免疫诊断与防治

免疫诊断与防治第一页，共一百零七页，2022年，8月28日教材内容绪论（2学时）第一周第一篇免疫学第一章抗原（2学时）第一-二周第二章免疫细胞和免疫器官（4学时）第二-三周第三章免疫分子（8学时）第三-六周第四章免疫应答（6学时）第六-七周第五章超敏反应（2学时）第八周第七章免疫诊断与防治（2学时）第九周共26学时3学时/次课9周完成第二页，共一百零七页，2022年，8月28日第七章免疫诊断与预防

ImmunologicaldiagnosisandPrevention第一节免疫诊断第二节免疫防治内容提要第三页，共一百零七页，2022年，8月28日1、了解常用的免疫细胞分离、计数方法，细胞因子的常用检测方法及免疫检测中常用的分子生物学技术。2、掌握抗原抗体反应的特点、影响因素，血清学反应的种类、实验方法及应用，T细胞功能测定的方法。3、解决各种常用免疫检测方法的实际操作方法。4、了解人工免疫的注意事项。5、掌握人工主动、被动免疫生物制剂的常见种类，常用的免疫应答调节剂、免疫抑制剂。6、重点掌握人工被动免疫与人工自动免疫的区别。教学基本要求

第四页，共一百零七页，2022年，8月28日检测抗原抗体反应的体外方法，检测免疫细胞的方法，细胞因子的检测及分子生物学技术在免疫检测中的应用，免疫预防的概念、种类及具体方法、注意事项，免疫治疗的常用调节剂、抑制剂。教学基本内容第五页，共一百零七页，2022年，8月28日第七章免疫诊断与预防

ImmunologicaldiagnosisandPrevention第一节免疫诊断第二节免疫防治内容提要第六页，共一百零七页，2022年，8月28日

免疫学技术是当今生命科学实验研究的重要手段之一，临床上免疫学检测技术被广泛用于与免疫相关疾病的诊断、发病机制研究、免疫状态监测及疗效评估。

第七页，共一百零七页，2022年，8月28日第一节免疫诊断一、抗原与抗体的检测1、凝集反应2、沉淀反应3、补体参与的反应4、用标记抗体或抗原进行的抗原-抗体反应二、淋巴细胞的测定1、淋巴细胞的类别鉴定2、淋巴细胞功能测定三、免疫诊断方法的应用（不做要求）1、疾病的诊断2、免疫学监测

第八页，共一百零七页，2022年，8月28日一、抗原与抗体的检测

抗原-抗体反应：1、已知的特异性抗体检测未知的抗原；2、已知的抗原检测未知的抗体。抗原-抗体反应的特点：1、特异性：抗原-抗体的结合是特异性结合；2、可逆行：抗原抗体结合是分子表面的非共价键结合；3、可见性：抗原和抗体结合是否呈现可见的反应现象。第九页，共一百零七页，2022年，8月28日一、抗原与抗体的检测

----（1）凝集反应凝集反应(Agglutination):细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集现象。1、直接凝集2、间接凝集第十页，共一百零七页，2022年，8月28日1、直接凝集(directagglutination)

细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集团块。

第十一页，共一百零七页，2022年，8月28日1、玻片凝集反应:（抗原定性检测，如ABO血型鉴定，细菌鉴定）

未知抗原+已知抗体凝集团块混浊?2、试管凝集反应：（抗体的定量检测，如诊断伤寒的肥达实验）

定量抗原+系列稀释抗体不同程度的凝集反应YESNO确定抗体的滴度第十二页，共一百零七页，2022年，8月28日第十三页，共一百零七页，2022年，8月28日实验材料：

灭活的伤寒菌液(7×108/ml),待测血清2.方法：0.50.50.50.50.50.50.50.50.51:201:401:801:1601:3200.5弃掉123450.160.9生理盐水(ml)待测血清对照管0.9ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml①②③④灭活的伤寒菌液0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml抗体稀释度彻底混匀56℃,1h第十四页，共一百零七页，2022年，8月28日4.结果+很小的凝集颗粒混浊-无凝集现象与对照相同++小、部分凝集块中等混浊+++大多凝集管底轻度混浊++++大的凝集块清亮凝集程度沉淀上清第十五页，共一百零七页，2022年，8月28日2、间接凝集反应(indirectagglutination):

