生物科学细胞生物学实验课

课程：细胞生物学实验授课老师：张金叶,龚慧明授课班级：11/12级生物科学授课时间：2013-2014年度上半学期学时：18学时考核：60%考试+40%实验报告课程要求实验室规则（服装整洁、秩序井然、前后清点、节约与赔偿、清洁卫生）实验报告（实验报告及时完成，有所思考）绘图要求（铅笔、清晰、突出典型特征、不抄绘、引线、注字及放大倍数）实验内容实验一普通显微镜及特殊显微镜的使用实验二

细胞膜的通透性观察实验三死活细胞的鉴别实验四人微量外周血淋巴细胞培养实验五

人染色体标本的制备实验六人染色体分带技术——G带实验目的实验原理试剂与器材实验步骤注意事项作业与思考实验一普通显微镜及特殊显微镜的使用一.实验目的了解生物显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和倒置显微镜的构造原理，并掌握其使用方法。熟悉光镜下细胞的基本形态与结构。掌握显微镜暗视野的简易制作。二.实验原理显微镜的工作原理成像原理照明原理主要性能参数显微镜成像原理显微镜的工作原理暗视野显微镜以丁达尔现象为原理。

特点：利用抛物型聚光器进行斜射照明显微镜的工作原理显微镜照明原理显微镜的工作原理临界照明科勒照明正置显微镜倒置显微镜倒置荧光显微镜三目暗视野显微镜倒置激光共聚焦显微镜显微镜主要性能参数分辨率（分辨力）指在25cm的明视距离处能区分开被检物体上两个相近质点间的最小距离。放大率与有效放大倍数放大率/放大倍数(M)=目镜放大倍数(Mob)×物镜放大倍数(Moc)有效放大倍数：物镜数值孔径的500-1000倍。清晰度

指显微镜形成轮廓明显的物象的能力。焦点深度

当显微镜对标本的某一点或平面聚焦时，焦点平面上下物象清晰的距离或深度。三.试剂与器材

材料：柿胞间连丝装片、动物细胞分裂装片和浮游生物等。试剂：香柏油、二甲苯等器材：生物显微镜、暗视野显微镜、倒置显微镜、荧光显微镜、载玻片、盖玻片等。四、实验内容普通生物显微镜的构造及使用方法。观察标本，熟悉细胞的一般形态结构。暗视野显微镜的简易制作及浮游生物的观察。三.实验步骤显微镜的构造及使用暗视野显微镜的制作及使用亮度调节开关镜筒目镜目镜镜臂物镜载物台物镜转换器聚光镜底座调焦器聚光镜升降轮显微镜的构造头部固定螺钉显微镜的使用柿细胞胞间连丝动物细胞有丝分裂过程注意事项任何旋钮转动有困难时，绝不能用力过大，而应查明原因，排除障碍。如果自己不能解决时，要向老师说明，帮助解决。保持显微镜的清洁，尽量避免灰尘落到镜头上；尽量避免试剂或溶液沾污或滴到显微镜上。显微镜用过后，应用清洁棉布轻轻擦拭；镜头有灰尘，必须用擦镜纸擦。每次实验结束，把显微镜以拿出时的样子放回到镜盒里（即转动物镜头，使之“八”字形向外；降低镜筒至底部）。制作暗视野纸片空隙大小适中才能取得较好的观察效果。注意根据动物细胞有丝分裂特征来辨别细胞分裂的各个时相。作业思考绘出你所观察到的柿胞间连丝、动物细胞有丝分裂及暗视野下浮游生物图片。为什么在观察动物细胞有丝分裂标本时，同一标本中会出现细胞分裂的不同时相？在制作暗视野时，应注意哪些关键环节？End，ThankS！实验二细胞膜的通透性观察实验目的实验原理试剂与仪器实验内容注意事项作业与思考一.实验目的观察细胞膜的通透性。了解溶血现象及其发生机制。掌握普通光学显微镜下细胞及细胞碎片的形态。细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障。溶血现象：将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液的现象。将红细胞放在某些等渗盐溶液中，由于红细胞膜对各种溶质的通透性不同，膜两侧的渗透压平衡会发生改变，也会发生溶血现象。因此，发生溶血现象所需时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。二.实验原理三.试剂和仪器材料：鸡血细胞器材：普通显微镜、试管、试管架、滴管、载玻片、盖玻片、擦镜纸、记号笔等。试剂：0.17mol/LNaCl、0.17mol/LNH4Cl、0.17mol/L醋酸铵、0.17mol/L硝酸铵、0.12mol/L草酸铵、0.12mol/LNaSO4溶液、0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、

