标准解读

《GB/T 27535-2011 猪流感HI抗体检测方法》是一项国家标准，规定了用于检测猪血清中猪流感病毒（Swine Influenza Virus, SIV）特异性血凝抑制（Hemagglutination Inhibition, HI）抗体的方法。该标准适用于实验室条件下对猪流感HI抗体水平的测定，对于评估疫苗效力、监测猪群免疫状态以及流行病学研究具有重要意义。

本标准详细描述了实验所需材料与试剂准备，包括但不限于特定类型的红细胞悬液、抗原制备方法等，并且明确了具体操作步骤，如血清样本处理方式、稀释比例设定及最终结果判定原则。其中，关键步骤之一是将待测血清按一定梯度稀释后，加入已知浓度的猪流感病毒抗原溶液中，随后再添加适量的鸡或豚鼠红细胞，通过观察是否发生凝集反应来判断是否存在能够阻止病毒引起红细胞凝集的特异性抗体及其效价高低。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2011-11-21 颁布
  • 2012-03-01 实施
©正版授权
GB/T 27535-2011猪流感HI抗体检测方法_第1页
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文档简介

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T27535—2011

猪流感HI抗体检测方法

Detectionmethodofhemagglutinationinhibitionantibody

againstswineinfluenza

2011-11-21发布2012-03-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

中华人民共和国

国家标准

猪流感HI抗体检测方法

GB/T27535—2011

*

中国标准出版社出版发行

北京市朝阳区和平里西街甲号

2(100013)

北京市西城区三里河北街号

16(100045)

网址

:

服务热线

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年月第一版

20121

*

书号

:155066·1-44052

版权专有侵权必究

GB/T27535—2011

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

:。

本标准主要起草人乔传玲杨焕良陈艳辛晓光陈化兰

:、、、、。

Ⅰ

GB/T27535—2011

猪流感HI抗体检测方法

1范围

本标准规定了猪流感病毒血凝和血凝抑制试验的技术要求

(HA)(HI)。

本标准适用于猪流感血清抗体的检测

HI。

2仪器

水浴箱冰箱等

、4℃。

3试验材料

单道及多道微量移液器吸头

、。

4试剂

41参见附录中

.0.01mol/LpH7.2PBS(AA.1)。

42胰酶溶液参见附录中

.(AA.2)。

43溶液参见附录中

.0.01mol/LKIO4(AA.3)。

44丙三醇盐水参见附录中

.1%(AA.4)。

45阿氏液参见附录中

.(Alsevers)(AA.5)。

46鸡红细胞悬液参见附录中

.0.5%(AA.6)。

47试验抗原和阴阳性血清参见附录中

.HI、(AA.7)。

5血凝HA试验

()

51用多道微量移液器在微量反应板的孔均加入换吸头

.1~120.05mLPBS,。

52吸取抗原加入第孔反复抽打次混匀

.0.05mL,1,3~5。

53从第孔吸取抗原加入第孔混匀后吸取加入第孔如此进行对倍稀释至

.10.05mL2,0.05mL3,

第孔从第孔吸取弃之换吸头第孔作为红细胞对照

11,110.025mL,。12。

54每孔均加入体积分数鸡红细胞悬液将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入

.0.05mL0.5%()()。

55轻轻混匀室温下静置后观察结果如果环境温度太高可置环境下

.,(20℃~25℃)20min(,4℃)。

对照孔红细胞显著呈钮扣状时判定结果

。

56结果判定将反应板倾斜观察红细胞若没有呈泪滴状流淌则判为阳性完全血凝不流

.:45°,,HA;(

淌的病毒最高稀释倍数代表个血凝单位

)1(HAU)。

6血凝抑制HI试验

()

61操作步骤

.

611血清样品的处理待检血清样品需经

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