将可溶性抗原吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体反应，出现肉眼可见的凝集现象。

载体种类人O型红细胞：

新鲜红细胞吸附蛋白质的能力差。一般先醛化后应用。聚苯乙烯胶乳颗粒：

可物理吸附蛋白质；常制备带有化学活性基团的颗粒第十六页，共一百零七页，2022年，8月28日载体可溶性抗原致敏致敏颗粒NS凝集颗粒第十七页，共一百零七页，2022年，8月28日

例1：类风湿因子的检测γ球蛋白（丙种球蛋白）乳胶颗粒包被类风湿患者血清发生凝集（+）抗人丙种球蛋白抗体2、间接凝集反应(indirectagglutination):

第十八页，共一百零七页，2022年，8月28日例2：库姆斯实验（Coombs）是利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，使红细胞凝集。抗人球法是检测不完全抗体的经典方法，其方法有两类。直接Coombs试验：是检查被检红细胞上有无不完全抗体。间接Coombs试验：是检查血清中游离的不完全抗体2、间接凝集反应(indirectagglutination):

第十九页，共一百零七页，2022年，8月28日不完全抗体就是半抗体，即此抗体能与相应的抗原结合，但在一定条件下无可见的抗原抗体反应现象。完全抗体是具有完整的Ig分子结构，经酶水解后可成片段Fab或F（ab`），而这2片段可表现不完全抗体的作用。不完全抗体是相对于完全抗体来说的。第二十页，共一百零七页，2022年，8月28日天然抗体与免疫血型抗体比较天然抗体免疫血型抗体性质完全抗体不完全抗体IgIgMIgG抗原刺激没有可察觉的抗原刺激经抗原刺激后才产生免疫发生的时间早期晚期分子量90万15万分子长度950250沉淀系数19S7S电泳分析IgM球蛋白IgG球蛋白对HDN的意义＊小大通过胎盘能力＊不能能反应温度＊4℃比37℃强（冷抗体）37℃（温抗体）对血型物质＊能被血型物质中和不被中和第二十一页，共一百零七页，2022年，8月28日IgM抗体在盐水介质中凝集红细胞示意图第二十二页，共一百零七页，2022年，8月28日IgG凝集红细胞示意图

IgG在盐水介质中一般不产生凝集第二十三页，共一百零七页，2022年，8月28日直接Coombs试验抗人球蛋白自身抗体致敏RBC可见凝集第二十四页，共一百零七页，2022年，8月28日间接Coombs试验抗人免疫球蛋白同种异型抗体第二十五页，共一百零七页，2022年，8月28日一、抗原与抗体的检测

----（2）沉淀反应沉淀反应：

可溶性抗原与相应抗体结合而发生的沉淀现象。1、单向免疫扩散（琼脂凝胶）；2、双向免疫扩散（琼脂凝胶）；3、免疫电泳（琼脂凝胶）；4、免疫比浊（液体）。第二十六页，共一百零七页，2022年，8月28日1、单向琼脂扩散2%琼脂加热溶解冷却至50℃左右加抗体混匀制琼脂板打孔（孔中加入相应抗原）

抗原扩散与抗体结合形成沉淀环其直径或面积与抗原浓度呈正相关（定量检测血清IgG、IgM、IgA和C3试验）

沉淀环直径抗原含量第二十七页，共一百零七页，2022年，8月28日2、双向琼脂扩散2%琼脂加热溶解制琼脂板打孔抗原与相应抗体在琼脂中扩散，相遇后形成沉淀线。AgAb常用于抗原或抗体的定性检测第二十八页，共一百零七页，2022年，8月28日3、免疫电泳

是将琼脂电泳和双向琼脂扩散结合起来，用于分析抗原组成的一种定性方法。用于血清蛋白种类分析等等。βα2α1γAIb-+人血清抗人血清βα2α1γAIb人血清家兔抗人血清免疫产生第二十九页，共一百零七页，2022年，8月28日4、免疫比浊法在一定量的抗体中分别加入递增量的抗原，经一定时间后形成免疫复合物。用浊度计测量反应液体的浊度，复合物形成越多则浊度越高，绘制标准曲线，根据浊度推算样品的抗原含量。该法快速简便，应用范围广泛，且适用于大批量标本的测定。第三十页，共一百零七页，2022年，8月28日一、抗原与抗体的检测

