天然药物化学糖苷

天然药物化学糖苷第一页，共一百一十六页，2022年，8月28日本章基本内容

一、概述二、结构类型三、糖苷分类四、糖和苷的物理性质五、糖的化学性质六、苷键的裂解七、糖的提取分离八、糖的鉴定和糖链结构的测定第二页，共一百一十六页，2022年，8月28日一、概述

糖类又称碳水化合物（carbohydrates），是植物光合作用的初生产物，是一类丰富的天然产物，如：蔗糖、粮食(淀粉)、棉布的棉纤维等。糖类在天然药物治疗疾病中，可以看作是药效学物质基础的运载体。

过去被认为是无效成分，现代医药学证明其中一些具有营养、强壮作用如：人参、灵芝、构杞子等都含有大量的糖类（多糖）糖类、核酸、蛋白质、脂质——生命活动所必需的四大类化合物。

化学结构：多羟基内半缩醛(酮)及其缩聚物。根据其分子水解反应的情况，可以分为单糖、低聚糖和多糖。第三页，共一百一十六页，2022年，8月28日一、概述单糖：不能水解的最简单的多羟基内半缩醛(酮)。

如葡萄糖等。低聚糖：水解后生成2~9个单糖分子的糖。

如：蔗糖（D-葡萄糖-D果糖）、麦芽糖（葡萄糖1→4葡萄糖）、环糊精（6~8个葡萄糖1→4环状结合，其中6、7、8聚体分别称为α、β、γ-环糊精）多糖：水解后能生成多个单分子的，称为多糖。

如植物多糖：淀粉、纤维素、树胶、粘液质等动物多糖：糖原、甲壳素、肝素、硫酸软骨素、透明质酸如黄芪多糖的免疫促进功能；香菇多糖的肿瘤抑制功能及其衍生物抗HIV活性；夏枯草多糖抑制HIV的复制等。

第四页，共一百一十六页，2022年，8月28日二、结构类型㈠糖的表示式

单糖是多羟基醛或酮。从三碳糖至八碳糖天然界都有存在。以Fischer式表示如下：第五页，共一百一十六页，2022年，8月28日糖处游离状态时用Fischer式表示苷化后成环用Haworth式表示二、结构类型单糖在水溶液中形成半缩醛环状结构，即成呋喃糖和吡喃糖。具有六元环结构的糖——吡喃糖（pyranose）具有五元环结构的糖——呋喃糖（furanose）

第六页，共一百一十六页，2022年，8月28日1515二、结构类型㈡Fischer与Haworth的转换及其相对构型Fischer式：（C1与C5的相对构型）

C1-OH与原C5（六碳糖）或C4（五碳糖）-OH，顺式为α，反式为β。Haworth式：

C1-OH与C5（或C4）上取代基之间的关系：同侧为β，异侧为α。如下图所示：第七页，共一百一十六页，2022年，8月28日二、结构类型反式顺式αβ第八页，共一百一十六页，2022年，8月28日二、结构类型㈢糖的绝对构型（D、L）

以α-OH甘油醛为标准，将单糖分子的编号最大的不对称碳原子的构型与甘油醛作比较而命名分子构型的方法。

第九页，共一百一十六页，2022年，8月28日二、结构类型Fischer式中最后第二个碳原子上-OH向右的为D型，向左的为L型。Haworth式中C5向上为D型，向下为L型。

第十页，共一百一十六页，2022年，8月28日戊醛糖和已酮糖的绝对构型判断：吡喃型Haworth式，由于原构型标准（C4-OH和C5-OH）不参与成环，故可直接根据它们的位置判断构型。二、结构类型第十一页，共一百一十六页，2022年，8月28日

习惯上将D型糖中C1-OH处环上者为型，环下者为型。在L型糖中相反。D-木糖（D-xylose）D-果糖（D-fructose）45二、结构类型即：戊醛糖的C4或已酮糖的C5-OH处于环上者为L构型；环下者为D构型。第十二页，共一百一十六页，2022年，8月28日

同样，将D型糖中C1-OH处环上者为型，环下者为型。在L型糖中相反。RD-呋喃半乳糖二、结构类型

已醛糖由Fischer转成呋喃型的Haworth，由于C5-C6部分成为环外侧链，判断构型时仍以C5为标准，C5-R者为D型糖；C5-S者为L型糖。右第十三页，共一百一十六页，2022年，8月28日椅式船式二、结构类型㈣环的构象

