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文档简介
凝血四项检查APTT【检验原理】37APTT试剂,即以脑磷脂作为血小板的替代物参加贫血小板血浆中,在Ca2+的参与下,使纤维蛋白原转变为纤维蛋白凝块,测定凝固所需要的时间,即APTT。【样本制备】采血与抗凝:采血后马上与抗凝剂充分混合,血液与抗凝剂〔0.109mmol/L枸橼酸钠〕9:1。离心:抗凝血以2500xg离心10待测血浆。保存:血浆样本应马上测试。22~24℃条件下保存,应2小时内测定,2~43小时内测定。【检验方法】仪器预热:开机,依据仪器使用说明书预热,到达要求稳定温度,进入正常工作状态。试剂配制:严格依据标示量参加蒸馏水复溶试剂,将直立在18~25℃中静置3037℃预温槽。正常质控血浆制备:依据质控血浆试剂盒使用说明书。测定:以半自动高性能血凝仪为例:①将测试杯置于预温槽中,用加珠器在每个测试杯中放一粒钢珠。②试剂放相应位置,37℃预温,需混匀放搅拌子。100l〔患畜或者质控血浆〕参加测试杯,再将APTT试剂100l参加测试杯,混匀,启动预温时间计时,37℃,5分钟,将测试杯从预温槽移至测试槽。④使用联动加样器参加氯化钙100l,仪器自动启动计时器开头计时并自动打印结果。【正常值参考范围】围。【检验结果解释】APTT延长见于FⅧ、FⅨ、FⅪ血浆水平减低。APTT缩短见于高凝状态、血栓性疾病。口服避孕药会影响检测结果。PT【检验原理】在待检血浆中参加过量的组织凝血活酶和钙离子,使凝血酶原转变为凝血酶,凝血酶使纤维蛋白原转变为纤维蛋白凝块,测定凝固所需要的时间,即为待测血浆的凝血酶原时间〔PT〕。PT与血浆中的外源性凝血因子含量呈负相关。【样本制备】采血与抗凝:采血后马上与抗凝剂充分混合,血液与抗凝剂〔0.109mmol/L枸橼酸钠〕比例为9:1EDTA、肝素不适于作抗凝剂。2500xg10分钟。保存:血浆样本应马上测试。22~24℃条件下保存,应2小时内测定,2~4℃条件下保存,应3小时内测定。如不能60分钟内分别血浆。【检验方法】仪器预热:开机,依据仪器使用说明书预热,进入正常工作状态。试剂配制:严格依据标示量参加蒸馏水复溶试剂,将试剂瓶直立在室温中静置30分钟,使用前轻轻旋转至完全溶解,勿猛烈振摇。正常质控血浆制备:依据质控血浆试剂盒使用说明书。测定:以半自动高性能血凝仪为例:①将测试杯置于预温槽中,用加珠器在每个测试杯中放一粒钢珠。②试剂放相应位置,37C预温,混匀需放搅拌子。100l〔患畜或者质控血浆〕参加测试杯。分钟,将测试杯从预温槽中移至测试槽中。⑤使用联动加样器参加试剂100l,仪器自动启动计时器开头计时进展测试。记录结果。【正常值参考范围】犬:5.0~15.0秒,建议各试验室建立自己的正常值参考范围。质量掌握程序:试验室应建立质量掌握程序,使用质控血浆测定。FIB【检验原理】在待检稀释血浆中参加高浓度的凝血酶,使纤维蛋白原转变为纤维蛋白凝块,测定凝固所需要的时间,在以参比血浆制作的标准曲线上查得待测血浆的纤维蛋白原浓度,即为待测血浆的纤维蛋白原〔FIB〕含量。【样本制备】采血与抗凝:采血后马上与抗凝剂充分混合,血液与抗凝剂〔0.109mmol/L枸橼酸钠〕9:1。2500xg10分钟。1:5比例稀释血浆。保存:血浆样本应马上测试。22~24℃条件下保存,应2小时内测定,2~43小时内测定。【检验方法】仪器预热:开机,依据仪器使用说明书预热,进入正常工作状态。试剂配制:严格依据标示量参加蒸馏水复溶试剂,并放室温静置30分钟,使用前轻轻旋转至完全溶解,勿猛烈振摇。定标血浆制备:以蒸馏水复溶血浆,参加量标识在上。正常质控血浆制备:依据质控血浆试剂盒使用说明书。FIB标准曲线制备:以半自动血凝仪为例:①按下表稀释标准血浆〔FIB2.57g/L〕:标准血比例咪唑缓冲液〔l〕总体积FIB浓〔l〕〔g/L〕1:51004005005.141:10504505002.571721:20305706001.281:40207808000.64②每份稀释血浆宜重复测试4次〔至少测定2次〕,求秒数均值。③进入FIB标定菜单,选录入,将不同稀释度血浆凝固时间FIB浓度输入仪器。④选计算,按2次确认,标准曲线输入完成并打印。则检测g/L。更换试剂批号时应重做标准曲线。测定:以半自动高性能血凝仪为例:①将测试杯置于预温槽中,用加珠器在测试杯中放一粒钢珠。②将5倍稀释血浆100l〔患畜或者质控血浆参加测试杯,37C3分钟,将测试杯移至测试槽。100l,启动计时器,仪器记录时间并自动打印结果。【正常值参考范围】秒。建议各试验室建立自己的正常值参考范围。TT【检验原理】在待检血浆中参加标定的凝血酶,使纤维蛋白原转变为纤维蛋白凝块,测定凝固所需要的时间,即为待测血浆的凝血酶时间〔TT〕。【样本制备】采血与抗凝:采血后马上与抗凝剂充分混合,血液与抗凝剂〔0.109mmol/L枸橼酸钠〕9:1。2500xg10分钟。保存:血浆样本应马上测试。22~24℃条件下保存,应2小时内测定,2~43小时内测定。【检验方法】仪器预热:开机,依据仪器使用说明书预热,到达要求稳定温度,进入正常工作状态。试剂配制:严格依据标示量参加蒸馏水复溶试剂,将试剂瓶直立在室温中静置30分钟,使用前轻轻旋转至完全溶解,勿猛烈振摇。正常质控血浆制备:依据质控血浆试剂盒使用说明书。测定:以半自动高性能血凝仪为例:①将测试杯置于预温槽中,用加珠器在每个测试杯中放一粒钢珠。②将待测血浆100l〔患畜或者质控血浆〕参加测试
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