----（3）补体参与的反应将红细胞多次注射于动物（如将绵羊红细胞多次免疫家兔）可使之产生相应的抗体（溶血素）。溶血素与红细胞结合，若有补体存在，则红细胞被溶解，这种现象称为溶血反应。红细胞和溶血素被称为溶血系统，常在补体结合反应中用作测定有无补体游离存在的指示剂。第三十一页，共一百零七页，2022年，8月28日Ag？SRBC溶血素AbC1、将待测抗原系统加入已知抗体系统中。2、加入定量补体3、加入指示系统4、观察结果：不溶血（+）溶血（-）检测系统指示系统Ag？SRBC溶血素AbC第三十二页，共一百零七页，2022年，8月28日一、抗原与抗体的检测

--（4）用标记抗体或抗原进行的抗原-抗体反应用荧光素、酶或放射性核素等标记抗体或抗原，进行抗原抗体测定。1、免疫荧光法；2、酶免疫测定；3、放射免疫测定法；4、化学发光免疫分析；5、免疫印迹法（WesternBlot）.第三十三页，共一百零七页，2022年，8月28日(1)免疫荧光法：

荧光素标记抗体或补体等，进行免疫组化测定。检测组织切片、细胞涂片中的抗原。

常用的荧光素①异硫氰酸荧光素(FITC）－黄绿色荧光②藻红蛋白（PE）－红色荧光第三十四页，共一百零七页，2022年，8月28日(1)免疫荧光法：测定方法

（1）直接法-----荧光素标记特异性抗体（荧光直接标记一抗）（2）间接法-----荧光素标记二抗，二抗再与一抗结合

Ag小鼠特异性抗体（小鼠IgG）（一抗）小鼠IgG兔兔抗鼠IgG（荧光标记）（二抗）第三十五页，共一百零七页，2022年，8月28日细胞免疫荧光照片小肠组织免疫荧光照片第三十六页，共一百零七页，2022年，8月28日2、酶免疫测定当酶标记物与待测样品中相应的抗原或抗体相互作用时，可形成酶标记抗原抗体复合物。利用复合物上标记的酶催化底物显色，其颜色深浅与待测样品中抗原或抗体的量相关。灵敏度可达到ng~pg/ml水平。常用的标记物有辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）等。1、酶联免疫吸附试验(ELISA)---检测可溶性抗原或抗体2、免疫组织化学技术---检测组织或细胞的表面抗原第三十七页，共一百零七页，2022年，8月28日水冲水冲包被已知抗体加入待测抗原加入酶标抗体加入底物酶标仪测OD值底物待测抗原酶标抗另一表位抗体2、酶免疫测定（1）、双抗体夹心法第三十八页，共一百零七页，2022年，8月28日96孔板Elisa法染色结果第三十九页，共一百零七页，2022年，8月28日2、酶免疫测定（2）、间接法--（二抗法）水冲底物水冲第四十页，共一百零七页，2022年，8月28日第四十一页，共一百零七页，2022年，8月28日2、酶免疫测定（3）、BAS-ELISA:生物素-亲和素系统第四十二页，共一百零七页，2022年，8月28日小肠组织免疫组化结果HRP显色2、酶免疫测定----（4）、免疫组化法第四十三页，共一百零七页，2022年，8月28日3、免疫放射技术用放射核素（125I、131I）标记抗体或抗原。定量测定抗原抗体----高度敏感,达pg/ml水平。方法与ELISA相似常用于检测微量物质，如胰岛素、生长激素等。第四十四页，共一百零七页，2022年，8月28日4、化学发光免疫分析用发光物质（如吖啶酯等）标记抗体或抗原。定量测定抗原抗体----高度敏感,达pg/ml水平。常用于检测超微量物质，如甲状腺激素等。第四十五页，共一百零七页，2022年，8月28日5、免疫印迹法（WesternBlot）第四十六页，共一百零七页，2022年，8月28日5、免疫印迹法（WesternBlot）第四十七页，共一百零七页，2022年，8月28日第一节免疫诊断一、抗原与抗体的检测1、凝集反应2、沉淀反应3、补体参与的反应4、用标记抗体或抗原进行的抗原-抗体反应二、淋巴细胞的测定1、淋巴细胞的类别鉴定2、淋巴细胞功能测定三、免疫诊断方法的应用1、疾病的诊断2、免疫学监测

