环境中微生物检测方法

环境中微生物的检测们的踪迹。成为传染疾病的媒介。通过空气和水中微生物的检验，对环境质量进展掌握。土壤中的微生物土壤是微生物生活的良好环境在自然界，土壤是微生物生活的良好环境。由于土壤具有微生物生长生殖所必需的各种环境条件。养分源、氮源和能源；土壤中丰富的矿质元素可以满足微生物对矿质养分的要求。水分和渗透压物摄取养分。空气7%-8%。通气良好的土壤，氧的含量高些，有利于好氧微生物的生长。pH适应的微生物生长生殖。温度10～25℃，适宜多种微生物生长的需要。生物种类最多，数量最大，是人类利用微生物资源的主要来源。土壤微生物的种类、数量及其分布如有机物含量丰富的黑土、草甸土等肥沃土壤，微生物含量较高，每克土可含几亿至几十亿个微生物；而红壤、棕钙土、盐土等贫瘠土壤，微生物的含量很少，每克土也含几百万至几千万个微生物。微生物种类和数量之，藻类和原生动物等的数量较少。细菌异养型种类乐观参与土壤有机质的分解和腐殖质的合成。自养型种类转化着矿质养分的存在状态。胞菌、黄杆菌、钾细菌和铁细菌等。放线菌含量为每克土几千万至几亿个孢子。在偏碱性土壤中数量较多，都是异养80~100%时，放线菌很少消灭。土壤中常见种类有诺卡氏菌属、链霉菌属和小单孢菌属。真菌霉等。藻类1%，但分布却很普遍。一般生长在土壤表层，多为单细胞绿藻和硅藻。藻类为光合型微生物，受阳光及水分影响较大，土壤下层因无阳光，数量少。在温和季节中，积为土壤积存有机质。原生动物鞭毛虫、肉足虫等，大多数种类是异养型的，以吞食各种有机物的碎片、藻类、菌类等为生。性质，是构成土壤肥力的重要因素。微生物在土壤中的分布状况〔1〕水平分布微生物；在动植物残体较多的土壤中则有较多的氨化细菌和硝化细菌。〔2〕垂直分布土壤中微生物的垂直分布与紫外线的照耀、养分、水、温度、通气等环境因子有关。5～20cm加深，菌数削减，这是由于缺乏养分和氧气造成的。土壤微生物的分别和计数多承受稀释平皿法，操作步骤如下：取样10g壤稀释液，另一份土样烘干至恒重〔105℃，8h〕，置于枯燥器中冷却后称重。制备土壤稀释液90mL10g10min，制成土壤悬浮液，将土壤悬浮液作1010－～10110－3～1010－210－4为适宜浓度。混菌法接种释度须做平行。如只进展分别而不计数，对土壤悬浮液可不作系列稀释，承受划线分别法或涂布分别法即可。培育〔细菌在371d～2d、放线菌285d～7d〕。计数30～30010～100进展计数。如需猎取纯种，可取单个菌落进展试管斜面转接，培育后，选用适宜方法保存。计算每克干土含菌数每克干土含菌数＝每克湿土含菌数×湿土重/干土重物进入土壤后，先被土壤吸附，紧接着又被微生物及其他生物降解，使土壤渐渐恢复到原来的状态。水体中的微生物中的微生物，其中包括某些病原微生物。水中微生物的种类、分布差异很大。微生物的种类清水型水生微生物在干净的水域中，因养分物较少，微生物数量也较少。在每毫升水中一般只含几十个到几百个细菌，〔如丝状绿藻、硅藻等〕、真菌〔水霉菌属和绵霉菌属〕、原生动物〔如钟虫及其他固着型纤毛虫等〕和后生动物〔如枝角类、桡足类等〕。腐败型水生微生物在受到有机物严峻污染的水域中，数量较多的是细菌，每毫升水中可达几千万个甚至几亿个，以异养屋滴虫、小口钟虫等。微生物的分布深等。中的细菌多于水中的细菌。微生物在较深较大的静水水域中的垂直分布规律是：在上层水体中〔水面下0~10m深处〕，氧含量较高，主要有好氧细菌〔如假单脆菌、柄杆菌、球衣细菌等〕、真菌和藻类；中层水体〔水深20~30m〕主要有光合细菌〔如红硫细菌和绿硫细菌〕以及厌氧细菌；底层水体中〔30m〕，主要有脱硫弧菌5~10m地下水由于经过土壤过滤、有机物缺乏，故含菌量远远少于地面水，在深层地下水中甚至没有细菌。水的细菌学检测细菌总数〔CFU〕的测定〔1mL〕37℃培育24hmL37℃24h；明水被有机物或粪便污染越重，被病原菌污染的可能性也越大。可在生活饮用水进展卫生学评价时供给依据。我国生活饮用水标准〔GB5749-85〕100/ml。10～100/mL，为极清洁的水；100～1000/mL，为清洁的水；1000～/mL，为不清洁的水；大于100000/mL，为极不清洁的水。大肠菌群的测定病原菌存在的概率。芽孢杆菌。主要包括大肠埃希氏菌、产气杆菌、枸橼酸盐杆菌、副大肠杆菌。大肠埃希氏菌即大肠杆菌是人和温血动物肠道中的正常细菌，兼性好氧的革兰氏阴性、无芽孢、两头37℃pH乳糖等多种碳水化合物，并产酸产气。大肠菌群的各类细菌的生理习性都相像，只是副大肠杆菌不分解或〔品红亚硫酸钠培育基〕或伊红美蓝培育基外表会形成具有特别现象的菌呈淡红色，中心色深；副大肠杆菌的菌落则无色透亮。这些现象可作为鉴别的依据。和复发酵试验三个局部。初发酵试验发酵管内装有乳糖蛋白胨液体培育基，并倒置一小倒管。乳糖能起选择作用，由于很多细菌不能发酵pH示剂。细菌产酸后，培育基即由原来的紫色变为黄色，溴甲酚紫还能抑制其他细菌如有芽胞的细菌生长。水样接种于发酵管内，37℃下培育，24h中存在大肠菌群，为阳性结果。对于只产酸不产气的，不能说明是阴性结果，由于在菌量少的状况下，可不产酸又不产气的，为阴性结果。平板分别它可被培育基中的亚硫酸钠脱色，使培育基呈淡粉红色，大肠菌群发酵乳糖后产生的酸和乙醛马上与品红伊红美蓝琼脂培育基则含有伊红与美蓝染料，在此亦作为指示剂，大肠菌群发酵乳糖造成酸性环境时，该两种染料即结合成复合物，使大肠菌群产生与远藤氏培育基上相像的、带核心的、有金属光泽的深紫色菌落。3724h，挑取典型的大肠菌群菌落，进展革兰氏染色，镜验后假设呈阴性，则可认为有此类细菌存在。为了更进一步验证，可做下一步试验。复发酵试验24h酸又产气的，最终确定为大肠菌群阳性结果。依据发酵阳性管的数量，以确定大肠菌群数。利用数理统计原理，计算出每升水样中大肠菌群的最近似数〔MPN〕。44.5℃的方法将它们区分开。凡能在44.5℃生长并发酵乳糖产酸产气的，说明主要来自粪便，称之为“粪大37℃生长并发酵乳糖产酸产气者，则称之为“总大肠菌群”。的程度，并间接地说明肠道致病菌存在的可能性。很多不同用途的水都对细菌总数或大肠菌群数提出了要求。表1.1是我国用途不同的水质标准。1.1各种用途的水质标准标准名称及标准编号标准名称及标准编号工程标准值生活饮用水卫生标准细菌总数(个/mL)≤100GB5749-85 总大肠菌群(个/L)≤3生活饮用水源水质标准 总大肠菌群(个/L)CJ3020-93 二级≤10000GB3838-2023