0.32mol/L乙醇、0.32mol/L丙酮、蒸馏水。鸡红细胞悬液的制备。低渗溶血的观察。显微镜检查细胞的完整性。四.实验内容五.注意事项胶头滴管不可混用，以免造成溶液间的交叉污染。试管中有红细胞和测试溶液时，不应强力摇晃，以免造成人为的红细胞破裂。注意组实验过程的同步性，尤其滴加血液的操作要迅速。六.作业与思考记录各种溶液所发生的溶血现象及溶血时间。比较并分析各种溶液发生溶血现象的原理。为什么同一种溶液，有的同学会得出不同的结论？思考溶血实验在研究中应用的可能性。试管编号所加试剂是否溶血溶血时间结果分析End，ThankS！溶血实验在研究中的应用1.溶血空斑实验

溶血空斑实验是体外检测单个抗体形成细胞（B淋巴细胞）的一种方法，即将经绵羊红细胞（SRBC）免疫过的家兔淋巴结或小鼠脾脏制成细胞悬液，与一定量的SRBC结合，于37℃作用下，免疫活性淋巴细胞能释放出溶血素，在补体的参与下，使抗体形成细胞周围的SRBC溶解，从而在每一个抗体形成细胞周围，形成肉眼可见的溶血空斑。每个空斑表示一个抗体形成细胞，空斑大小表示抗体生成细胞产生抗体的多少。由于溶血空斑实验具有特异性高，筛选力强，可直接观察等优点，故可用做判定免疫功能的指标，观察免疫应答的动力学变化，并可进行抗体种类及亚类的研究。

2.有时在提红细胞膜蛋白时要用到，先用低渗溶液让红细胞胀破，高速离心收集、纯化膜蛋白。实验三死活细胞的鉴别实验目的实验原理

材料、试剂与器材

方法与步骤注意事项

作业与思考一实验目的学习并掌握死活细胞鉴别的原理及方法。二实验原理死活细胞的鉴别方法：质壁分离法

、染色法和仪器分析法染色法（化学染色和荧光染色）其原理是：许多酸性染料不容易穿过活细胞的质膜进入胞内，却能渗入死亡的细胞内，使其着色，以此来鉴别死活细胞。台盼蓝染色法、甲基蓝染色、伊红Y。微电极技术（利用死活细胞膜两侧电位的差异）、全自动分析细胞记数仪和流式细胞仪。仪器分析法中性红染色、美蓝染色、荧光素双醋酸酯染色、二丙酸脂荧光素染色、

Hoechst、碘化丙啶（PI）。其原理是：许多碱性染料能够渗入到活细胞内，由于活细胞的代谢作用而是其显色。死细胞染色活细胞染色死活细胞鉴定原理依据死活细胞在生理机能和性质上的差异不同。图1.血球计数板示意图A：血球计数板正面；B：血球计数板侧面1.血球计数板；2.盖玻片；3.计数室图2.血球计数板1mm25个中格：1mL培养液中细胞数=N/5x25x10000x稀释倍数16个中格：1mL培养液中细胞数=N/4x16x10000x稀释倍数材料：血细胞试剂：0.4％台盼蓝溶液（生理盐水配制）、PBS。器材：显微镜、载玻片、盖玻片、滴管等。三材料、试剂与器材四方法与步骤血细胞悬液的制备取一定量的新鲜血液加入20等份的PBS。染色制片取0.5ml细胞悬液放入干净试管中，加入1-2滴台盼蓝染液，混合，2min后制成临时装片，镜检。3.细胞存活率的计算