第四十八页，共一百零七页，2022年，8月28日二、免疫细胞及其功能检测(一)免疫细胞的类型与数量检测1、E花结试验2、尼龙棉分离法3、免疫磁珠分离法4、流式细胞术

(二)免疫细胞功能测定1、T细胞功能测定

(1)T细胞增殖试验(2)细胞毒试验(3)皮肤试验2、B细胞功能测定(1)B细胞增殖试验(2)抗体形成细胞测定3、细胞因子检测（elisa）第四十九页，共一百零七页，2022年，8月28日（一）、淋巴细胞的类别鉴定(1)外周血单个核细胞（PBMC）的分离PBMC:主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验中最常用的细胞群，也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。方法：葡聚糖-泛影葡胺（淋巴细胞分离液）密度梯度离心法第五十页，共一百零七页，2022年，8月28日血液中PBMC的密度与其他成分不同：血小板的密度为1.030～1.035，粒细胞为1.092，红细胞为1.093，淋巴细胞和单核细胞的密度为1.075。利用一种密度介于1.077近于等渗的溶液(分层液)进行密度梯度离心，可使不同类别的血细胞按其相应密度分布，从而被分离。常用的分层液有聚蔗糖-泛影葡胺分层液。第五十一页，共一百零七页，2022年，8月28日（一）、淋巴细胞的类别鉴定

（2）淋巴细胞亚群的分离

1、尼龙棉分离法：

因B淋巴细胞和单核细胞能黏附于尼龙纤维柱上（聚酰胺纤维柱），所以可将其与T淋巴细胞分离。

第五十二页，共一百零七页，2022年，8月28日（一）、淋巴细胞的类别鉴定

（2）淋巴细胞亚群的分离

2.E花环分离法

T细胞表面CD2分子+绵羊血红细胞→玫瑰花结

第五十三页，共一百零七页，2022年，8月28日（一）、淋巴细胞的类别鉴定

（2）淋巴细胞亚群的分离

3.洗淘法

细胞表面抗原特异性抗体包被在聚苯乙烯培养板

表达相应表面抗原的细胞被吸附

与悬液中的其它细胞相分离

第五十四页，共一百零七页，2022年，8月28日（一）、淋巴细胞的类别鉴定

（2）淋巴细胞亚群的分离

4.流式细胞术

(FlowCytometry,FCM)

是七十年代发展起来的高科学技术,它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体,同时具有分析和分选细胞功能。它不仅可测量细胞大小、内部颗粒的性状,还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等,在血液学、免疫学、肿瘤学、药物、分子生物学等学科广泛应用。

第五十五页，共一百零七页，2022年，8月28日流式检测原理第五十六页，共一百零七页，2022年，8月28日细胞亚群的检测细胞周期检测第五十七页，共一百零七页，2022年，8月28日第五十八页，共一百零七页，2022年，8月28日第五十九页，共一百零七页，2022年，8月28日（一）、淋巴细胞的类别鉴定

（2）淋巴细胞亚群的分离

5.磁分离技术

免疫磁性微珠用于细胞的分离和纯化的基本原理及步骤是：首先将抗特异细胞表面抗原的抗体致敏到磁珠上，待它与混合体系中的细胞反应后，利用磁力的作用，使与致敏结合的细胞与其它物质分离，达到纯化、分离的目的。

通常有二种分离方式：阳性分离和阴性分离。

阳性分离是直接从细胞混合液中分离出靶细胞，

阴性分离是利用磁珠去除无关细胞，使靶细胞得以分离。

第六十页，共一百零七页，2022年，8月28日免疫磁珠分离细胞已被广泛应用于人类各种细胞的分离，如T(CD3)、B(CD19)淋巴细胞、内皮细胞(CD34)、造血祖细胞(CD34)、单核/巨噬细胞(CD14)、胰岛细胞(胰岛GK和GLUT2（葡萄糖转运子）)、多种肿瘤细胞等。第六十一页，共一百零七页，2022年，8月28日（一）、淋巴细胞的分离与类型鉴定葡聚糖-泛影葡胺全血离心玻璃或塑料吸附单核细胞尼龙毛吸附B细胞T细胞单个核细胞抗IgD、IgMB细胞抗CD4抗CD8CD4+T细胞CD8+T细胞抗CD8CD4+T细胞CD8+T细胞抗CD4磁珠法、淘选法、流式细胞术第六十二页，共一百零七页，2022年，8月28日（一）、淋巴细胞功能测定

