实验性肾衰竭

实验性急性肾功能不全武汉大学基础医学院病生教研室

急性肾功能不全（AcuteRenalinsufficiency,ARI）

各种病因引起双侧肾脏在短期内泌尿功能急剧降低，导致机体内环境出现严重紊乱的病理生理过程。了解实验性肾功能不全动物模型复制方法观察升汞中毒家兔的一般状态，尿的变化、血浆尿素氮水平以及肾脏大体形态改变根据实验指标，分析讨论急性肾功能不全的病理生理变化实验目的实验动物及模型复制的原理原理肾毒物HgCl2

引起家兔肾小管变性、坏死，导致严重的肾脏功能不全。观察指标

临床变化对象手术操作指标GFR下降、尿量下降尿液膀胱插管尿量尿成分改变蛋白尿、血尿和管型氮质血症血液颈动脉插管血浆尿素氮水平肾脏形态改变肾脏兔尸体解剖肾脏色泽、体积、皮质条纹等与对照家兔做比较：实验步骤1.复制模型（已完成）实验组

HgCl2肌肉注射1.2ml/Kg24h

对照组

NaCl

肌肉注射1.2ml/Kg24h

(1)称重麻醉:腹腔注射20%乌拉坦，5ml/kg2.手术及操作剑突耻骨联合部位：左下腹近腹中线1cm方法：与腹壁呈45°进针，进入腹腔有落空感，回抽无血、肠内容物，缓慢推注效果判断：肌肉松弛，自然卧倒，眼睑反射迟钝，钳夹皮肤无反应等（2）固定备皮：固定：备皮：颈部正中：甲状软骨-胸骨上缘下腹正中：耻骨联合上1～5cm（3）膀胱插管收集尿液下腹部切口，分离组织，暴露膀胱注射器抽膀胱内尿3ml(备用)荷包缝合（膀胱无血管区）膀胱插管C左颈总动脉迷走神经颈内静脉胸骨舌骨肌胸锁乳突肌（4）左颈总动脉插管分离抗凝耳缘静脉肝素(1ml/kg)插管左颈总动脉插管3.远心端，45º剪口，约为管径的1/24.朝心脏方向插管2~3cm并固定颈总动脉1.结扎远心端12.夹闭近心端2近心端心脏远心端头部（5）尿液镜检，计录管型数和细胞数（10个视野）管型（低倍镜）细胞（高倍镜）（6）尿蛋白定性检查取尿液3ml于试管中酒精灯上加热至沸腾若混浊，加入5%醋酸3-5滴再煮沸尿变清，尿内有尿酸盐

混浊加重，尿中有蛋白

程度等级蛋白含量（g%）清晰－<0.01轻度白色浑浊＋0.01~0.05乳样浑浊＋＋0.05~0.2浑浊或少量碎片＋＋＋0.2~0.5絮状浑浊＋＋＋＋>0.5（6）尿蛋白定性检查（7）血浆尿素氮测定原理：血液中尿素在强酸条件下与二乙酰-肟和氨硫脲（DAM-TSC）共煮沸，生成红色复合物，颜色深浅与尿素氮含量成正比例关系，用分光光度计测定OD值，可计算出尿素氮含量。方法①每组自颈总动脉取血10ml到离心管,离心,3000rpm10min,吸出上层血浆置于干净试管中备用；②按下表加入试剂：试剂（ml）空白管标准管测定管(ABCD)血浆

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-0.02水0.50.10.5尿素氮标准液Ⅱ-0.4-DAM-TSC0.50.50.5酸混合液4.04.04.0③各管加好混匀后置沸水锅中煮沸10min，流水中冷却3min后测OD值（520nm波长）,先以空白管调零，再读取测定管值；④计算：测定管光密度(Du)标准管光密度(Ds)×0.002×1000.02=DuDs×10血浆尿素氮(mg%)=（8）形态学观察①将家兔处死（耳缘静脉注入空气5~10ml）,取出肾脏；②观察并比较两组家兔肾脏的大体形态，如体积大小，表面色泽，皮质条纹及色泽等。实验流程概括1.复制模型（已完成）(1)称重麻醉:腹腔注射20%乌拉坦，5ml/kg2.手术操作及检测指标(2)固定备皮：(3)膀胱插管收集尿液(4)左颈总动脉插管(5)尿液镜检，计录管型数和细胞数（10个视野）(6)尿蛋白定性检查(7)血浆尿素氮测定实验报告的书写实验目的实验步骤（简明扼要）实验结果实验项目

中毒家兔对照家兔