细胞存活率=（细胞总数-死细胞数）/细胞总数×100%五注意事项计数时应多选择几个视野，以多个视野内的平均值作为细胞的存活率。以台盼蓝排除法在显微镜下计数死活细胞数目需注意染色时间。六作业与思考计数死活细胞数，计算出细胞存活率。讨论细胞存活率在研究中的应用和意义。①中性红染色：常用染料之一，是细胞器的专有染料。利用细胞膜的通透性差异，用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。中性红无毒，常做活体染色的染料。②台盼蓝染色：当细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA结合，使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。严格来说，台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性，通常认为细胞膜丧失完整性，即可认为细胞已经死亡。通过显微镜很容易就能识别出死亡的被台盼蓝染色的细胞，并可使用细胞计数器进行计数。③美蓝染色法：美蓝是一种无毒性染料，它的氧化型是蓝色的，而还原型是无色的，用它来对活细胞进行染色，由于细胞中新陈代谢的作用，使细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型，所以活细胞无色，而对于死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此，用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态，还可以区分死、活细胞.④甲基蓝染色法：甲基蓝染色与台盼蓝类似的染色机理。每个血球计数板上有两个计数室（图1）。血球计数板上的符号和数字（图1）的含义是：XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板中计数室分25个中格；0.1mm为盖上盖玻片后计数室的高；1/400mm2表示计数室面积是1mm2（计数室边长1mm），分400个小格，每小格面积是1/400mm2（图2），9个大方格中只有中间的有小方格的中央大方格才是计数室。不要认为9个大方格都是计数室。

计数室通常也有两种规格：一种是16x25型，即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格（图2）；另一种是25x16型，即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16x25=25x16=400个小方格组成。

计数时，若计数室是由16个中方格组成，数左上、左下、右上、右下的4个中方格（即100个小方格）的菌数。如果是由25个中方格组成的计数室，除数上述4个中方格外，还需数中央1个中方格（即80个小格方）的菌数（图3）。计数时对压在中格四条线上的细胞只计数相邻两边及其夹角上的细胞（一般选左边和上边的线）。

死活细胞的鉴定在生物学和医学上具有很重要的意义。细胞培养过程中要随时记录细胞的生长情况，需要经常测定细胞的存活率；在肿瘤细胞的研究中，为了检验各种药物对肿瘤细胞的杀伤力，也需要测定肿瘤细胞的存活率。在临床医学中死活细胞的鉴定也有很大的应用，例如为了检测某一男子的生育能力，测定精子细胞的存活力是比较常用的办法。实验四人微量外周血淋巴细胞培养实验目的实验原理

试剂与器材

操作方法

注意事项

作业与思考一实验目的掌握无菌培养技术。熟悉人外周血淋巴细胞培养过程。并掌握人外周血淋巴细胞培养培养方法。二实验原理在活体情况下，进入外周血的小淋巴细胞不能进行增殖，存活一定时间即死亡。在人工培养条件下，培养基中的PHA有刺激小淋巴细胞转化并进行分裂的能力，此时如加入秋水仙素，可使许多细胞停滞于分裂中期。采用常规制片技术，即可获得大量含染色体的标本。三试剂与器材

材料：人指血。试剂：RPMI-1640培养基、胎牛血清、肝素、PHA、

双抗、PBS，2µg/ml的秋水仙素、酒精等。器材：超净工作台、恒温培养箱、注射器、烧杯、

量筒、细胞培养瓶、酒精灯等。四实验内容采样接种

在无菌条件下，用采血针刺破无名指，采血4~5滴，接种至培养瓶，塞紧瓶塞后轻摇均匀，尽量避免与瓶盖接触。采血后，用胶布密封瓶口并作好标记。四、实验内容培养将标记好的培养瓶置37℃培养箱中培养72小时，每隔12小时左右轻遥1次，以促进细胞生长增殖。四实验内容加秋水仙素终止培养前6小时以注射器向培养瓶中加入秋水仙素3-4滴，使其终浓度为0.01-0.02µg/ml，振荡混匀后于培养箱中继续培养6小时。五注意事项严格注意采血过程的无菌操作。采血时，采血针不可混用。采血后，各自的培养瓶应做好标记。六作业与思考简述人外周血淋巴细胞的培养过程。肝素和PHA在人外周血淋巴细胞培养中的作用是什么？影响人外周血淋巴细胞培养的主要因素有哪些？如何控制？End，ThankS！RPMI1640