第十四页，共一百一十六页，2022年，8月28日（优势构象）二、结构类型Angyal用总自由能来分析构象式的稳定性，比较二种构象式的总自由能差值，能量低的是优势构象。如：葡萄糖的二种构象式的比较：第十五页，共一百一十六页，2022年，8月28日三、糖苷分类㈠糖匀体均由糖组成的物质。如单糖、低聚糖、多糖等。1．常见单糖

第十六页，共一百一十六页，2022年，8月28日三、糖苷分类第十七页，共一百一十六页，2022年，8月28日三、糖苷分类2．氨基糖是指单糖的伯或仲醇基置换成氨基的糖类。庆大霉素、新霉素、卡那霉素、链霉素

（氨基糖苷类抗生素）第十八页，共一百一十六页，2022年，8月28日三、糖苷分类3．糖醇单糖的醛或酮基还原成羟基后所得的多元醇。4．去氧糖单糖分子的一个或二个羟基为氢原子代替的糖。第十九页，共一百一十六页，2022年，8月28日三、糖苷分类5．糖醛酸单糖分子中伯醇基氧化成羧基的化合物。第二十页，共一百一十六页，2022年，8月28日三、糖苷分类㈡糖杂体

糖与非糖组成的化合物——苷苷的分类：

1．按苷原子不同分类⑴氧苷

如：红景天苷

防止高血压、冠心病、脑溢血、中风后遗症、静脉曲张等中老年病美容、延缓衰老、抗疲劳、改善睡眠第二十一页，共一百一十六页，2022年，8月28日三、糖苷分类⑵氮苷：如腺苷

。⑶硫苷：如萝卜苷。⑷碳苷：如牡荆素。

第二十二页，共一百一十六页，2022年，8月28日2．按苷元不同分类如：黄酮苷、蒽醌、香豆素、强心苷、皂苷等。3．按苷键不同分类⑴醇苷：是通过醇羟基与糖端基羟基脱水而成的苷。如红景天苷（见下页）。⑵酚苷：是通过酚羟基而成的苷。如天麻苷（见下页）。⑶酯苷：苷元以-COOH和糖的端基碳相连接的是酯苷。如山慈菇苷A（见下页）

。⑷氰苷：是指一类α羟腈的苷。如野樱苷（见下页）。

三、糖苷分类第二十三页，共一百一十六页，2022年，8月28日三、糖苷分类看研究材料第二十四页，共一百一十六页，2022年，8月28日三、糖苷分类4．按端基碳构型分

α苷，多为L型；

β苷，多为D型。5．按连接单糖个数分

1个糖——单糖苷

2个糖——双糖苷

3个糖——叁糖苷

第二十五页，共一百一十六页，2022年，8月28日三、糖苷分类6．按糖链个数分

1个位置成苷——单糖链

2个位置成苷——双糖链7．按生物体内存在分

原级苷——在植物体内原存在的苷；

次级苷——原级苷水解掉一个糖或结构发生改变。第二十六页，共一百一十六页，2022年，8月28日㈠溶解性

糖——小分子极性大，水溶性好

聚合度增高，

水溶性下降。多糖难溶于冷水，或溶于热水成胶体溶液。

单糖极性

>双糖极性

（与羟基和碳的分担比有关，即按-OH/C的分担情况而定）苷——亲水性（与连接糖的数目、位置有关）苷元——亲脂性

四、糖和苷的物理性质第二十七页，共一百一十六页，2022年，8月28日四、糖和苷的物理性质㈡味觉

①单糖~低聚糖——甜味。

②多糖——无甜味

（随着糖的聚合度增高，则甜味减小）

③苷类——苦、甜等（人参皂苷）（甜菊苷）第二十八页，共一百一十六页，2022年，8月28日㈢旋光性及其在构型测定中的应用

具有多个不对称碳原子——用于苷键构型的测定（即α、β苷键）。

多数苷类呈左旋。

利用旋光性

→测定苷键构型Klyne法：将苷和苷元的分子旋光差与组成该苷的糖的一对甲苷的分子旋光度进行比较，数值上相接近的一个便是与之有相同苷键的一个。四、糖和苷的物理性质第二十九页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈠氧化反应㈠氧化反应

