中提取DNA的原理与技术三、试验原理核酸和蛋白质在生物体中常以核蛋白的形式存在，其中DNP能溶于水及高浓度盐溶液，但在M的盐溶液中溶解度很RNP则可溶于低盐溶液，因此可利用不同浓度的NaCl溶液将其从样品中分别抽提出来。将抽提得到的DNP用SDS处理可将其分别DNA和蛋白质，DNA醇即可将其呈纤维状析出。四、试验器材和材料试剂试验器材： ①匀浆器 ②量筒 ③离心机④离心管 ⑤试管 ⑥吸管 ⑦恒温水浴锅试验材料： ①猪肝试验试剂：①/L/L柠檬酸钠溶液②95%乙醇 ③NaCl固体④5%SDS溶液 ⑤V(氯仿)：V20：1的混合液五、试验操作称量①称取肯定质量的猪肝，参加2倍肝重的/L/L柠檬酸钠缓冲液并