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文档简介
第十一章
高效毛细管电泳分析法一、离子分析analysisofion二、药物分析analysisofpharmaceutics三、手性化合物分析analysisofchiralcompounds四、氨基酸分析analysisofaminoacids五、核酸分析及DNA测序analysisofnucleicacidsandsequenceofDNA六、新进展及热点问题advancesandspecialtopics第五节
高效毛细管电泳应用与进展highperformancecapillaryelectrophoresis,HPCEapplicationandadvancesofHPCE2023/1/13一、离子分析
analysisofion阳离子分析
迁移方向和电渗流方向一致;4.5min内分离了24种金属离子;阳极进样,阴极检测;具有很高的灵敏度;2023/1/13阴离子分析阴离子电泳方向和电渗流方向相反、速度接近,分析时间长、效率低;质量小、电荷密度大的离子如:SO4-2、Cl-、F-等,电泳速率大于电渗流,阳极端流出,在阴极端无法检测;加入电渗流改性剂,十六烷基三甲基溴化胺等,使电泳方向和电渗流方向一致,可在3.1min内分离36种阴离子;阴极进样,阳极检测;离子价态及存在形态分析;2023/1/13二、药物分析
analysisofpharmaceutics
检测体液或细胞中某些代谢产物的分析;尿液中的氨基酸含量作为临床诊断糖尿病的辅助手段;采用毛细管区带电泳方式,在11min内分离17种药物;2023/1/13采用MEKC模式,鉴定违禁药物;效果优于HPLG法2023/1/13三、手性化合物分析
analysisofchiralcompounds
合成获得单一手性化合物相当困难;528种手性合成药物,61中以单一对映体形式销售,其他为外消旋体;检测分析也相当困难;研究热点;R-反应停是安眠药,S-式致胎儿畸形;
HPCE分离分析手性化合物的方法:加入手性选择剂;形成配合物的稳定常数有差异,结合HPCE的高效率;常用手性选择剂:环糊精及其衍生物;手性冠醚;手性表面活性剂(氨基酸衍生物、胆酸钠、牛磺脱氧胆酸及其钠盐、低聚糖等天然手性表面活性剂)2023/1/13四、氨基酸与蛋白质分析
analysisofaminoacids采用MEKC模式,在25分钟内分离了23种丹酰化氨基酸;HPCE可取代传统的氨基酸分析仪;问题:吸附和检测;2023/1/13蛋白质分析2023/1/13五、核酸分析及DNA排序
analysisofnucleicacidsandsequence
ofDNA重要分析手段;图,酶解的双螺旋DNA限制性片段的分离;2023/1/13六、新进展
advancesandspecialtopics1.微型化
整体化学分析系统(TAS)及TAS微型化在硅片上光刻出矩形槽作为毛细管,理论塔板数105/m;2.联用仪器
CE-MS;3.阵列毛细管凝胶电泳
应用于人类基因DNA测序;5~10万个基因,30亿个碱基对,目前最有效的DNA序列分析仪,10小时/次;可同时电泳24个样品;速度1200碱基对/小时,提高速度!100支毛细管阵列电泳;速度280碱基对/小时/支2023/1/13请选择内容第一节概述generalization第二节高效毛细管电泳的理论基础basictheoryofHPCE第三节高效毛细管电泳仪器highperformancecapillaryelectrophoresisapparatus第四节高
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