单糖的分子有醛（酮）、伯醇、仲醇和邻二醇等结构，氧化条件不同其产物也不同。如：

第三十页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈠氧化反应糖分子化学反应的活泼性：

端基碳原子>伯碳>仲碳

（即C1-OH、C6-OH、C2C3C4-OH）以过碘酸反应为例来了解糖的氧化反应的应用过碘酸反应

主要作用于：邻二醇、α-氨基醇、α-羟基醛（酮）、邻二酮和某些活性次甲基等结构。第三十一页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈠氧化反应邻羟基：第三十二页，共一百一十六页，2022年，8月28日邻二酮：-氨基醇：-羟基酮：五、糖的化学性质

㈠氧化反应第三十三页，共一百一十六页，2022年，8月28日反应特点：①反应定量进行（试剂与反应物基本是1:1）；②在水溶液中进行或有水溶液（否则不反应）；③反应速度：顺式

>反式

（因顺式易形成环式中间体）；④游离单糖产物及消耗过碘酸用Fischer式计算;

成苷时糖产物及消耗过碘酸用Haworth式计算;⑤在异边而无扭转余地的邻二醇不起反应。五、糖的化学性质㈠氧化反应第三十四页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈠氧化反应Fischer式和Haworth式消耗过碘酸的计算：

第三十五页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈠氧化反应在异边无扭转余地的邻二醇：不起反应第三十六页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈠氧化反应用途：①推测糖中邻二-OH多少；（试剂与反应物基本是1:1）；②同一分子式的糖，推测是吡喃糖还是呋喃糖；

第三十七页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈠氧化反应③推测低聚糖和多聚糖的聚合度；④推测1,3连接还是1,4连接（糖与糖连接的位置）第三十八页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈡糠醛形成反应㈡糠醛形成反应（Molish反应）第三十九页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈡糠醛形成反应Molish反应：

样品+浓H2SO4+α-萘酚→棕色环多糖、低聚糖、单糖、苷类——Molish反应（+）第四十页，共一百一十六页，2022年，8月28日㈢羟基反应糖的-OH反应——醚化、酯化和缩醛（酮）化。反应活性：

最高的半缩醛羟基（C1-OH）

其次是伯醇基（C6-OH）

仲醇次之。（伯醇因其处于末端的空间，对反应有利，因此活性高于仲醇。）五、糖的化学性质

㈢羟基反应第四十一页，共一百一十六页，2022年，8月28日含糖样品

+Me2SO4+30%NaOH→

醇-OH全甲基化

五、糖的化学性质

㈢羟基反应1．醚化反应（甲基化）①Haworth法（不常用）

判断反应是否完全的方法：甲基化物可用红外光谱测试，直到无-OH吸收峰为止。

制备成甲苷——用限量试剂，即克分子比1∶1时，可得甲苷。第四十二页，共一百一十六页，2022年，8月28日样品

+DMSO+NaH+MeI→全甲基化样品

+MeI+Ag2O→全甲基化（醇-OH）五、糖的化学性质

㈢羟基反应（一次即可）

该反应是在非水溶剂中，即二甲基亚砜（DMSO）溶液中进行反应。②Purdie法

只能用于苷，不宜用于还原糖（即有C1-OH的糖）。因Ag2O有氧化作用，可使C1-OH氧化。③Hakomori法（箱守法）第四十三页，共一百一十六页，2022年，8月28日样品+CH2N2/Et2O+MeOH→

部分甲基化

(酸性越强，质子易解离，甲基化易

)（-COOH、-CHO等）2．酰化反应（酯化反应）

羟基活性与甲基化反应相同，即

（C1-OH、C6-OH、C3最难）（由于C2位取代后，引起的空间障碍，使得C3最难被酰化。）利用酰化可判断糖上-OH数目、保护-OH等。五、糖的化学性质

㈢羟基反应④重氮甲烷法（CH2N2）第四十四页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈢羟基反应3．缩酮和缩醛化反应

酮或醛在脱水剂如矿酸、无水ZnCl2、无水CuSO4等存在下可与多元醇的二个有适当空间位置的羟基易形成环状缩酮（ketal）和缩醛（acetal）。

酮类易与顺邻-OH生成

——五元环状物

醛类易与1,3-双-OH生成

——六元环状物

第四十五页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈢羟基反应

糖

+丙酮→五元环缩酮

(异丙叉衍生物)