（1）T细胞功能测定

1、T细胞增殖试验：

2、细胞毒试验：

3、皮肤试验（见超敏反应）

1．3H-TdR掺入法2．MTT比色法（已被CCK8法替代）1．51Cr释放法2.乳酸脱氢酶释放法3．Tunel法第六十三页，共一百零七页，2022年，8月28日（1）T细胞功能测定T细胞在体外受到有丝分裂原或抗原的刺激后，细胞的代谢和形态发生变化，主要表现为胞内蛋白质和核酸合成增加，发生一系列增殖反应，如细胞变大、胞质增多、胞质现空泡、核染色质疏松、核仁明显，并转化为淋巴母细胞。淋巴细胞增殖反应又称淋巴细胞母细胞转化。第六十四页，共一百零七页，2022年，8月28日常用刺激物体外刺激T细胞增殖反应的刺激物包括植物血凝素(PHA)刀豆素A(ConA)美洲商陆(PWM)白喉类毒素破伤风类毒素纯化蛋白衍生物(PPD)白色念珠菌第六十五页，共一百零七页，2022年，8月28日第六十六页，共一百零七页，2022年，8月28日1、T细胞增殖试验：2．MTT比色法（已被CCK8法替代）1．3H-TdR掺入法--进入增殖期的T细胞CCK8可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。第六十七页，共一百零七页，2022年，8月28日（1）.51Cr释放法：应用放射性同位素（如51Cr）标记靶细胞，当靶细胞受到NK细胞攻击，靶细胞被破坏，释放出51Cr。51Cr辐射γ射线，通过测定受损伤或死亡靶细胞释放到上清中51Cr的放射脉冲数（cpm)，即可计算出NK细胞活性。2、细胞毒试验第六十八页，共一百零七页，2022年，8月28日2、细胞毒试验存在于细胞内，正常情况下，不能透过细胞膜。当细胞受到损伤时，LDH可从细胞内释放至培养液中。释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中，使氧化型辅酶I(NAD+)变成还原型辅酶(NADH)，后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化氮唑蓝(INT)或硝基氯化四氮唑蓝(NBT)形成有色的甲基化合物，在570nm波长处有一吸收峰，利用读取的Ａ值，可测得杀伤细胞毒活性。（2）、乳酸脱氢酶释放法第六十九页，共一百零七页，2022年，8月28日2、细胞毒试验（3）、第七十页，共一百零七页，2022年，8月28日（一）、淋巴细胞功能测定

（2）B细胞功能测定

1、B细胞增殖试验：

2、抗体形成细胞测定：溶血空斑试验

1．3H-TdR掺入法2．MTT比色法（已被CCK8法替代）第七十一页，共一百零七页，2022年，8月28日溶血空斑是检测空斑形成细胞即B淋巴细胞分泌抗体功能的一种体外实验方法，可检测机体体液免疫功能状况。用绵羊红细胞免疫小鼠，取小鼠脾脏制成细胞悬液，与一定量的SRBC混合后加入琼脂糖凝胶中，其中每一个有活性的B细胞所产生的溶血素可致敏周围的SRBC，在补体的参与下，SRBC溶解，形成肉眼可见的溶血斑，空斑的数目代表抗体生成细胞的多少，空斑的大小代表反映抗体生成细胞产生抗体的能力。第七十二页，共一百零七页，2022年，8月28日第七十三页，共一百零七页，2022年，8月28日第一节免疫诊断一、抗原与抗体的检测1、凝集反应2、沉淀反应3、补体参与的反应4、用标记抗体或抗原进行的抗原-抗体反应二、淋巴细胞的测定1、淋巴细胞的类别鉴定2、淋巴细胞功能测定三、免疫诊断方法的应用（自学）1、疾病的诊断2、免疫学监测

第七十四页，共一百零七页，2022年，8月28日第二节免疫防治一、免疫学预防1、人工主动免疫2、人工被动免疫3、计划免疫二、免疫学治疗1、主动免疫治疗2、被动免疫治疗三、生物应答调节剂1、生物制剂2、化学合成药物

