麻醉学研究生开题报告

精品精品精品精品大连大学研究生学位论文开题报告学 号：姓 名：导师姓名研究方向： 羟考酮的药效学与药代动力学论文题目：羟考酮对小鼠全脑缺院（系）：入学时间：开题时间：

血再灌注损伤干预效果的影响麻醉学系2007年 9月 5日2008年 11月5日二○〇八年十一月五日学位论文开题报告评审表姓 名 导师姓名专 业 麻醉学 所属院（系类 别 □博士 √□硕士 □硕博连读

第一次开题麻醉学系论 题目名称基础理论研究（）应用性研究（√）开发性研究（）基础理论研究（）应用性研究（√）开发性研究（）国家项目（自选项目（）√）合作项目（ 其它项目：省（部）项目（）选题 类别（√）

不同时间甘露醇脱水对小鼠脑缺血再灌注损伤干预效果的影响姓名职称工作单位及职务签字组长评审组成员总成绩票同意票不同意综合分均分：（含：选题意义；实验条件；技术方案可行性；研究计划合理性等）评审意见评审组长签字： 年 月 日注：一半以上不同意或评价综合分低于C+（70分）者，必须重新开题一、立论依据（包括研究意义、国内外研究现状分析，并附主要参考文献及出处）（一） 研究意义临床麻醉中各种原因引起围术期的心肺功能受损，如心跳骤停、急性呼吸道梗阻等，都会不同程度的存在脑缺血再灌注损伤。麻醉期间意外发生率为5.2～44.3/万，猝死率为2.8～7.0/万[1]。急救过程中，脑复苏环节是保证远期复苏效果的关键。现阶段大多数对脑缺血再灌注损伤干预措施的研究集中于缺血再灌注损伤发生前的预处理，报道对脑缺血再灌注损伤有预防作用的涉及地氟烷[2]、异氟烷[3]、异丙酚[4]、氯胺酮[5]等等众多临床常用药物。由于临床意外难以预见，及在脑缺血再灌注后死亡细胞和凋亡细胞的不可逆性，预处理的思路常常无助于临床意外中对脑损伤的治疗。我们认为改善缺血再灌注后脑的功能，应该积极关注脑缺血再灌注后的变性神经元，建立稳定，可靠，适用于对脑缺血再灌注损伤后变性神经元救治实验的动物模型具有探索价值。羟考酮主要作用部位是中枢神经系统,其次是平滑肌,其药理作用主要是镇痛,其他还包括镇咳、缩瞳、恶心、呕吐、瘙痒、呼吸抑制、胃肠蠕动降低等。研究认为羟考酮的镇痛作用可能与μ、κ受体有关,尽管其精确作用机制现在还不明确,但现已确定羟考酮产生呼吸抑制是通过直接作于脑干呼吸中心,其镇咳是通过直接作用于髓鞘咳嗽中心而起作用。羟考酮精神依赖性的形成与纹状体多巴胺释放量增加有关。（二）国内外研究现状脑缺血再灌注损伤的机制ATP此时神经元以无氧酵解的方式可提供少量ATPPH的影响，因而神经元的功能遭到破坏。例如能量障碍引起毒使谷氨酸摄取受阻，突触隙内有谷氨酸堆积，通过大量激活其NMDA受体，致Ca2+内流增加，胞内钙超载，但此时依赖能量的离子泵Ca2+受损，无法将Ca2+排出胞外，细胞内过量的引发一系列生化反应，如自由基及过氧化物生成，细胞因子释放及炎症反应等，最终造成对神经元的损害，但其[6]目前关注的脑保护的方法有：（1）低温[7]；麻醉药物的应用（包括吸入麻醉药、静脉麻醉药及某些局麻药血液稀释；[9]；[10]；[11]羟考酮与脑缺血再灌注损伤正常时海马结构包括：连合前海马、灰被、束状回、海马、齿状回以及下托。海马可分为四个区：CA1:海马水平部的背内侧部分和垂直部的后内侧部分；CA2：海马水平部的背外侧部分和垂直部的前外侧部分；CA3：海马CA4：冠以齿状回的部分，即齿状回的多形细胞层。从海马的脑室面向海马沟观察，可见下列层次：室管膜层、槽层、多行细胞层、椎体细胞层、辐状层、腔隙层和分子层；再向外则是齿状回的分子层、颗粒层和多行细胞层。正常海马CA1区2-3层锥体细，长径[12]。国内有报道沙土鼠缺血再灌注后CA1区多数神经元变形坏死，表现细胞肿胀，胞浆内形成空泡，核呈不规则固缩，深染等，甘露醇治疗组仅有个别神经元变性坏死。可见从形态学角度说明甘露醇有神经元保护作用。但这方面小鼠的实验报道不多。目前常见的全脑缺血动物模型：（同时阻断双侧颈总动脉和基底动脉（同时阻断双侧颈总动脉和基底动脉（同时阻断双侧的颈总动脉和椎动脉三动脉阻断法和四动脉阻断法的缺血程度较双动脉阻断法为重或和梗死灶重叠，不能形成较好的观察区域。