GMP质量体系醋酸可的松检验操作规程

PAGE4PAGE1目的：为检验醋酸可的松规定标准的程序，以便获得准确的实验数据。范围：适用于醋酸可的松的检验。职责：检验室主任、检验员。规程：1.性状：本品为白色或几乎白色结晶性粉末，无臭，初无味，随后有持久的苦味。本品在氯仿中易溶，在丙酮或二氧六环中略溶，在乙醇或乙醚中微溶，在水中不溶。1.1比旋度：取本品精密称取250mg置于量瓶，加二氧六环溶解并稀释至刻度，摇匀，依法（SOP--QC--310--00）测定,比旋度为+210°至+217°为符合规定。计算：a：旋光仪读数；w：样品称重量（mg）；B：水分含量（%）1.2吸收系数：精密称取本品50mg置于100mg量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精吸2ml置于100ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（SOP-QC-301-00），在241nm的波长处测定吸收度，吸收系数为383—407为符合规定。2.鉴别:2.1试剂与仪器2.1.1甲醇 2.1.2硫酸苯肼试液2.1.3硫酸 2.1.4乙醇制氢氧化钾试液2.1.5硫酸溶液（1→2） 2.1.6烧杯2.1.7电子天平（万分之一g） 2.1.8移液管（1ml,2ml,10ml,）2.1.9红外光谱仪 2.2项目与步骤2.2.1取本品约0.1mg，加甲醇1ml溶解后，加新制的硫酸苯肼试液8ml，在70°加热分钟15分钟，即显黄色，为符合规定。2.2.2取本品约2mg，加硫酸2ml使溶解，放置5分钟，显黄色或微带橙色；加水10ml，稀释后颜色即消失，溶液应澄清，为符合规定。2.2.3取本品约50mg，加乙醇制氢氧化钾试液2ml，置于水浴加热5分钟，放冷加硫酸溶液（1→2）2ml，缓缓煮沸1分钟，即发生醋酸乙酯的香气为符合规定。2.2.4取本品，按红外光光度法（SOP—QC—302—00）检验，红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集544图）一致为符合规定。3．检查3.1试剂与仪器3.1.1氯仿—甲醇（9：1） 3.1.2碱性四氮唑试液3.1.3二氯甲烷—乙醚—甲醇水（385：60：15:2）3.1.4硅胶G薄层板3.1.5移液管（2ml）3.1.6容量瓶（200ml、100ml）3.1.7层析缸3.1.8烘箱3.1.9电子天平(万分之一克)3.1.10微量进样器3.1.11喷雾器3.1.12称量瓶3.2项目与步骤3.2.1其它甾体：取本品，精密称取100mg置于10ml量瓶中，加氯仿—甲醇（9：1）溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取2ml置200ml量瓶中加氯仿-甲醇（9:1）稀释至刻度，依为对照溶液。照薄层色谱法（SOP-QC-304-00）试验，吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙醚-水（385：60：15：2）为展开剂，展开后，晾干，在105℃干燥10分钟，放冷。喷以碱性四氮啖蓝试液，立即检视，供试品溶液如显杂质斑点，不得多于3个，其颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深为符合规定。3.2.2干燥失重：称取本品约1g，置称量瓶中，按干燥失重测定法（SOP-QC-325-00）在105℃干燥至恒重，减失重量不得过0.5%为符合规定。4.含量测定4.1试剂与仪器4.1.1C18硅胶色谱柱4.1.2甲醇炔诺酮4.1.3醋酸可的松对照品4.1.4溶量瓶（25ml,100ml）,单标移液管（5ml）4.1.5注射器（10ml），过滤器，滤膜4.1.6电子天平(万分之一克),称量瓶4.1.7高效液相色谱仪4.2检验步骤:按高效液相色谱法（SOP-QC-306-00）检测。4.2.1色谱条件和系统适用性试验:用C18硅胶色谱柱，流动相为甲醇-水（70：30），流速为1.0ml/min，检测波长为240nm，量取醋酸可的松对照溶液与内标溶液的混合对照溶液[*]10ml，注入液相色谱仪，醋酸可的松峰与内标物质峰的分离度不得少于1.5，理论板数按醋酸可的松峰计算应不得低于2700。4.2.2内标溶液的制备：取炔诺酮40mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。4.2.3醋酸可的松对照溶液与样品混合溶液的制备用测定：醋酸可的松与内标物溶液的混合对照溶液的制备：取醋酸可的松对照品50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。[*]精密量取上述溶液与内标准溶液各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为混合对照溶液。样品溶液与内标物溶液混合溶液的制备：取样品50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液与内标物溶液各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，量取10µl注入液相色谱仪，将醋酸可的松的混合对照溶液按同法测定。按下式计算本品中醋酸可的松（C23H3O6）的折干含量，应在97.0%～103.0%。为符合规定。Cd：本品的折干含量；Cw：本品的混合含量；B%：本品的含水百分数；WS：内标物的称样量（g）；AS：内标物溶液中炔诺酮的峰面积或峰高；A1：样品溶液中醋酸可的松峰高面积或峰高；A1：样品的称样量（g）；f：为校正因子；AS、、WS同上式意义；A2：醋酸可的