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文档简介
实习十血液常规检验(二)一、实验时间2学时二、实验地点内科诊断实验室三、目的和要求掌握白细胞分类计数(DC)的操作技术,了解其临床意义。四、内容和方法白细胞分类计数(DC)1、原理:细胞的染色反应,决定于细胞的化学结构对染色物质的亲和力。将血液制成涂片,经染色后镜检,根据显示各种细胞形态和着色特点,测定血液中各种类型白细胞的百分数。2、试剂与设备:
瑞氏染色液、磷酸盐缓冲液、二甲苯、香柏油、载玻片、染色盆及支架、擦镜纸、吸水纸、白细胞分类计数器、显微镜。
3、方法①血片的制作:左手持载玻片两端,右手持推片,取被检血一滴滴于载片一端,推片一端与血接触呈45°角,并使其血液自由沿推片边缘扩散,待均匀后,以同等速度轻轻向另一端推动,使血均匀地涂抹在载片上。让其自然干燥,待染。
注意:载玻片必须无油脂、洁净、干燥。否则会影响血细胞形态。
②瑞氏染色步骤:将干燥的血片,置于染色架上,滴加瑞氏染液于血片上,并计其滴数,直至将血膜浸盖为止。待染1~2min加等量的缓冲液或蒸馏水,并轻轻吹动使其混匀。放置染色5~10min,然后用蒸馏水冲洗,吸干,油镜观察。注意:冲洗时应将蒸馏水直接向血膜上倾倒,使液体自血边缘溢出,沉淀物从液面浮去。切勿先将染液倾去再冲洗,否则沉淀物附着于血膜上不易冲掉。染色良好的血片呈樱红色如呈淡紫色,是染色时间过长如呈红色是染色时间过短。下页:各种白细胞的形态特征(瑞氏染色法)③白细胞分类计数法:白细胞分类时先用低倍镜观察白细胞的分布然后滴上香柏油,用油镜观察计数。采用四角区法计数(在血片的四角各取一点,在此区域内各计数25个,共计100个白细胞)按各类的白细胞所占有的百分数,计算其比值。白细胞种类细胞核细胞浆位置形状颜色核染色质细胞核膜多少颜色透明带颗粒嗜中性幼年型偏心性椭圆红紫色细致不清楚中等蓝色或粉红色无红或蓝,细致或粗糙嗜中性杆状核中心或偏心性马蹄或蜡肠性浅紫蓝色细致存在多粉红色无嗜中、嗜酸或嗜碱嗜中性分叶核中心或偏心性3~5叶者居多深紫蓝色粗糙存在多浅粉红色无粉红色或紫红色嗜酸性白细胞中心或偏心性2~3叶者居多较浅紫蓝色粗糙存在多蓝色或粉红色无深红,分布均匀,马的最大,其他动物次之嗜碱性白细胞中心性叶状核不太清楚较浅紫蓝色粗糙存在多浅粉红色无蓝黑色,分布不均匀,大多数在细胞的边缘淋巴细胞偏心性圆形或微凹入深紫蓝色大块或中等块或致密致密少天蓝深蓝或淡红色胞浆深染时有无或有少数嗜亚尼林蓝色颗粒大单核细胞中心或偏心性豆性山字形椭圆形淡蓝紫色细致网状边缘不齐存在很多灰蓝或云蓝色无很多,非常细小、淡紫色嗜碱性白细胞淋巴细胞浆细胞单核细胞嗜碱性白细胞大单核细胞思考题1、临床实验室检查时,如何进行白细胞
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