基因工程细胞工程胚胎工程复习

专题一基因工程1、基因工程的基本操作程序目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和鉴定（核心）（三个方法）（三种受体）（三个步骤P14）2、目的基因获取方法从基因文库中获取利用PCR技术扩增目的基因人工合成目的基因3、基因工程用到的工具酶限制酶和DNA连接酶E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶5、基因表达载体的组成启动子、终止子、目的基因和标记基因4、基因工程用到的运载体质粒（最常用）、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒6、导入受体细胞的方法(1)植物细胞双子叶植物单子叶植物农杆菌转化法基因枪法(2)动物细胞显微注射法受体细胞常用：受精卵(3)微生物细胞用Ca2+处理细胞，成为感受态细胞。基因工程细胞工程（核移植技术）7、成功表达的结果：转基因小牛合成人的血清白蛋白。专题二细胞工程一、植物细胞工程1、去壁：酶解法（纤维素酶和果胶酶）2、原生质体融合：物理法：电激、振动、离心化学法：聚乙二醇3、融合完成的标志：产生新的细胞壁4、理论基础：细胞膜的流动性植物细胞的全能性5、意义：克服不同物种间的远缘杂交不亲和障碍。植物组织培养技术脱分化再分化若生产人工种子，则培养到

阶段；若提取细胞产品（如紫草素），则一般培养到

阶段；如培育新个体，则应该培养到

阶段。6、关于植物组织培养技术：植物组织培养的目的不同，培养阶段也就不同：胚状体愈伤组织试管苗下图为植物体细胞杂交过程示意图。下列说法不正确的是（

）A.植物体细胞杂交的最大优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍B.杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株说明杂种细胞具有全能性C.尽管愈伤组织可以进行光合作用，但其培养基中仍需要糖类、氨基酸等有机营养D.若A的基因型为Rr，B的基因型为Yy，则最终形成的杂种植株的基因型为RrYyC二、动物细胞工程技术手段动物细胞培养动物细胞融合动物细胞核移植生产单克隆抗体（基础）动物细胞培养1、取材：3、组织处理：4、原代培养、传代培养、接触抑制剪碎胰蛋白酶或胶原蛋白酶幼龄的动物组织5、培养条件无菌无毒、动物血清、CO22、理论基础：细胞增殖动物体细胞核移植技术1、取材：卵母细胞原因：卵母细胞体积大，易于操作；含有促使细胞核全能性表达的物质.2、去核方法：显微操作去核法动物体细胞核移植技术3、理论基础：动物细胞核的全能性4、生殖方式：无性生殖5、用核移植得到的动物成为克隆动物。1、该过程中使用到了哪些生物技术手段？2、通过该过程可得出什么结论？3、克隆羊的性别与哪只羊相同？为什么？4、克隆羊的性状主要与哪只羊相同？5、在操作过程中为什么要用去核的卵细胞做受体细胞？6、克隆羊的繁殖过程应属于哪种方式?转基因克隆动物动物细胞融合技术（制备单克隆抗体）1、诱导方法：物理方法化学方法生物方法:与植物同灭活的病毒注射抗原B淋巴细胞2、理论基础：细胞膜的流动性、细胞增殖3、两次筛选的目的第一次：筛选出杂交瘤细胞第二次：筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞4、杂交瘤细胞的特点既能无限繁殖，又能产生特异性抗体。5、的特点特异性强、灵敏度高，能大量生产（制备）。比较项目

植物细胞工程

动物细胞工程

原理①植物组织培养──细胞全能性

②植物体细胞杂交──细胞的全能性、细胞膜流动性①动物细胞培养──细胞增殖

②体细胞核移植──动物细胞核的全能性

③单克隆抗体的制备──细胞膜的流动性、细胞增殖

④动物细胞融合──细胞膜流动性工具酶纤维素酶、果胶酶胰蛋白酶、胶原蛋白酶动、植物细胞工程技术手段的原理和工具酶如图表示单克隆抗体的制备过程，请回答下列

问题：（1）细胞A具有产生

的功能。细胞B的突出特点是

。诱导细胞A和B融合的诱导剂通常是

或聚乙二醇。

（2）若细胞A的基因型为AA，细胞B的基因型为BB，生产的目标应该是基因型为

的细胞。可通过特定的

培养基将所需的融合细胞筛选出来。特异性抗体能够无限增殖灭活的病毒AABB选择（3）动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有

。细胞培养应在含5％CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是

。

（4）单克隆抗体与常规抗体相比，具有

等特点。单克隆抗体与抗癌药物结合制成“生物导弹”，可明显减少用药量和副作用，原因是

。

动物血清维持培养液的pH特异性强、灵敏度高，并可大量生产单克隆抗体能够和癌细胞特异性结合胚胎移植专题三胚胎工程1、卵母细胞的采集注射促性腺激素超数排卵屠宰场卵巢获取借助仪器从活体卵巢直接吸取需要体外培养不需要体外培养减数第二次分裂中期2、供体和受体的处理供体两次激素处理超数排卵处理