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文档简介

实验二细胞器的观察

一、目的要求

1.掌握油镜的使用方法。2.观察并熟悉光镜下线粒体和高尔基复合体的形态特征。3.掌握细胞骨架的显示方法。4.了解光镜下细胞骨架的基本形态结构。二、实验材料和用品洋葱鳞茎、蛙肾脏切片、兔脊神经节切片；光学显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸二甲苯、香柏油等；

PBS、M-缓冲液、2%TritonX-100、0.2％考马斯亮兰染液等。

㈠实验原理真核细胞内存在多种具有特殊形态结构和功能的细胞器，它们可分为膜性细胞器和非膜性细胞器，通过不同的染色方法，在普通光镜下可以看到细胞的这些显微结构。三、实验内容适当浓度的TritonX-100能溶解质膜结构中及细胞内许多蛋白质，骨架系统不被破坏。油镜的使用方法高倍镜找到观察标本并移至视野中央滴加香柏油观察擦拭干净显微镜复位㈡实验方法细胞器的观察蛙肾脏切片－观察线粒体；兔脊神经节切片－观察高尔基复合体；洋葱鳞茎表皮－制做细胞骨架临时装片；蛙肾脏切片－线粒体兔脊神经节切片－高尔基复合体

洋葱鳞茎表皮－制做细胞骨架临时装片取材：洋葱鳞叶表皮浸入PBS中5分钟；2%TritonX-100处理：37℃，25分钟；M-缓冲液冲洗2次，每次5分钟；3%戊二醛固定10分钟，PBS洗2次/3分钟；0.2％考马斯亮兰染色8分钟；PBS洗2次/3分钟；镜检。

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