培养基中由多种氨基酸、维生素、生物素、无机盐等按不同比例配置而成，再加入酚红作指示剂是细胞体外培养的必要营养素。10.4gRPMI1640干粉溶于900ml三蒸水中，磁力搅拌2h，充分溶解，用NaHCO3调pH=7.2，然后定容至1000ml，无菌室内抽滤灭菌、分装，4℃保存，长时间存放英防御-20℃.抗凝剂抗凝剂常采用肝素，肝素钠。肝素：一种多糖，能阻止白细胞和淋巴细胞与红细胞集结在一起而影响培养的质量，但肝素浓度过大会导致溶血。一般剂量是100单位肝素液可抗凝5ml外周血液。肝素钠为粉剂，每毫克130单位。植物凝集素：PHA

从豆子中提取出来的，其化学成分为糖蛋白，具有刺激淋巴细胞进行有丝分裂的作用。用量不足影响分裂细胞的数量；用量过高则使培养的外周血凝集而影响淋巴细胞生长。秋水仙素

是从地中海的一种名叫秋水仙的鳞茎中提取的一种植物碱，他的作用是：

（1）抑制细胞纺锤死的形成，使细胞分裂停止在中期，从而起到积累大量中期细胞的作用。

（2）是染色体单体缩短分开，呈现明显的外形。秋水仙素的使用浓度范围比较宽，可差几十倍之多，一般终浓度为1.2-1.5微克/毫升。处理4-6小时。秋水仙素作用时间越长，被阻止的中期细胞越多，但染色体也会收缩，收缩过度会影响形态。

实验五人染色体标本的制备实验目的实验原理

试剂与器材

操作方法

注意事项

作业与思考一实验目的了解染色体制备原理。掌握染色体制备方法。二实验原理被秋水仙素处理后停滞于中期的大量分裂细胞，用低渗液处理使样品中的红细胞膜破裂，并使分裂细胞和转化的淋巴母细胞膨胀，结合离心技术，即可去掉红细胞碎片。再用固定液使已膨胀的分裂细胞和转化的淋巴细胞膜破裂，随着分裂细胞膜破裂，染色体被释放出来，并且将其形态固定下来，然后制片即可得到满意的染色体标本。三试剂与器材材料

终止培养前6小时加入秋水仙素的人外周血淋巴细胞。试剂

低渗液（0.075%KCl溶液）、

固定液（甲醇：冰醋酸=3：1，现用现配）等。器材

离心机、离心管、倒置显微镜、水浴锅、天平、酒精灯、载玻片和盖玻片等。四操作方法收集细胞取出培养瓶，上下颠倒均匀，将细胞移至离心管内，1000r/min离心8min收集细胞，弃上清。低渗处理

加入已经预热的低渗液6-8ml，吹打成细胞悬液，37℃水浴中低渗20min。固定

①预固定；②固定；③再固定。制片

预冷的玻片，立即吹干。染色1:10Giemsa染液染色10min，流水冲洗，晾干。镜检，拍照。五注意事项从培养箱中取培养瓶时，注意观察培养液颜色，根据颜色变化判断细胞有无污染。用吸管吸弃上清液时，勿用力过猛导致部分细胞丢失。固定液需现用现配。载玻片需干净且保持湿冷状态。六作业与思考简述人外周血淋巴细胞染色体标本制备的过程。秋水仙素处理、低渗和固定处理在染色体标本制备过程中的作用是什么？固定液为什么要现用现配？End，ThankS！低渗溶液：0.075MKCl低渗溶液使细胞膨胀，便于染色体分散而易于观察和计数。（1）染色体轮廓较清楚。（2）染色性增强，可缩短染色时间。（3）用于G带技术更能显示其优越性。固定液

