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文档简介
备战2023高考微专题31DNA粗提取与鉴定(2022山东高考T13)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法错误的是()A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
B.离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
C.在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
D.粗提取的DNA中可能含有蛋白质【解答】解:A、过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行可以使酶的活性降低,可以防止DNA降解,A正确;B、离心研磨液是为了加速细胞膜、细胞器、一些较大杂质等的沉淀,B错误;C、在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色,C正确;D、粗提取的DNA中可能含有蛋白质,D正确。B【高考再现】(1)DNA的溶解性①DNA在NaCl溶液中溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离的目的。DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线②DNA在酒精中的溶解性DNA不溶于酒精(特别是95%的冷酒精),但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理可以将DNA与蛋白质进一步分离。0.14mol/LNaCl浓度01.提取原理(2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
能水解蛋白质,但对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受___________的高温,而DNA在______以上才会变性。洗涤剂能瓦解_______,但对DNA没有影响。蛋白酶60~80℃80℃细胞膜4.DNA鉴定的方法在__________的条件下,DNA遇二苯胺反应呈现_______。注意:二苯胺试需要_____________。沸水浴蓝色现配现用能用甲基绿吗?1、实验材料选择猪肝菜花(花椰菜)香蕉鸡血哺乳动物的红细胞猕猴桃洋葱豌豆菠菜在培养基中培养的大肠杆菌选择原则:原则上,凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是,选用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。××38条染色体78条染色体58条染色体16条染色体14条染色体12条染色体33条染色体18条染色体02.实验设计案例.鸡血细胞的DNA粗提取与鉴定①制备鸡血细胞液思考:加入柠檬酸钠的作用是什么?防止血液凝固②破碎细胞,释放核物质思考:A是什么试剂,作用是什么?A试剂蒸馏水,使细胞吸水胀破,释放核物质。③溶解核内DNA,析出DNA思考:B和C是什么试剂,作用是什么?B是2mol/L的NaCl溶液,溶解核物质中的DNA。C是蒸馏水,降低NaCl的浓度,从而降低DNA的溶解度,使DNA析出。C试剂B试剂D试剂是什么,其作用是什么?④再次溶解并析出DNAD试剂95%的冷酒精,DNA不溶于酒精,使DNA析出,同时除去能溶于酒精中杂质。析出DNA⑤DNA的鉴定沸水浴①原理②如何设置对照?对照组:一定量的2mol/L的NaCl溶液实验组:等量的2mol/L的NaCl+DNA溶液③预期实验结果对照组无颜色变化,实验组出现蓝色。DNA+二苯胺蓝色鸡血细胞DNA粗提取的过程总结鸡血细胞DNA粗提取的过程总结溶解到2mol/L的NaCl溶液中,二苯胺沸水浴检测为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?(去除滤液中的杂质)(进一步提纯)
用高浓度的盐溶液溶解DNA,能除去不能溶解在其中的杂质;用低浓度的盐溶液和酒精使DNA析出,能除去溶解在其中的杂质。因此,通过反复溶解于析出DNA,就能够除去DNA中的杂质。①制备鸡血细胞液②破碎细胞,释放核物质③溶解核内DNA,析出DNA④再次溶解并析出DNA⑤DNA的鉴定03.总结分析(1)两次加入蒸馏水次数目的第一次使鸡血细胞吸水涨破第二次稀释NaCl溶液,使DNA逐渐析出03.总结分析(去除滤液中的杂质)(进一步提纯)①制备鸡血细胞液②破碎细胞,释放核物质③溶解核内DNA,析出DNA④再次溶解并析出DNA⑤DNA的鉴定此实验过程中有几次使用蒸馏水?几次析出DNA?几次用到NaCl溶液?两次使用蒸馏水两次析出DNA三次用到NaCl溶液03.总结分析(2)两次析出DNA次数方法第一次加蒸馏水,降低NaCl的浓度,从而降低DNA的溶解度,使DNA析出。第二次加95%的冷酒精,DNA不溶于酒精,使DNA析出。03.总结分析(3)三次使用NaCI溶液次数目的第一次溶解DNA,析出蛋白质等杂质第二次使DNA再溶解,为了获得含杂质较少的DNA第三次溶解DNA,以便DNA与二苯胺反应,用于DNA的鉴定。03.总结分析A
下列利用菜花进行“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()A.采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除部分杂质B.在切碎的菜花中加入一定量的洗涤剂和食盐,在充分研磨、过滤后弃去滤液C.用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L,用单层滤纸过滤取析出物D.将白色丝状物溶解在NaCl溶液中,加入二苯胺试剂后振荡,观察颜色变化【思维提升练习】B
某同学用洋葱进行”DNA粗提取和鉴定实验”,操作错误的是()A.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAB.加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨C
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