糖+丙酮→六元环缩酮(双异丙叉衍生物)例：当糖具有顺邻-OH时，其生成五元环状物（异丙叉衍生物）：第四十六页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈢羟基反应

当糖结构中无顺邻-OH时，则易转变为呋喃糖结构，再生成五元环状物（异丙叉衍生物）。第四十七页，共一百一十六页，2022年，8月28日

糖+苯甲醛→六元环状缩醛（苯甲叉衍生物）例如：葡萄糖甲苷+苯甲醛⇒(具1,3-OH结构)

以上方法主要目的是保护-OH。五、糖的化学性质

㈢羟基反应第四十八页，共一百一十六页，2022年，8月28日还原糖

+苯肼

→

糖腙

（多为水溶性的）还原糖+3分子苯肼→糖脎（较难溶于水）

2-去氧糖不能成脎（因C2上无-OH）。五、糖的化学性质㈣羰基反应应用——糖的鉴定、分离和纯化。第四十九页，共一百一十六页，2022年，8月28日糖

+硼酸

→

络合物（酸性增加、可离子化）㈤硼酸络合反应

糖的邻二-OH可与许多试剂生成络合物，借生成络合物的某些物理常数的改变，可以有助于糖的分离、鉴定和构型推定。重要的如：硼酸络合物、钼酸络合物、铜氨离子络合物等。五、糖的化学性质（H3BO3是接受电子对的Lewis酸）第五十页，共一百一十六页，2022年，8月28日五、糖的化学性质

㈤硼酸络合反应硼酸络合反应的应用：①络合后，中性可变为酸性，因此可进行酸碱中和滴定；②可进行离子交换法分离；③可进行电泳鉴定；④在混有硼砂缓冲液的硅胶薄层上层析。第五十一页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解

研究苷类的化学结构，必须了解苷元结构、糖的组成、糖和糖的连接方式，以及苷元和糖的连接方式等。

为此必先使用某种方法使苷键切断。

㈠酸催化水解反应

㈡乙酰解反应

㈢碱催化水解和β消除反应

㈣酶催化水解反应

㈤氧化开裂法（Smith降解法）

第五十二页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解

㈠酸催化水解反应㈠酸催化水解反应

苷键属于缩醛结构，易为稀酸催化水解。水解反应是苷原子先质子化，然后断键生成阳碳离子或半椅型的中间体，在水中溶剂化而成糖。第五十三页，共一百一十六页，2022年，8月28日

酸水解的规律：⑴苷原子不同，酸水解易难顺序：N>O>S>C

（C-苷最难水解，从碱度比较也是上述顺序）⑵呋喃糖苷较吡喃糖苷易水解因五元呋喃环的颊性使各取代基处在重叠位置，形成水解中间体可使张力减小，故有利于水解。⑶酮糖较醛糖易水解酮糖多为呋喃结构，而且酮糖端基碳原子上有-CH2OH大基团取代，水解反应可使张力减小。六、苷键的裂解

㈠酸催化水解反应第五十四页，共一百一十六页，2022年，8月28日⑷吡喃糖苷中：①吡喃环C5上取代基越大越难水解，水解速度为：五碳糖

>甲基五碳糖

>六碳糖

>七碳糖②C5上有-COOH取代时，最难水解

（因诱导使苷原子电子密度降低）⑸氨基取代的糖较-OH糖难水解，-OH糖又较去氧糖难水解。

2,3-二去氧糖>2-去氧糖>3-去氧糖>羟基糖>2-氨基糖六、苷键的裂解

㈠酸催化水解反应第五十五页，共一百一十六页，2022年，8月28日⑹在构象相同的糖中:a键(竖键)-OH多则易水解。⑺芳香属苷较脂肪属苷易水解。

如：酚苷

>萜苷、甾苷（因苷元部分有供电结构，而脂肪属苷元无供电结构）⑻苷元为小基团苷键横键比竖键易水解(e>a)

（横键易质子化）

苷元为大基团苷键竖键比横键易水解(a>e)