双动脉阻断法建立小鼠全脑缺血再灌注损伤模型10min22.3%[16],接近大多数临床意外时脑缺血的情况，且对实验动物造成的应激性生理及病理反射较小[17]。实验观察了昆明小鼠双颈总动脉阻断30～120min再灌注24h后的脑缺血CA1区细胞的形态学特点，认为昆明小鼠缺血60min再灌注24h造成的损伤程度适中，不同程度的受损细胞比例均衡，可作为以变性神经元为观察对象，在脑缺血后实施干预的脑缺血再灌注损伤重复性好的特点。在此实验动物平台上分别成功的进行了脑缺血再灌注损伤后纳洛酮和皮质激素干预效果的观察和评价。同时间甘露醇脱水治疗的效果评价和实验动物观察。【主要参考文献】[1]王玉明，李小平，李江明.麻醉与猝死.北京军区医药[J].1999,11(5):365-368可能性保护作用.中国临床康复[J].2005,9(14):215进修学院学报[J].2005,26(5):392-394子-1κB表达的影响.中华麻醉学杂志[J].2005,25(2):122-125医药杂志[J].2003,29(10):741-742．彭静，鄢建勤.乌司他丁与脑保护，2007麻醉学新进展，2007：46~47包正夫,徐 蔚.低温脑保护技术的现状与进展[J].昆明医学院学报,2007,24(1)107~109陈伯蛮李德馨.麻醉药对脑功能和脑代谢的影响和脑保护[J].《国外医学》麻醉学与复苏分册，2003，24(1)：1~2保护作用的机制研究[J，2004，8（4：658~659甘国胜,王焱林.药物预处理在颅脑手术围术期的脑保护作用的研究进展[J误诊学杂志,2006,6(8):1443~1445王 瑜.中药治疗脑缺血及对脑保护作用的研究[J].中医药学刊，2002，20王平宇，朱治远，等．大白鼠中枢神经系统解剖学基础．2003：34~39EklofB,SiesjoBK.Theeffectofbilateralcarotidarteryligationuponthebloodflowandtheenergystateoftheratbrain[J].ActaPhysiolScand,1972,86:155~165.KameyamaM,SuzukiJ,ShiraneR,etal.Anewmodelofbilateralhemisphericischemiaintheratthreevesselocclusionmodel[J].Stroke,1985,16:489~493.PulsinelliWA,BrierleyJB.Anewmodelofbilateralhemisphericischemiaintheunanesthetized[J].Stroke,1979,10:267~272.卢晓梅,金玉梅.灯盏花素对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响 [J].锦州医学院报,2006,27(1):44-46贾栋，高国栋.大鼠全脑缺血/再灌注模型之比较研究.卒中与神经疾病[J].1999,6(3):145-148二、研究方案（一）研究目标、研究内容和拟解决的关键问题研究目标探索不同时间羟考酮处理对小鼠全脑缺血再灌注损伤干预效果的影响。研究内容光镜下观察正常小鼠海马CA1光镜下观察不同处理组小鼠海马CA1区神经元的病理形态学变化光镜下观察不同时间甘露醇干预后的小鼠海马CA1区神经元的病理形态学变化拟解决的关键问题按照郗东峰同学的方法建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型。准确完成不同时间的甘露醇干预完整取脑，正确选取观察部位的脑组织。客观描述病理形态学标本所见准确统计病理形态学指标适当的统计学处理，导出实验结论（二）拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析研究方法健康昆明小鼠42只，随机分为对照组、假手术组、缺血再灌注损伤组和羟考酮干预组。按照结扎双侧颈总动脉法制备小鼠脑缺血再灌注损伤模型。进行脑组织海马CA1区神经元细胞计数，光镜观察海马CA1区神经元病理形态学的改变，并计算变性细胞率。