第七十五页，共一百零七页，2022年，8月28日天花天花病毒:Smallpoxvirus是DNA病毒牛痘是一种温和的天花病毒出疹的木乃伊（疑为天花）躯干皮肤天花损伤1979年WHO宣布在全球范围内消灭了天花病毒。也是到目前为止，在世界范围被人类消灭的唯一一个传染病第七十六页，共一百零七页，2022年，8月28日Jenner和Pasteur,著名的免疫学家，公认为免疫接种和主动免疫的先驱。EdwardJennerLouisPasteur第七十七页，共一百零七页，2022年，8月28日第二节免疫防治一、免疫学预防1、人工主动免疫2、人工被动免疫3、计划免疫二、免疫学治疗1、主动免疫治疗2、被动免疫治疗三、生物应答调节剂1、生物制剂2、化学合成药物

第七十八页，共一百零七页，2022年，8月28日一、免疫学预防天然获得性免疫人工获得性免疫人工主动免疫(疫苗)人工被动免疫（免疫血清）获得性免疫天然主动免疫（自然感染）天然被动免疫（母源抗体）第七十九页，共一百零七页，2022年，8月28日疫苗（vaccine）:人工主动免疫所使用的抗原。1、人工主动免疫

------机体输入抗原性物质，产生类似感染的免疫过程。新型疫苗传统疫苗----抗微生物感染的疫苗1、灭活疫苗（死疫苗）2、减毒活疫苗3、类毒素第八十页，共一百零七页，2022年，8月28日传统疫苗（TraditionalVaccine）用减毒或无毒的活病原微生物用理化方法将病原微生物杀死制备的生物制剂第八十一页，共一百零七页，2022年，8月28日1、传统疫苗

---（1）灭活疫苗（死疫苗，inactivatedvaccine）定义：免疫原性强的病原体，经人工大量培养后，用理化方法灭活而制成。特点：常用灭活疫苗：伤寒、白日咳、狂犬病、流感等。副作用：注射后可能引起较严重的局部和全身反应。1、诱导体液免疫，维持血清抗体水平；2、多次免疫；3、不诱导细胞免疫。第八十二页，共一百零七页，2022年，8月28日流感疫苗制备流程第八十三页，共一百零七页，2022年，8月28日1、传统疫苗

----（2）减毒活疫苗(live-attenuatedvaccine)定义：减毒或无毒力的活病原微生物制成。特点：常用活疫苗：卡介苗、麻疹活疫苗等。不足：1、疫苗体内回复突变；2、免疫缺陷者和孕妇不宜接受活疫苗；3、不宜保存，易失效。1、诱导体液免疫和细胞免疫；2、一次免疫；3、免疫效果良好、持久。第八十四页，共一百零七页，2022年，8月28日减毒活疫苗牛型结核杆菌

Mycobacteriumbovis置于含胆汁的培养基，逐渐增加胆汁的浓度卡介苗BacillusCalmette-Guerin（BCG）在胆汁中适应性生长，充分减毒成为预防肺结核的疫苗13年230次传代法国科学家CalmetteGuerin第八十五页，共一百零七页，2022年，8月28日死疫苗和活疫苗的比较区别点灭活疫苗减毒活疫苗制剂特点死、强毒株活、弱毒或无毒接种剂量及次数较多，2-3次较少，1次副作用较大较小保存及有效期易保存，较稳定易失效，4℃保存免疫效果较差，维持数月至2年较好，维持3-5年或更长第八十六页，共一百零七页，2022年，8月28日1、传统疫苗

----（3）类毒素(toxoid)定义：细菌外毒素经1.3%-0.4%甲醛处理而成，无毒性，保留免疫原性。诱导机体产生抗毒素，从而中和外毒素的毒性。疫苗：破伤风类毒素、白喉类毒素毒素类毒素毒素抗原决定簇第八十七页，共一百零七页，2022年，8月28日2、现代疫苗（Modernvaccine）：采用生物化学合成技术、人工变异技术、分子微生物学技术、基因工程技术等现代生物技术制造出的疫苗，是近年来新发展的疫苗。包括：1、亚单位疫苗；2、结合疫苗；3、合成肽疫苗；4、核酸疫苗；6、转基因植物疫苗。第八十八页，共一百零七页，2022年，8月28日2、新型疫苗

