标准解读
《GB/T 35910-2018 猪圆环病毒2型阻断ELISA抗体检测方法》是一项国家标准，主要规定了用于检测猪血液中猪圆环病毒2型（PCV2）特异性抗体的方法。该标准采用的是酶联免疫吸附测定法中的阻断ELISA技术，这是一种基于抗原-抗体反应的免疫学检测手段，通过比较样本与阳性对照之间的信号差异来判断待测样品中是否存在针对PCV2的特异性抗体。
按照此标准执行时，首先需要准备一系列试剂和材料，包括但不限于：包被有PCV2重组Cap蛋白或其片段的微孔板、HRP标记的单克隆抗体、底物溶液等。实验流程大致分为以下几个步骤：
- 样品稀释；
- 将稀释后的样品加入到预包被好的微孔板中，并进行孵育；
- 清洗去除未结合物质后加入HRP标记的单克隆抗体继续孵育；
- 再次清洗并加入底物溶液显色；
- 终止反应后，在特定波长下测量吸光度值。
根据样品与阴性对照相比所显示出来的抑制率大小，可以判断出样品中是否含有能够识别PCV2 Cap蛋白的抗体。具体来说，如果某个样品使得标记抗体与固相抗原结合受到明显抑制，则表明该样品中含有PCV2特异性抗体；反之则认为无相关抗体存在或者浓度低于检测限。
该标准还详细列出了整个实验过程中需要注意的操作细节以及质量控制要求，确保结果准确可靠。此外，对于如何计算S/P比值（样本/阳性对照）、判定阈值设定等方面也给出了明确指导。通过遵循这些规范化的操作指南和技术参数，实验室可以在统一的标准框架下对猪群进行PCV2感染状态监测，为疾病防控提供科学依据。
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- 现行
- 正在执行有效
- 2018-02-06 颁布
- 2018-09-01 实施
文档简介
ICS11220
B41.
中华人民共和国国家标准
GB/T35910—2018
猪圆环病毒2型阻断ELISA
抗体检测方法
Blockingenzyme-linkedimmunosorbentassayfordetecting
theantibodytoporcinecircovirustype2
2018-02-06发布2018-09-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T35910—2018
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由中华人民共和国农业部提出
。
本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口
(SAC/TC181)。
本标准起草单位南京农业大学
:。
本标准起草人姜平王先炜白娟杨香林刘捷
:、、、、。
Ⅰ
GB/T35910—2018
猪圆环病毒2型阻断ELISA
抗体检测方法
1范围
本标准规定了猪圆环病毒型抗体阻断的检测方法
2ELISA。
本标准适用于猪圆环病毒病的抗体检测疫苗免疫抗体监测和血清流行病学调查
、。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
。,()。
实验室生物安全通用要求
GB19489
兽医诊断样品采集保存与运输技术规范
NY/T541、
检验检疫动物病原微生物实验活动生物安全要求细则
SN/T2984
3缩略语
下列缩略语适用于本文件
。
牛血清白蛋白
BSA:(Bovineserumalbumin)
酶联免疫吸附试验
ELISA:(Enzyme-linkedimmunosorbentassay)
辣根过氧化物酶
HRP:(Horseradishperoxidase)
猪圆环病毒型
PCV2:2(Porcinecircovirustype2)
四甲基联苯胺
TMB:(Tetramethylbenzidine)
4仪器材料与试剂
、
41试验仪器
.
411酶联免疫检测仪
..。
412高速台式冷冻离心机
..。
413微量移液器规格
..:0.5μL~10μL、20μL~200μL、100μL~1000μL。
414道可调微量移液器规格
..12:10μL~100μL。
42试验材料
.
421孔酶标反应板
..96。
422注射器
..(5mL)。
423微量离心管
..
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