标准解读

《GB/T 28073-2011 南芥菜花叶病毒检疫鉴定方法》是一项国家标准，主要针对南芥菜花叶病毒（Arabidopsis mosaic virus, ArMV）的检疫与鉴定过程进行了规范。该标准适用于对疑似携带或感染了南芥菜花叶病毒植物材料的检测与确认工作。根据此标准，可以有效地识别出受病毒感染的植株，从而采取相应措施防止其扩散。

在具体操作上，《GB/T 28073-2011》规定了从样品采集到最终结果分析的一系列步骤：

  • 样品采集：选择合适的植物组织作为检测样本，并按照要求进行处理和保存。
  • 提取RNA：采用适当的方法从植物材料中提取总RNA。
  • RT-PCR扩增：使用特定引物通过逆转录聚合酶链反应技术扩增目标序列。
  • 电泳检测：将扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳分离并观察特异性条带的存在与否。
  • 序列分析：对于阳性样本，进一步开展核酸序列测定以确认是否为南芥菜花叶病毒。

此外，标准还提供了关于实验室安全、质量控制等方面的具体指导原则，确保整个检测流程科学合理且可靠。通过遵循这些详细的操作指南，相关机构和个人能够更加准确地完成对南芥菜花叶病毒的检疫鉴定任务。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2011-12-30 颁布
  • 2012-06-01 实施
©正版授权
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文档简介

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T28073—2011

南芥菜花叶病毒检疫鉴定方法

Detectionandidentificationofarabismosaicvirus

2011-12-30发布2012-06-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T28073—2011

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位中华人民共和国厦门出入境检验检疫局中华人民共和国上海出入境检验检疫

:、

局中国检验检疫科学研究院中华人民共和国福建出入境检验检疫局

、、。

本标准主要起草人廖富荣于翠张永江陈红运林石明陈青黄蓬英沈建国吴媛

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28073—2011

南芥菜花叶病毒检疫鉴定方法

1范围

本标准规定了南芥菜花叶病毒血清学和分子生物学的检测鉴定方法

。

本标准适用于植物种子鳞球茎苗木和组培苗等植物及其产品中南芥菜花叶病毒的检测与鉴定

、、。

2南芥菜花叶病毒基本信息

中文名南芥菜花叶病毒

:。

英文名

:arabismosaicvirus。

异名啤酒花荨麻病病毒大

:arabismosaicnepovirus;hopnettleheadvirus();rhubarbmosaicvirus(

黄花叶病毒悬钩子黄矮病毒白腊树

);raspberryyellowdwarfvirus();ashringandlinepatternviurs(

环线状病毒大黄花叶病毒连翘黄网状病毒

);rhabarber-mosaik-virus();forsythiayellownetvirus();

茉莉黄斑病毒

jasmineyellowblotchvirus()。

英文缩写

:ArMV。

属豇豆花叶病毒科线虫传多面体病毒属Nepovirus

Comoviridae,。

南芥菜花叶病毒的其他信息参见附录

A。

3方法原理

利用基于抗原抗体反应的双抗夹心酶联免疫吸附测定反转录和体外扩增技

(DAS-ELISA)、DNA

术的反转录聚合酶链式反应进行检测鉴定

(RT-PCR)。

4主要仪器设备

本标准的检测鉴定方法主要使用以下仪器设备

:

微量榨汁机酶标仪洗板机微量天平感量仪荧光仪电泳仪水平电泳

、、、(:0.001g)、PCR、PCR、、

槽凝胶成像仪高速冷冻台式离心机水浴槽计等和各种量程的可调移液器

、、、、pH(1000μL、200μL、

100μL、20μL、10μL、2μL)。

5检测与鉴定

51DAS-ELISA检测

.

把样品充分研磨或在液氮中研磨按比例加入样品提取缓冲液转移到

0.5g~1.0g,1∶10,5mL

离心管中离心上清液作为的检测提取液

,8000r/min5min,DAS-ELISA。

设置阴性对照阳性对照和空白对照阴性对照的种类和材料如种子或叶片应该尽量与所检测

、,(:)

样品类型相一致具体操作过程见附录

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