----（1）亚单位疫苗(subunitvaccine)定义：提取或合成细菌、病毒外壳的特殊蛋白结构，即抗原决定簇制成的疫苗，不是完整的病毒，而是病毒的一部分物质。特点：仅有几种主要表面蛋白，能消除病原体的无关抗原决定簇诱发的不良反应。疫苗：乙型肝炎疫苗、百日咳疫苗、多糖疫苗(结合疫苗)。第八十九页，共一百零七页，2022年，8月28日灭活疫苗、减毒活疫苗和亚单位疫苗三类疫苗的比较灭活疫苗减毒活疫苗亚单位疫苗制备方法通过化学或物理方法使病原体失活通过非正常培养选择减毒株或无毒株以化学方法获得病原体的某些具有免疫原性的成分免疫机理病原体失去毒力但保持免疫原性，接种后产生特异抗体或致敏淋巴细胞接种后病原体在体内有一定生长繁殖能力，类似隐性感染，产生细胞、体液和局部免疫接种后能刺激机体产生特异性免疫疫苗稳定性相对稳定相对不稳定稳定毒力回升不可能有可能不可能免疫接种多次免疫接种一般为一次性多次免疫接种安全性较安全对免疫缺陷者有危险安全性好常用疫苗乙脑、脊髓灰质炎灭活疫苗麻疹、脊髓灰质炎减毒活疫苗白喉、破伤风类毒素，A群脑膜炎球菌多糖疫苗第九十页，共一百零七页，2022年，8月28日2、新型疫苗

----（2）结合疫苗(conjugatevaccine)定义：

化学方法细菌荚膜—————白喉类毒素→T细胞依赖性抗原多糖的水解物（蛋白质载体）（TI-Ag）（TD-Ag）特点：提高细菌疫苗多糖抗原的免疫原性；被T、B细胞所结合，产生IgG抗体。疫苗：b型流感嗜血杆菌结合疫苗；脑膜炎球菌结合疫苗；肺炎球菌结合疫苗等。第九十一页，共一百零七页，2022年，8月28日2、新型疫苗

----（3）合成肽疫苗(syntheticpeptidevaccine)定义：

人工设计、合成的含免疫决定簇组分的小肽通常合成的肽链上含有被B、Th、CTL识别的表位。常用脂质体作为免疫原性多肽的交联载体。

特点：可诱导体液免疫和细胞免疫。

第九十二页，共一百零七页，2022年，8月28日2、新型疫苗

----（4）核酸疫苗(syntheticpeptidevaccine)定义：

是利用基因重组技术将编码某种蛋白抗原的外源基因导入动物体细胞内，在宿主细胞内表达外源抗原基因，从而诱导宿主产生对该抗原的免疫应答。特点：可同时诱导体液免疫应答和细胞免疫应答；制备工艺简单，生产成本低，适于大批量生产。比传统疫苗安全。性质稳定，易于保存、运输。可生产多价疫苗，同时预防多种病原体感染。第九十三页，共一百零七页，2022年，8月28日2、新型疫苗

----（5）转基因植物疫苗定义：

将目的抗原基因导入可食用植物中，植物可食用部分稳定表达外源基因产物，通过摄食而被免疫接种初期研制阶段。第九十四页，共一百零七页，2022年，8月28日2、人工被动免疫定义：将含特异性抗体的血清或细胞因子等制剂注入人体，使机体被动地获得特异性免疫力而受到保护。特点：并非由被接种者产生，缺乏主动补给的来源，因而接种后免疫效果维持时间短暂，一般约2~3周。应用：疫情发生时的紧急预防或治疗。第九十五页，共一百零七页，2022年，8月28日2、人工被动免疫

-----（1）免疫血清（immuneserum）定义：是指细菌外毒素或类毒素免疫动物而制备的免疫血清。特点：

体内停留和作用时间短。注意：

免疫血清为动物血清，含有大量异体蛋白，易产生过敏反应，使用时必须作过敏试验，阴性者方可应用。第九十六页，共一百零七页，2022年，8月28日2、人工被动免疫

----（2）、人免疫球蛋白制剂定义：是从大量混合血浆或胎盘血中分离制成的免疫球蛋白浓缩剂。特异性免疫球蛋白：由对某种病原微生物具有高效价抗体的血浆制备，用于特定