标准解读
GB/T 18654.14-2008 是一项中国国家标准,专注于养殖鱼类种质检验领域,特别是关于DNA含量测定的方法与规范。该标准是GB/T 18654系列标准的一部分,专门针对鱼类种质质量控制中的一个重要指标——DNA含量进行规定,旨在为鱼类养殖业提供科学、统一的检测手段,保障种质资源的质量和遗传多样性。
标准适用范围
本标准适用于养殖鱼类,包括但不限于常见的食用鱼、观赏鱼等,其目的是通过标准化流程测定鱼类组织样本中的DNA含量,从而为种质评价、遗传改良、疾病诊断及品种鉴定等工作提供准确的数据支持。
主要内容概述
-
定义与术语:标准首先明确了有关DNA含量测定的基本概念和专业术语,确保所有使用者对检验内容有统一的理解基础。
-
采样要求:详细规定了样品采集的部位、方法、保存条件以及运输要求,以减少因采样不当导致的检测误差。
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样本前处理:说明了样本预处理的步骤,包括组织的匀浆、细胞裂解、DNA提取等关键环节的操作细节,以保证DNA的完整性和纯度。
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DNA含量测定方法:介绍了适用于鱼类DNA含量测定的具体技术,如荧光定量PCR、紫外分光光度法或流式细胞术等,并对每种方法的原理、操作步骤、所需仪器设备及试剂进行了详细描述。
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质量控制:强调了检测过程中的质量控制措施,包括空白对照、标准品校准、重复性与再现性实验等,确保检测结果的可靠性和准确性。
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数据处理与报告:规定了如何计算DNA含量、处理实验数据以及编制检测报告的格式和内容要求,便于信息的交流与比对。
-
安全与环保:提到了在DNA提取及测定过程中应遵循的安全操作规程和环境保护措施,以保护操作人员健康并减少环境污染。
实施意义
该标准的实施有助于提升我国鱼类养殖业的科学管理水平,通过标准化的DNA含量检测,可有效筛选出优良种质资源,促进鱼类品种的优化与创新,同时为鱼类疾病的早期预警和防控提供技术支持,进而推动整个行业的可持续发展。
如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。
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- 现行
- 正在执行有效
- 2008-06-27 颁布
- 2008-10-01 实施
文档简介
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犅50
中华人民共和国国家标准
犌犅/犜18654.14—2008
养殖鱼类种质检验
第14部分:犇犖犃含量的测定
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20080627发布20081001实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
发布
中国国家标准化管理委员会
书
犌犅/犜18654.14—2008
前言
GB/T18654《养殖鱼类种质检验》分为下列部分:
———第1部分:检验规则;
———第2部分:抽样方法;
———第3部分:性状测定;
———第4部分:年龄与生长的测定;
———第5部分:食性分析;
———第6部分:繁殖性能的测定;
———第7部分:生态特性分析;
———第8部分:耗氧率与临界窒息点的测定;
———第9部分:含肉率测定;
———第10部分:肌肉营养成分的测定;
———第11部分:肌肉中主要氨基酸含量的测定;
———第12部分:染色体组型分析;
———第13部分:同工酶电泳分析;
———第14部分:DNA含量的测定;
———第15部分:RAPD分析;
……
本部分为GB/T18654的第14部分。
本部分由中华人民共和国农业部提出。
本部分由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。
本部分起草单位:上海水产大学、中国水产科学研究院长江水产研究所。
本部分主要起草人:李思发、赵金良、徐忠法、蔡完其、邹曙明。
Ⅰ
书
犌犅/犜18654.14—2008
养殖鱼类种质检验
第14部分:犇犖犃含量的测定
1范围
GB/T18654的本部分规定了鱼类脱氧核糖核酸(DNA)含量测定的试剂与材料、仪器和设备、
抽样、分析步骤和结果判定。
本部分适用于常见淡水、海水养殖鱼类。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过GB/T18654的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文
件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成
协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本
部分。
GB/T18654.1—2002养殖鱼类种质检验第1部分:检验规则
GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分:抽样方法
3试剂与材料
除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。
3.1磷酸氢二钠(Na2HPO4)。
3.2二个结晶水的磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)。
3.3生理盐水:0.75%氯化钠(NaCl)溶液。
3.4固定液:3份甲醇加入1份冰乙酸,现配现用。
3.5肝素溶液:浓度为500IU/mL。
3.6胰酶:浓度为5mg/mL。
3.7核糖核酸酶(RNase):1mg/mL。
3.8碘化丙啶(PI):浓度为50μg/mL。
3.90.1mol/L磷酸缓冲液(PBS):Na2HPO412.35g、NaH2PO4·2H2O20.3g,蒸馏水定容至1L。
4仪器和设备
4.1离心机:转速为5000r/
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