技术路线取脑组织固对照组(n=6)定、石蜡包健康昆明小鼠42只假手术组(n=6)缺血再灌注损伤组(n=6)再灌注即刻羟考酮干预组(n=6)再灌注30min羟考酮干预组再灌注1h羟考酮干预组(n=6)埋切片再灌注24h后取脑组织固定、石蜡HE染色光镜细胞计形态学观察数据处理、统计学分析、得出结论包埋再灌注1.5h羟考酮干预组(n=6)切片3实验方案实验分组：健康昆明小鼠42只（山西省肿瘤医院实验动物中心提供，雌雄不分，体重20±2克左右，随机分为对照组An=、假手术组Bn=、（C（D1、再灌注30min羟考酮干预组、再灌注1hn=和再灌注1.5h羟考酮干预组D4n=D组给予羟考酮1g/kg腹腔注射。动物模型制备：手术在室温25℃50%0.6%的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉60mg/k，络合碘消毒，铺单，行颈部正中切口，分离两侧颈总动脉，用3-0后实现再灌注。缝合切口，置清洁饲养笼中观察。A组既不手术也不给药。B但不结扎。C组分离双侧颈总动脉，结扎1h后再灌注，但不给药。D1、D2、D3、D430min1h和1.5h腹腔注射甘露醇1g/kg24h后0.6%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，迅速取脑。检查指标和方法标本置于4%多聚甲醛液中固定24h包埋，冠状切片，片厚μmHE染色，光镜下在有测微尺显微镜下（×10）计数海马CA1区2mm范围内核完整的存活细胞数（CA1区始点起，并观察海马CA1区细胞形态变化，并计算变性细胞率。统计分析：实验数据以均数±标准差（xs）表示，采用单因素方差分析，组间进行多重比较，各组变性细胞率用X2检验比较，SPSS11.5统计软件分析，P＜0.05认为有显著性差异。4.可行性分析：（1）2005级研究生吴晓阳已经建立了稳定的小鼠全脑缺血动物模型。2006级研究生田彦鹏在此实验动物平台上分别成功的进行了脑缺血再灌注损伤后纳洛酮和皮质激素干预效果的观察和评价。本实验参考大量相关文献。实验经费已落实。（三）本课题的创新之处国内多数报道的是脑缺血再灌注损伤前的药物干预，以梗死和凋醇干预，以变性细胞为观察指标。合适的时间，从而为临床心肺脑复苏提供实验依据。（四）研究计划及预测进展2015年7月——2015年11月 文献检索及撰写综述2015年12月——2016年2月 实验准备、预实验2016年3月——2017年6月 实验阶段2017年7月——2017年9月 实验数据处理、论文撰写（五）.预期研究成果（2）预期提交学术论文1-2篇。三、研究基础与本课题有关的，前期研究工作积累和已取得的研究工作成绩已阅读大量国内外相关文献，并撰写了有关综述。基本掌握实验所需的各项操作技能及各项指标的测量方法。前期的研究工作是成功建立了两动脉阻断法小鼠前脑缺血再灌注损伤模型，该方法简单易行，成功率高，并用羟考酮、纳洛酮和皮质激素干预的效果证实了此实验平台的有效性。已具备的实验条件，尚缺少的实验条件和拟解决的途径（重点实验室和部门开放实验室的计划与落实情况）学术条件图书馆可获得大量文献资料。统计学、及其他教研室的老师可以给予指导。设备和实验条件大连大学附属中山医院动物实验中心可提供实验动物、实验仪器设备。精品精品精品精品研究生开题报告评分表姓 名 郭文义 学 号 Sc2007122 导师姓名 赵嘉训院（系） 麻醉学系 教研室 麻醉 第一次开论文题目 不同时间甘露醇脱水对小鼠脑缺血再灌注损伤干预效果的影响评价内容 评价参考研究意义 有重要科学意义或国民经济建设中的重要科技问题10有重要科学意义或国民经济建设中的重要科技问题10对学科发展有促进或有应用前景8属一般问题4科学意义或应用前景不大2有明显的创新15有一定的创新和特色12创新性不强6无创新2充分，科学性强15

打分标准

参考分数学术思想 立 论 依立项依据据（博士生可附查新报告）对国内外研究现状分析研究内容和拟解决的关键问题研 拟采用的研究 究方法与技方 术路线（实案 验方案）研究的预目标研 与本研究有究 关的研究工基 作积累和实础 验条件答 对问题的理辩