（苷的不稳定性促使其易水解）

六、苷键的裂解

㈠酸催化水解反应第五十六页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解

㈡乙酰解反应㈡乙酰解反应1．常用试剂：醋酐

+酸

所用酸如：H2SO4、HClO4、CF3COOH或Lewis酸（ZnCl2、BF3）等。2．反应条件：一般是在室温放置数天。3．反应机理：与酸催化水解相似，以CH3CO+(乙酰基，Ac）为进攻基团。第五十七页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解

㈡乙酰解反应※乙酰解反应易发生糖的端基异构化。第五十八页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解㈡乙酰解反应4．反应速率：⑴苷键邻位有电负性强的基团（如环氧基）可使反应变慢。⑵β-苷键的葡萄糖双糖的反应速率：

（乙酰解易难程度）（1→6）>>（1→4）>>（1→3）>>（1→2）第五十九页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解㈡乙酰解反应5．用途

⑴酰化可以保护苷元上的-OH，使苷元增加亲脂性，可用于提纯和鉴定。⑵乙酰解法可以开袭一部分苷键而保留另一部分苷键。第六十页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解㈢碱催化水解㈢碱催化水解和β消除反应

一般苷键对稀碱是稳定的，但某些特殊的苷易为碱水解，如：

酯苷酚苷烯醇苷

β-吸电子基取代的苷第六十一页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解

㈢碱催化水解C1-OH与C2-OH：

反式易水解，其产物为1,6-葡萄糖酐；

顺式产物为正常的糖。利用水解产物可判断苷键构型

第六十二页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解㈢碱催化水解β-消除反应：

苷键的β-位有吸电子基团者，使α-位氢活化，在碱液中与苷键起消除反应而开裂，称~。作用机理：如下

第六十三页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解㈢碱催化水解β-消除反应作用过程：

在1→3或1→4连接的聚糖中，还原端的游离醛（或酮）邻位氢活化而与3-O-或4-O-苷键起消除反应。

这样碱能使多糖还原端的单糖逐个被剥落，对非还原端则无影响。剥落生成的是α-羟基糖酸。第六十四页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解㈢碱催化水解用途：

可从多糖剥落反应生成的糖酸中了解还原糖的取代方式。

3-O-代的糖可形成——3-脱氧糖酸

4-O-代的糖可形成——3-脱氧-2-羟甲基糖酸

二个以上取代的还原糖——难生成糖酸第六十五页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解㈣酶催化水解反应㈣酶催化水解反应

用酶水解苷键可以获知苷键的构型，可保持苷元结构不变的真正苷元。酶专属性高，选择性地催化水解某一构型的苷。如：苦杏仁酶（emulsin）——水解——β-葡萄糖苷键纤维素酶（cellulase）——同上麦芽糖酶（maltase）——水解——α-葡萄糖苷键第六十六页，共一百一十六页，2022年，8月28日六、苷键的裂解㈤氧化开裂法㈤氧化开裂法（Smith降解法）可得到原苷元（除酶解外，其它方法可能得到的是次级苷元）试剂：过碘酸(HIO4)、四氢硼钠(NaBH4)、稀酸反应过程：

第六十七页，共一百一十六页，2022年，8月28日七、糖的提取分离

㈠提取㈠提取

主要为溶剂法——水、稀醇（单糖、低聚糖、多糖）

糖类的提取可根据它们对乙醇和水的溶解度不同，而采用冷热水、冷热稀醇等条件。苷类分子的极性随着糖基的增多而增大。可根据其极性大小，来选择相适应的溶剂。

破坏或抑制植物体内酶的方法：采集新鲜材料——迅速加热干燥——冷冻保存等第六十八页，共一百一十六页，2022年，8月28日七、糖的提取分离

㈡分离㈡分离

1．活性炭柱色谱

2．纤维素色谱

3．离子交换柱色谱

4．凝胶柱色谱

5．季铵氢氧化物沉淀法

6．分级沉淀或分级溶解法

7．蛋白质除去法第六十九页，共一百一十六页，2022年，8月28日七、糖的提取分离

㈡分离1．活性炭柱色谱⑴概述用途——分离水溶性物质较好如：氨基酸、糖类及某些苷类。特点：（对于活性炭柱色谱）①上样量大，分离效果较好，适合大量制备；②来源容易，价格廉；③缺点：无测定其吸附力级别的理想方法。第七十页，共一百一十六页，2022年，8月28日七、糖的提取分离

