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文档简介

探究:培养液中酵母菌种群数量的变化目的要求1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化3、注意样方法的应用4、体会影响种群数量变化的因素一、实验原理1.在含糖的液体培养基(培养液)中酵母菌繁殖很快,迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群,通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。2.用液体培养基培养酵母菌,种群的增长受_________________、________、________、__________等因素的影响。3.在理想的无限环境中,酵母菌种群呈“J”型增长;自然界中_____________总是有限的,酵母菌种群呈“S”型增长。4.计算酵母菌数量可用抽样检测的方法——____________法。探究“培养液中酵母菌种群数量的变化”培养液的成分空间pH温度资源和空间显微计数基础知识点梳理怎样随时间SJ等量相同等量平均值增长二、实验研究方法思路三、实验流程1.酵母菌培养2.抽样检测①将500mL

注入锥形瓶②将0.1g

投入锥形瓶的培养液中混合均匀,并置于适宜的条件下培养质量分数为5%的葡萄糖溶液注入锥形瓶中活性干酵母①振荡酵母菌培养液,使

;②每天定时采用

方法抽取1mL酵母菌培养液酵母菌均匀分布抽样检测3.观察计数①将含有酵母菌的培养液滴在计数板上的

____,让培养液自行渗入计数,用滤纸吸去多余的培养液②待酵母菌细胞全部

,在显微镜下计数

内酵母菌的数量③估算1mL培养液中酵母菌总数盖玻片边缘沉降到计数室底部一个方格内4.重复(2)、(3)步骤:5.构建模型分析:将所得数据用曲线表示出来,得出酵母菌种群数量变化规律连续观察7天,统计数目四、酵母菌计数方法——显微计数法先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴在盖玻片边缘,让培养液渗入,吸去多余滤液。片刻后,待酵母菌全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台中央,计数一个方格内酵母菌数量,以此为据,估算酵母菌总数。五、表达和交流1.根据实验数据可得如图所示曲线。增长曲线的总趋势是先

。原因是在开始时培养液的营养物质充足、空间充裕、条件适宜,因此酵母菌大量繁殖,种群数量剧增;随着酵母菌数量的不断增多,营养物质消耗,pH变化等,生存条件恶化,酵母菌死亡率高于出生率,种群数量下降。2.影响酵母菌种群数量的因素可能有

、温度、

及_____________等。增加降低养分pH有害代谢废物归纳小结1.本探究实验应注意如下内容:(1)每天定时取样计数,用血球计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察7天,结果记录最好用记录表,如下:

(2)显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应遵循“计上不计下,计左不计右”的原则计数。(3)从试管中吸出培养液进行计数前,需将试管轻轻振荡几次,目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,减小误差。(4)每天计数酵母菌数量的时间要固定。(5)活酵母有出芽生殖现象,若芽体达到母细胞大小的一半时,即可作为两个菌体计数,若芽体小于母细胞一半时为1个酵母细胞。时间/天123456……数量/个……(6)溶液要进行定量稀释:如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当对培养液进行稀释以便于酵母菌的计数。具体方法是:摇匀试管,取1mL酵母菌培养液,加入成倍的无菌水稀释,稀释n倍后,再用血球计数板计数,所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4—5个酵母细胞为宜。(7)计算1mL菌液的数量时必须搞清如下等量关系:

1mL=1cm3=1000mm3(8)培养和记录过程要尊重事实,不能主观臆造。计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算,对每个样品可计数三次,再取其平均值。计数时应不时调节焦距,才能观察到不同深度的菌体。按公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。(9)血球计数板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用浸泡和冲洗的方法清洗。(10)本实验无对照实验,酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。2.血球计数板计数法注意事项:摇匀取样,适当稀释,适用于需借助显微镜计数的微生物。计数方法:血球计数板有两种方格网,对于16×25的方格网而言,计四角的4个中方格共计100个小方格中的个体数量;而对于25×16的方格网而言,计四角和正中间的(共5个)中方格共计80个小方格中的个体数量。如图所示。计算方法:大方格长度为1mm,高度为0.1mm(即规格为1mm×1mm×0.1mm),则每个大方格的体积为0.1mm3(10-4mL),故1mL培养液中细胞个数=(中方格中的细胞总数/中方格中小方格个数)×400×104×稀释倍数。计数室滴液处计数室1mm25个中格16个小格16个中格25个小格25X16=400小格16X25=400小格每个计数室(大方格)共有400小格,总容积为0.1mm3*********抽样检测:5×16=80个小格抽样检测:4×25=100个小格****#####希利格式:抽取4个样方,4个角的中方格。汤麦式:抽取5个样方,4个角和最中间的中方格;如何抽样?计算出4个样方的平均值,再乘以16(或者计算出5个样方的平均值,再乘以25),即可得到一个计数室的微生物数目。如何计数?(1)16×25型的计数板将计数室放大,可见它含16中格,每个中格有25个小格,抽样检测一般取四角:1、4、13、16四个中方格(100个小方格)计数。细胞数/ml=(100个小方格细胞数/100)×400×10000×稀释倍数

=A/4×16×104×B(2)25×16型的计数板中央大方格含25个中方格,每个中方格又分成16个小方格,供细胞计数用(见图三)。一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方格)的细胞数。细胞个数/ml=(80个小方格细胞数/

80)×400×10000×稀释倍数

=A/5×25×104×B

每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少?酵母细胞个数/mL=所数小方格中细胞总数x400x104x稀释倍数所数的小方格数假设:计数室内酵母菌为a个,稀释倍数为b,则10mL培养液中酵母菌总数为:

a×105×b例1:酵母菌的计数通常用血球计数板进行,血球计数板每个大方格容积为0.1mm3,由400个小方格组成。现对某一样液进行检测,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,先

____后再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有

个。2×108稀释解析:根据公式:5×400×10000×10=2×108

学以致用例2:检测员将1mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻

个/mL解析:酵母细胞个数/1mL=

80个小方格细胞总数/80×400×10000×稀释倍数=n/80×400×10000×10=5n×105

例3.某学生在“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中,根据实验结果绘制出如图所示的曲线。下列有关分析错误的是(

)A.实验过程中酵母菌种群的年龄组成先是增长型,后是稳定型,最后变为衰退型B.种群数量在不

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