稳定染色体的形态结构，清除染色体外层物质对染色体在玻片上展开的影响，通过更换固定液2-3次，清除红细胞的碎片，使标本片的背景更为清晰，广泛使用的固定液为Carnoy固定液，即甲醇与冰醋酸3:1混合液。淋巴细胞转化试验表明培养物生长发育良好，但制成的标本质量不佳时，其原因为：秋水仙素处理不当：一般秋水仙素溶液的浓度与处理时间有一定关系，若处理时间太短，则标本中分裂细胞就少，相反，虽然标本中的分裂细胞虽多，若处理时间太长，染色体缩得太短，以致形态特征模糊，不容易观察。低渗处理不当：低渗处理细胞时间过长，细胞膜旺旺过早破裂，以致分裂细胞或染色体丢失；若处理时间不足，细胞膨胀不够，则染色体分散不佳，难以进行染色体计数分析。离心速度不合适：若从培养瓶收集细胞后进行离心时的速度太低，细胞可能被丢失；如果细胞被低渗后离心速度过高，旺旺使分裂细胞过早破裂，分散良好的分裂相丢失，以致制出的标本分裂相较少或大部分为剩余的分散不好的分裂相。标本固定不充分：若固定液不新鲜，甲醇、冰醋酸的质量不佳，此时染色体形态模糊、不分散，其周围有细胞浆的蓝色背景。载玻片清洗不彻底：玻片有油迹，致使滴在在玻片上的细胞悬液不能均匀分散，且细胞随液体流动而丢失。载玻片冷冻不够：合适的冰湿玻片，从低温中拿出时，其表面有一层霜雪。如冷冻不够则无此现象，此时细胞难以贴附在在玻片上。实验六人染色体分带技术—G带实验目的实验原理试剂与器材操作方法注意事项作业与思考一实验目的

掌握制备G带染色体方法。了解G带染色体在细胞遗传学分析中的重要意义。二实验原理染色体显带技术

将染色体标本经过一定程序处理，并用特定染料染色，使染色体沿其长轴显现明暗或深浅相间的横行带文，这些横行带纹为染色体带。如果染色体上某一区域的DNA为重复序列，转录活性低，相应地包装它们的蛋白质也较稳定，可能通过较强的二硫键形成很稳定的疏水的a-螺旋结构，成为染料沉淀物积累的环境，从而显示出阳带(暗带)。反之，如果染色体上某一区域的DNA富含具转录活性的结构基因，则功能上相对活跃，包装它们的蛋白质也较疏松，构象上类似b-折叠结构，经处理后二硫键断裂，还原为巯基，成为亲水性蛋白，不利于染料沉淀物的积累，所以着色浅，显示阴带(明带)。Giemsa染料是噻嗪-曙红燃料，着色之一取决于染色体原位形成噻嗪-曙红沉积物，两个噻嗪分子和DNA结合，在此基础之上再结合1个曙红分子；其次取决于一个疏水环境，以利于燃料沉淀而着色。G带显带在用Gimsa染色以前，要用胰蛋白酶进行预处理，将染色体阴性G带区的疏水蛋白除去或使它们的构型变为更为亲水状态，以利于着色。G带区含有较丰富的A-T对，在间期核呈固缩状态，是DNA晚复制区之一。Giemsa燃料在G带区与DNA结合，而且与结合DNA的染色质非组蛋白有关。其特性是显带方法简单恒定，带型稳定，保存时间长。二实验原理三试剂与器材材料

