标准解读
《GB/T 15400-1994 饲料中色氨酸测定方法 分光光度法》是中国国家标准之一,发布于1994年,旨在规定一种通过分光光度法来测定饲料中色氨酸含量的标准化方法。下面是对该标准内容的详细说明:
标准适用范围
本标准适用于各类配合饲料、单一饲料原料及预混料中色氨酸的定量分析。色氨酸是一种必需氨基酸,对动物营养至关重要。
测定原理
分光光度法基于物质吸收光谱的特性进行定量分析。在本方法中,样品经过一系列预处理后,色氨酸会与特定试剂反应生成有色化合物。该有色化合物在特定波长下的吸光度与其浓度成正比,通过测量吸光度即可计算出样品中色氨酸的含量。
试验步骤
- 样品准备:取适量饲料样品,按照标准规定的程序进行粉碎、称重,并用适当溶剂提取色氨酸。
- 净化与富集:提取液通过过滤、脱脂、柱层析等步骤去除干扰物质,富集色氨酸。
- 显色反应:将纯化后的溶液与特定显色剂(如茚三酮)反应,在一定条件下生成具有特定吸收特性的有色产物。
- 测定吸光度:使用分光光度计,在特定波长(通常为570纳米)下测定显色溶液的吸光度。
- 标准曲线制作:事先制备一系列已知浓度的色氨酸标准溶液,同样进行显色反应并测定吸光度,绘制标准曲线。
- 结果计算:根据待测样品的吸光度和标准曲线,计算出样品中色氨酸的浓度。
精密度与准确度
标准中明确了重复性和再现性实验的要求,确保不同实验室和操作者之间的测试结果具有一致性。同时,提供了回收率试验的方法,以验证测定方法的准确性。
仪器与试剂要求
详细列出了执行该测定方法所需的分光光度计、玻璃器皿、试剂种类及其规格,确保实验条件的统一性和结果的可靠性。
安全与环保注意事项
虽然具体安全措施未在此概述中详述,但实施实验时应遵循常规实验室安全规程,注意化学品的正确使用与处置,确保人员安全和环境保护。
如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。
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文档简介
UDC636.085.3中华人民共和国国家标准GB/T15400-94饲料中色氨酸测定方法分光光度法1DeterminationoftryptophaninfeedstuffsSpectrophotometry1994-12-30发布1995-07-01实施家技术监督局压发布
中华人民共和国国家标准饲料中色氨酸测定方法GB/T15400-94-分光光度法一Determinationortryptophaninfeedstufrs-Spectrophotometry主主题内客与适用范围本标准规定了测定饲料中色氮酸的原理和方法。本标准适用于配合饲料、混合间料、旅缩饲料和单一何料。2引用标准GB6433饲料粗脂肪测定方法原理何料中蛋白质经藏水解后,降解成多肤和游离的氮基酸,在酸性介质中,氧化剂存在下,色氮酸吲哚环与对二甲氮基苯甲醛反应生成蓝色化合物,在一定范围内颜色深浅与色氮酸含量成正比。试剂除注明者外均为分析纯。水为燕水。4.1硫酸(GB625)溶液、c(1/2H.SO,)=21.2mol/L量取589mL碗酸徐徐加入约350mL水中,冷却后用水稀释至1L.4.221%对二甲氮基苯甲醛溶液:1.0g对二甲氮基莱甲醛溶于21.2mol/L硫酸(4.1)中并定容100mL.4.330.2%亚硝酸钠(GB633)溶液(m/V)。AA10%氢氧化钾(GB2306)溶液(m/V)4.5L-色氮酸,色谱纯.4.6L-色氨酸标准溶液:准确称取25.0mgL-色氨酸于小烧杯中,加少量0.1mol/L氢氧化钾溶液使之溶解,定量地转移到250mL棕色容量瓶中,用水定容,浓度为100件g/mL。注:本标准语液4℃冰箱中保存,一个月内使用,衣度不变。5仪器、设备5.1分析天平:感量0.1mg.5-2分光光度计。53离心机:转速4000r/min。5.
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