㈡分离分类：①粉末状活性炭——颗粒细，总表面积大，吸附力及吸附量大。

②颗粒状活性炭——颗粒较上者大，吸附力及吸附量也较上者次之。

③绵纶-活性炭——以锦纶为粘合剂，将粉末状活性炭制成颗粒，吸附力最弱。

第七十一页，共一百一十六页，2022年，8月28日H2O、10%、20%、30%、50%、70%乙醇液无机盐

→二糖

→三糖

→多糖→单糖等七、糖的提取分离

㈡分离⑵活性炭对物质的吸附规律

对分子量大的化合物吸附力大于分子量小的化合物，即：多糖

>单糖

活性炭在水溶液中的吸附力最强，在有机溶剂中吸附力较弱。洗脱顺序：第七十二页，共一百一十六页，2022年，8月28日七、糖的提取分离

㈡分离2．纤维素色谱

原理与PC相同，属分配层析。

溶剂系统：水、丙酮、水饱和的正丁醇等。用水溶性的溶剂如HAc：H2O进行展开时，其原理属吸附层析。第七十三页，共一百一十六页，2022年，8月28日七、糖的提取分离

㈡分离3．离子交换柱色谱①除水提液中的酸、碱性成分和无机离子；②制成硼酸络合物——强碱性阴离子交换树脂（不同浓度硼酸盐液洗脱）

第七十四页，共一百一十六页，2022年，8月28日4．凝胶柱色谱常用商品名称及型号：葡聚糖凝胶（商品名：SephadexG）

G-10、G-15、G-200等[10—表示吸水量乘以10，即1.0ml/g的吸水量]琼脂糖凝胶（Sepharose，Bio-GelA）聚丙烯酰胺凝胶（Bio-GelP）羟丙酰基交联葡聚糖凝胶（SephadexLH-20）（亲脂性，可在有机溶剂中进行分离的分子筛）七、糖的提取分离

㈡分离第七十五页，共一百一十六页，2022年，8月28日七、糖的提取分离

㈡分离操作过程：

除LH-20外，均在H2O中进行。①将凝胶在适当的溶液中浸泡（多为洗脱剂）；②待充分膨胀后装入层析柱；③用洗脱液洗脱；④收集、回收溶液，干燥。

第七十六页，共一百一十六页，2022年，8月28日洗脱溶剂的选择：分离中性物质——水及电解质溶液

（酸、碱、盐溶液及缓冲液）阻滞较大的组分——水+有机溶液

（水-甲醇、水-乙醇、水-丙酮等）

LH-20可用有机溶液进行溶胀（如：CHCl3、丁醇、二氧六环等）(适用：有机物质的分离，如：脂类、固醇类等)七、糖的提取分离

㈡分离第七十七页，共一百一十六页，2022年，8月28日七、糖的提取分离

㈡分离5．季铵氢氧化物沉淀法季铵氢氧化物是一类乳化剂。第七十八页，共一百一十六页，2022年，8月28日七、糖的提取分离

㈡分离6．分级沉淀或分级溶解法

在糖的水溶液中，逐步加入乙醇，即逐渐增大EtOH浓度，可得到各部分的沉淀物。

为使多糖稳定，多糖通常在pH=7时进行

酸性多糖在pH=2~4时进行

处理酸性多糖时，为防酸水解苷键，操作宜迅速。第七十九页，共一百一十六页，2022年，8月28日7．蛋白质除去法

用分级沉淀法得到的多糖，常夹杂有较多的蛋白质，为除之，通常选择能使蛋白质沉淀而使多糖不沉淀的试剂来处理，如：酚、三氯乙酸、鞣酸等。注意：处理时间要短，温度要低。

（避免多糖降解）三氟三氯乙烷法和Sevag法（用氯仿：戊醇或丁醇4：1混合）在避免降解上有较好效果。七、糖的提取分离

㈡分离第八十页，共一百一十六页，2022年，8月28日㈢糖的提取分离实例地黄根中单糖和低聚糖的分离取鲜根→热EtOH、H2O提→阴阳离子交换树脂（除酸碱成分）得中性成分