Ⅰ≤200 Ⅱ≤2023Ⅲ≤10000Ⅳ≤20230Ⅴ≤40000GB/T14848-93

细菌总数(个/mL)Ⅰ～Ⅲ≤100 Ⅳ≤1000Ⅴ﹥1000总大肠菌群(个/L)Ⅰ～Ⅲ≤3 Ⅳ≤100 Ⅴ﹥100景观消遣用水水质标准总大肠菌群(个/L)A类≤10000GB12941-91GB5084-92渔业水质标准GB11107-89海水水质标准GB3097-1997

粪大肠菌群(个/L)≤10000≤5000总大肠菌群(个/L)≤500〔贝类养殖水质〕≤10000总大肠菌群(个/L)≤700〔贝类养殖水质〕注：GB国家强制标准，CJ城镇建设行业标准。空气中的微生物强的微生物则可以存活几天、几周甚至数月，最终沉降到土壤、水体、建筑物、动植物体外表。空气中微生物的来源、数量进入空气。1.11.1〔个/m3空气〕场所场所微生物场所微生物畜舍1000000~2023000700～1100宿舍20230试验室200城市街道5000市区公园200教室2500住房180办公室1400海洋上空1~2〔摘自王家玲.环境微生物学.北京：高等教育出版社.1988〕紫外线辐射的强弱以及微生物的适应性和对恶劣环境的抵抗力量。球菌、溶血链球菌、金黄色葡萄球菌、麻疹病毒、流感病毒和脊髓灰质病毒等。空气微生物的检验方法的安康，要掌