人染色体标本。试剂GKN液、胰蛋白酶液、Gimsa染液、香柏油等。器材

恒温培养箱、恒温水浴箱、显微镜、染色缸、量筒、烧杯等。四实验内容置70℃烤箱中处理2小时，然后转入37℃培养箱中备用，一般在第3-7天进行显带。将染色体标本投入胰酶液中，以15s、30s、1min、1.5min、2min不同时间进行预试片，选择最佳时间。（随着片龄的增长、时间也随之增长）。在GKN液内漂洗30s。Gimsa染液中染色8-10min，流水冲洗。镜检。质量较好的染色体标本可用二甲苯透明，D.P.X(中性树脂)封片。男性G显带(10××100×)女性G显带(10××100×)人类23对染色体的G显带记忆口诀一秃二蛇三蝶飘，四像鞭炮五黑腰；六号像个小白脸，七盖八下九苗条；十号长臂近带好，十一低来十二高；十三、四、五、四二一；十六长臂缢痕大；十七长臂带脚镣，十八白头肚子饱；十九中间一点腰，二十头重脚飘飘；二十一好像黑葫芦瓢，二十二头上一点黑；X染色一担挑，Y染色长臂带黑脚。五注意事项胰蛋白酶处理时间不宜过长。观察染色体标本时，应先用低倍镜再用高倍镜、油镜观察染色体长轴上明暗和宽度不同的横纹即带。油镜观察后应立即将镜头清理干净。六作业与思考正常人染色体核型分析。正常人染色体的数目及结构特点。染色体核型分析在临床疾病诊断中的作用。End，ThankS！A组：1-3号染色体。1号染色体。短臂：近侧段有2条深带，第2深带稍宽，在处理较好的标本上，远侧段可显出3～4条淡染的深带。此臂分为3个区，近侧的第1深带为lp21；第2深带为1p31。长臂：副缢痕紧贴着丝粒，染色浓。其远侧为一宽的浅带，近中段与远侧段各有两条深带，此中段第2深带染色较浓，中段两条深带稍靠近，此臂分为4个区，副缢痕远侧的浅带为lp21号带、中段第2深带为lp31号带，远侧段第1深带为lp41号带。2号染色体。短臂：可见4条深带，中段的2条深带稍靠近，此臂分为2个区，中段两条深带之间的浅带为2p21。长臂：可见7条深带，第3和第4深带有时融合。此臂分为3个区，第2和第3深带之间的浅带为2p21带，第4和第5深带之间的浅带为2p31号带。3号染色体。在长臂与短臂的近中段各具有1条明显的宽的浅带。短臂：一般在近侧段可见1条较宽的深带，远侧段可见2条深带，其中远侧1条较窄，且着色淡，这是区别3号染色体短臂的显著特征。在处理较好的标本上，近侧段的深带可分为2条深带，此臂分2个区，中段浅带为2区1带。长臂：一般在近侧段和远侧段各有1条较宽的深带，在处理好的标本上，近侧段的深带可分为2条深带，远侧段的深带可分为3条深带，此臂分为2个区，中段浅带为2区1带。该染色体的G带图有点象蝴蝶结。B组：4-5号染色体。4号染色体短臂：可见2条深带，近侧深带染色较浅，短臂只有1个区。长臂：可见均匀分布的4条深带，在处理较好的标本上，远侧段的2条深带可各自分为2条较宽的深带。此臂分为3区，近侧段第1和第2深带之间的浅带为2区1带，远侧段两条深带之间的浅带为3区1带。5号染色体短臂：可见2条深带，其远侧的深带宽且着色浓，此臂仅1个区。长臂：近侧段2条深带，染色较淡，有时不明显，中段可见3条深带，染色较浓，有时融合成1条宽的深带，远侧段可见2条深带，近末端的1条着色较浓，此臂分为3个区，中段第2深带为2区l带，中段深带与远侧深带之间的宽阔的浅带为3区1带。C组：6-12号和X染色体6号染色体短臂：中段有1条明显宽阔的浅带，形如“小白脸”，是此染色体的特征，近侧段和远侧段各有1条深带，近侧深带贴着丝粒。在处理较好的标本上，远侧段的深带可分为两条深带。此臂分为2个区，中段的明显而宽的浅带为2区1带。长臂：可见5条深带，近侧1条紧贴着丝粒，远侧末端的1条深带着色较淡；此臂分为2个区，第2和第3深带之间的浅带为2区1带。7号染色体着丝粒着色浓。短臂：有3条深带，中段深带着色较淡，有时不明显，远测深带着色浓，形似“瓶塞”。此臂分为2个区，远侧段的深带为2区1带。长臂：有3条明显深带，远侧近末端的1条着色较淡；第2和第3带稍接近。