活性炭柱（15%HOAc处理）

以H2O、稀EtOH（5、10、15、

25%顺次洗脱）,经PC检定，合并D-葡萄糖

D-半乳糖

D-果糖

蔗糖

棉子糖甘露三糖

水苏糖(四糖)毛蕊糖(五糖)七、糖的提取分离

㈡分离第八十一页，共一百一十六页，2022年，8月28日㈠糖的鉴定1．纸层析展开系统：常用水饱和的有机溶剂展开。

如：正丁醇：醋酸：水（4：1：5上层）BAW

水饱和苯酚等溶剂系统。显色剂：邻苯二甲酸苯胺、硝酸银试剂(使还原糖显棕黑色)、三苯四氮唑盐试剂（单糖和还原性低聚糖呈红色）、3,5-二羟基甲苯盐酸试剂（酮糖呈红色）

等。八、糖的鉴定和糖链结构的测定第八十二页，共一百一十六页，2022年，8月28日2．薄层层析可用（硼酸液

+无机盐）+硅胶→制板吸附剂：硅胶

（用0.03M硼酸液或无机盐的水液代水制板）常用的无机盐：0.3M磷酸氢二钠或磷酸二氢钠

0.02M醋酸钠

0.02M硼酸盐缓冲液

0.1M亚硫酸氢钠/H2O八、糖的鉴定和糖链结构的测定第八十三页，共一百一十六页，2022年，8月28日

硼酸与无机盐制板的特点：

增加糖在固定相中的溶解度，使硅胶薄层吸附能力下降，利于斑点集中，又可增加样品的承载量。显色剂：除纸层析应用的以外，还用如：

H2SO4/H2O或乙醇液

茴香醛-硫酸试剂苯胺-二苯胺磷酸试剂等八、糖的鉴定和糖链结构的测定第八十四页，共一百一十六页，2022年，8月28日3．气相层析

将糖制备成三甲基硅醚（增加其挥发性）将醛糖用NaBH4还原成多元醇（避免形成端基异构体）制成乙酰化物或三氟乙酰化物。4．液相色谱

填充材料——化学修饰的硅胶

优：不必制备成衍生物

适合分析对热不稳定、不挥发的低聚糖和多糖分析单糖和低聚糖，其灵敏度不及气相层析八、糖的鉴定和糖链结构的测定第八十五页，共一百一十六页，2022年，8月28日5．离子交换层析

糖的硼酸络合物——可进行离子交换层析优：不必制成衍生物，而直接用水溶液进行分离（与气相比较）糖自动分析仪：

显

色：3,5-二羟基甲苯-浓硫酸

波

长：425nm

上样量：每种组成不超过1mg

洗脱剂：四硼酸钾的缓冲溶液

八、糖的鉴定和糖链结构的测定第八十六页，共一百一十六页，2022年，8月28日㈡糖链结构的测定

主要解决的问题——单糖的组成、糖之间的连接位置和顺序、苷键构型

1．单糖的组成

2．单糖之间连接位置的决定

3．糖链连接顺序的决定

4．苷键构型的决定

5．13C-NMR在糖链结构测定中的应用

八、糖的鉴定和糖链结构的测定第八十七页，共一百一十六页，2022年，8月28日1．单糖的组成

低聚糖、多糖的结构分析，首先要了解由哪些单糖所组成，各种单糖之间的比例如何。

一般是将苷键全水解，用PC检出单糖的种类，经显色后用薄层扫描仪求得各种糖的分子比。

也可用GLC或HPLC对单糖定性定量。

GLC常以甘露醇或肌醇为内标，用已知单糖作标准。八、糖的鉴定和糖链结构的测定第八十八页，共一百一十六页，2022年，8月28日八、糖的鉴定和糖链结构的测定2．单糖之间连接位置的决定①将糖链全甲基化→水解→甲基化单糖的定性和定量（气相层析）（甲基化单糖中游离-OH的部位就是连接位置）②13C-NMR测定：主要归属各碳信号，以确定产生苷化位移的碳。

第八十九页，共一百一十六页，2022年，8月28日3．糖链连接顺序的决定①缓和水解法：将糖链水解成较小的片段，然后分析这些低聚糖的连接顺序。②质谱分析。4．苷键构型的决定

⑴分子旋光差（klyne法）

⑵酶催化水解方法(酶专属性高，选择性地催化水解某一构型的苷)

