植物组织培养期末复习题

某培养基的配方是MS+BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+2.5%蔗糖+0.7%琼脂粉。MS母液的浓度分别是大量元素20倍，微量500倍，铁盐100倍，有机物50倍；BA母液浓度1.0mg/mL,NAA母液浓度0.1mg/mL，要配置400mL该培养基，需要吸取各种母液各多少mL?分别称取蔗糖、琼脂多少克？大量元素：1000/20*1*0.4=20mL微量1000/500*1*0.4=0.8mL铁盐1000/100*1*0.4=4mL有机物1000/50*1*0.4=8mLBA2.0*0.4=1.0*VBAVBA=0.8mLNAA0.5*0.4=0.1*VNAAVNAA=2mL蔗糖2.5%*400=10g琼脂0.7%*400=2.8g简述MS培养基的基本特点无机盐浓度高，元素平衡较好，缓冲性能好，微量元素和有机成分含量齐全且较丰富简述外植体消毒的一般步骤1、先用清水冲洗，茸毛较多的外植体用皂液洗涤后再用清水冲洗，用吸水纸吸干表面水分；2、将外植体浸泡在0.1%-0.2%的氯化汞溶液中2-19min,或先在70%酒精中浸泡数秒，然后再10%次氯酸钙中浸泡10-20min,或先在70%酒精中浸泡数秒，再2%次氯酸钠溶液中浸泡15-30min进行灭菌；3、灭菌后倒掉灭菌液，无菌水冲洗外植体3-5次，置外植体于无菌滤纸上吸干表面水分，适当分割后接种植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，利用适当的培养基，使植物的离体器官、组织、细胞及原生质体生长和发育的所有培养技术的总称。细胞脱分化：离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程外植体：植物组织培养过程中使用的各种器官、组织和细胞人工种子：植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒体胚状体：在离体培养条件下，植物离体培养的细胞、组织、器官产生的类似胚的结构愈伤组织：外植体因受伤或在离体培养时，其未分化的细胞和已分化的细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织植物细胞全能性：植物体的每个生活细胞都具有该植物机体的全部遗传信息，具有发育完整个体的性能原球茎：是兰花种子萌发形成的一种形态学构造，是短缩的，呈珠粒状，类似嫩茎的器官再分化：离体培养的植物细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化，形成一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植株的过程10丛生芽：指外植体携带的顶芽或腋芽在适宜培养环境中不断发生腋芽而呈丛生状态11培养基：是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料培养基制作程序并画图表示确定培养基配放用量---称取蔗糖、琼脂---熬培养基---定容---PH调整---分装---封口---标识、记录---高压灭菌如何减轻植物组织中试管苗玻璃化现象1、两个增加：增加琼脂浓度，增加蔗糖含量2、连个增强：增强容器通风，增强光照3、连个加入：加入渗透剂，加入ABA4、一个减少：减少培养基氮素含量，特别是NH4-N试管苗繁殖的一般程序：初代培养-继代培养-生根培养-移栽驯化植物组培中影响器官分化的因素有哪些？IAA和CTK的比值和绝对含量对器官分化的影响IAA/CTK高:有利于形成根适中:维持原组织生长而不分化低:有利于形成芽试叙述植物脱毒的机理，常用的脱毒方式有哪些？1、病毒在植物体内的分布是不均匀的，在茎尖中呈梯形分布2、植物病毒自身不具有主动转移的能力，病毒的移动都是被动的3、在旺盛分裂的细胞中，代谢活性很高，使病毒无法进行复制4、在植物体内可能存在病毒钝化系统5、在茎尖中存在高水平内源生长素可抑制病毒的增值方法：1、物理方法2、化学方法3、生物化学方法4、综合脱毒法填空题脱毒苗的检测方法有：（直接测定法）（指示植物法）（血清鉴定法）（核酸分析法）（电镜鉴定法）培养基有（基本培养基）（完全培养基）外植体的选择原则（再生能力强）（遗传稳定性好）（外植体来源丰富）（外植体灭菌容易）植物离体培养细胞产生胚状体的过程即（植物胚胎发生）植物快速繁殖初代培养物形成有5种类型（段枝发生型）（丛生芽发生型）（不定芽发生型）（胚状体发生型）（原球茎发生型）造成组培过程中发生污染的原因有哪些？如何有效控制污染细菌污染原因：工具消毒不彻底，人呼吸引起，手接触材料或器皿控制措施：戴口罩，不讲话，用酒精棉球擦双手真菌污染原因：接种室空气污染，超净工作台运行不良所致控制措施：1、紫外灯照射接种室30min以上2、超净工作台提前20min开机3、培养瓶应拿成斜角，放在酒精灯火焰上方若以上三项措施无效，需对接种室进行熏蒸植物离体快速繁殖有哪些方面的应用1、良种的快速繁殖新育成的新引进的新发现的稀缺良种的快速繁殖2、少量脱毒良种苗的快速繁殖和无病毒苗的快速繁殖3、特殊育种材料的快速繁殖4、制种材料的快速繁殖5、基因工程植株的快速繁殖6、自然和人工诱变有用突变体的快速繁殖7、离体保存种质8、濒危植物的繁殖植物组织培养的基本特点：1整个过程都是在无菌条件下进行的在多数情况下是利用完全确定的人工培养基进行的，在组织培养中的植物材料不需依靠自身，光合作用提供养分材料可以是植物的器官，组织，也可以是单个细胞，他们都处于离体状态通过连续培养，可以不断增殖，形成克隆在封闭的容器中进行，组培苗叶片表面一般都无角质层或蜡质层，气孔始终张开环境湿度，光照强度和时间都是人为设定的应用：1植物离体快繁培育无病毒苗木培育新品种或创制新物种1）选育杂交品种2）离体选择突变体3）单倍体育种（花药培养）次生代谢物产生（天然有机化合物）植物种质自愿的离体保存人工种子用于基因工程组培过程中发生褐变现象的原因及防治方法原因：酚类在完整的细胞中单独存在，不与多酚氧化酶接触，较稳定，外植体切口受损