此臂分为3个区，近侧第1深带为2区1带、中段的第2深带为3区1带。8号染色体。短臂：有2条深带，中段有1条较明显的浅带，这是与10号染色体相鉴别的主要特征。此臂分为2个区，中段的浅带为2区1带。长臂：可见3条分界极不明显的深带，此臂分2个区，中段的深带为2区1带。9号染色体着丝粒着色浓。短臂：近侧段和中段各有1条深带，在处理较好的标本上，中段可见2条较窄的深带。此臂分为2个区，中段深带为2区1带。长臂：可见明显的2条深带，次缢痕一般不着色，在有些标本上呈现出特有的颈部区。此臂分为3个区，近侧的1条深带为2区1带，远侧的1条深带为3区1带。10号染色体着丝粒着丝浓。短臂：近侧段和近中段各有1条深带，在有些标本上近中段可见2条深带，但与8号染色体短臂比较，其上深带的分界欠清晰。此臂只有1个区。长臂：可见明显的3条深带，远侧段的2条深带稍靠近，这是与8号染色体相鉴别的一个主要特征，此臂分为2个区，近侧段的1条深带为2区1带。11号染色体短臂：近中段可见1条深带，在处理较好的标本上，这条深带可分为3条较窄的深带。此臂只有1个区。长臂：近侧有1条深带，紧贴着丝粒。远侧段可见1条明显的较宽的深带，这条深带与近侧的深带之间是1条宽阔的浅带，这是与12号染色体相鉴别的一个明显的特征，在处理较好的标本上，远侧段的这条较宽的深带可分为2条较窄的浅带，两深带之间有1条很窄的浅带，一般极难辨认，但它是分区的一个界标，在有些标本上近末端处可见1条窄的淡染的深带。此臂分2个区，上述远侧两条深带之间的那条很窄的淡带为2区1带。12号染色体短臂：中段可见1条深带，此臂只有1个区。长臂：近侧有1条深带，紧贴着丝粒，中段有1条宽的深带，这条深带与近侧深带之间有1条明显的浅带，但与11号染色体比较这条浅带较窄，这是鉴别11号与12号染色体的一个主要特征。在处理较好的标本上，中段这条较宽的深带可分为3条深带。其正中一条着色较浓，在有些标本上，远侧段还可以看到l～2条染色较淡的深带。此臂分为2个区，中段正中的深带为2区1带。X染色体其长度介于7号和8号染色体之间，主要特点是长臂和短臂中段各有1条深带，有“一担挑”之名。短臂：中段有一明显的深带，宛如竹节状。在有些标本上远侧段还可以看见1条窄的着色淡的深带，此臂分为2个区，中段的深带为2区1带。长臂：看见3～4条深带，近中部1条最明显，此臂分为2个区，近中段的深带为2区1带。D组：13-15号染色体，具有近端着丝粒和随体。13号染色体着丝粒区深染。长臂：可见4条深带，第1和第4深带较窄，染色较淡；第2和第3深带较宽，染色较浓。此臂分为3个区，第2深带为2区1带，第3深带为3区1带。14号染色体着丝粒区深染。长臂：近侧和远侧各有1条较明显的深带。在处理较好的标本上，中段尚看见1条着色较浅的深带。此臂分为3个区，近侧深带为2区1带，远侧深带为3区1带。15号染色体着丝粒区深染。长臂：中段有一条明显深带；染色较浓，有的标本上近侧段可见l～2条淡染的深带。此臂分为2个区，中段深带为2区1带。E组：16-18号染色体16号染色体短臂：中段有1条深带，在较好的标本上看见2条深带，此臂只有1个区。长臂：近侧段和远侧段各有1条深带。有时远侧段1条不明显，次缢痕着色浓；此臂分2个区，中段深带为2区1带。17号染色体短臂：有1条深带，紧贴着丝粒，此臂只有1个区。长臂：远侧段看见1条深带，这条深带与着丝粒之间为一明显而宽的浅带，此臂分为2个区，这条明显而宽的浅带为2区1带。18号染色体短臂：一般为浅带，此臂只有1个区。长臂：近侧和远侧各有1条明显的深带，此臂分为2个区，两深带之间的浅带为2区1带。19号染色体着丝粒及其周围为深带，其余为浅带。短臂和长臂均只有1个区。20号染色体着丝粒区浓染。短臂有一条明显的深带，此臂只有1个区。长臂：中段和远侧段看见1～2条染色较淡的深带，有时全为浅带。此臂只有1个区。此染色体有“头重脚轻”之名。G组：21-22号染色体和Y染色体，21、22号有随体。21号染色体着丝粒区着色淡。其长度比22号短，其长臂上有明