⑶1H-NMR判断糖苷键的相对构型⑷其它

八、糖的鉴定和糖链结构的测定第九十页，共一百一十六页，2022年，8月28日八、糖的鉴定和糖链结构的测定⑶1H-NMR判断糖苷键的相对构型在糖的1H-NMR中：

端基质子——δ5.0ppm左右

其它质子——δ3.5~4.5ppm

可通过C1-H与C2-H的偶合常数，来判断苷键的构型（α、β）

例如：D-葡萄糖

第九十一页，共一百一十六页，2022年，8月28日八、糖的鉴定和糖链结构的测定D-葡萄糖第九十二页，共一百一十六页，2022年，8月28日八、糖的鉴定和糖链结构的测定

用1H-NMR可判断一些糖的相对构型，但还有一些糖由于其结构上的原因，而无法利用1H-NMR来判断相对构型。如：第九十三页，共一百一十六页，2022年，8月28日IR——α葡萄糖苷在770、780cm-1有强吸收峰；MS——葡萄糖苷乙酰化物331碎片峰强度：α>β

八、糖的鉴定和糖链结构的测定再如：⑷其它第九十四页，共一百一十六页，2022年，8月28日如：D-葡萄糖八、糖的鉴定和糖链结构的测定5．13C-NMR在糖链结构测定中的应用端基碳——δ97~106ppm

一般在13C-NMR谱中：第九十五页，共一百一十六页，2022年，8月28日八、糖的鉴定和糖链结构的测定D-葡萄糖苷

C1——α型

97~101ppm

β型

103~106ppmCH-OH(C2、C3、C4)70~85ppmCH2-OH(C6)62左右

CH3<20ppm

用门控去偶技术，可判断呋喃糖的端基碳与端基质子的偶合常数。α苷键JC-H≈170Hzβ苷键JC-H≈160Hz第九十六页，共一百一十六页，2022年，8月28日苷化位移（glycosidationshift）!

糖苷化后，端基碳和苷元α-C化学位移值均向低场移动，而邻碳稍向高场移动（偶而也有向低场移动的），对其余碳的影响不大，这种苷化前后的化学变化，称苷化位移。八、糖的鉴定和糖链结构的测定第九十七页，共一百一十六页，2022年，8月28日八、糖的鉴定和糖链结构的测定苷元β位有取代时的苷化位移：①苷元α-碳手性和糖端基手性都为R（或S）时，苷化位移值与苷元为位无取代的环醇相同。如：

第九十八页，共一百一十六页，2022年，8月28日八、糖的鉴定和糖链结构的测定②苷元α-碳和糖端基碳手性不同时，端基碳和α-碳的苷化位移值比苷元为β-无取代的相应碳的苷化位移值大约为3.5ppm。第九十九页，共一百一十六页，2022年，8月28日酯苷、酚苷的苷化位移：当糖与-OH形成酯苷键或酚苷键时，其苷化位移值较特殊，端基碳和苷元α-碳均向高场位移。八、糖的鉴定和糖链结构的测定第一百页，共一百一十六页，2022年，8月28日八、糖的鉴定和糖链结构的测定三萜类化合物——齐墩果酸：第一百零一页，共一百一十六页，2022年，8月28日掌握常见几种单糖的结构（Haworth式）掌握化学反应的特点及应用掌握苷键裂解的各种方法及其特点（如：酸解、碱解、酶解、Smith降解等）1H-NMR及13C-NMR在糖苷中的应用（如：苷键构型的测定、化学位移值大致区间、糖端基碳的化学位移值、利用J值判断苷键构型、苷化位移（含酚苷和酯苷）等。）本章重点内容第一百零二页，共一百一十六页，2022年，8月28日TheEnd第一百零三页，共一百一十六页，2022年，8月28日人参多糖注射液：能刺激机体的体液免疫和细胞免疫功能,高效抑杀肿瘤细胞,显著提高机体免疫功能,提高肝脏解毒作用,对化,放疗有增效减毒作用.[适应症]:对各种恶性肿瘤及急慢性肝病,肝损伤有显著疗效，并用...next第一百零四页，共一百一十六页，2022年，8月28日

灵芝多糖目前已分离到有灵芝多糖有200多种，其中大部分为