丙型肝炎病毒的生物危害评估报告

丙型肝炎病毒的生物危害评估报告丙型肝炎病毒的传播与致病1212HCV30-90%输血后肝炎为丙型肝炎，我国输血后肝炎中丙型肝炎占1/3。此外还可通过其他方式如母婴垂直传播，家庭日常接触和性传播等。输入含HCVHCV-RNA的血浆或血液制品，一般经73T上升，抗HCV50%可进展为慢性肝炎，甚至局部病人会导致肝硬及肝细胞癌。其余约半数病人为自限性，可自动康复。丙型肝炎发病机理仍未格外清楚，当HCV在肝细胞内复制引起肝细胞构造和功能转变或干扰肝细胞蛋白合成，可造成肝细胞变性坏死，说明HCV直接损害肝脏，导致发病起肯定作用。但多数学者认为细胞免疫病理反响可能起重要作用，觉察丙型肝炎与乙型肝炎一样，其组织浸润细胞以CD3+为主，细胞毒T细胞〔TC〕HCV感染的靶细胞，可引起肝细胞损伤。临床观看资料说明，人感染HCV后所产生的保护性免疫力很差，能再感染不同，甚至局部病人会导致肝硬化及肝细胞癌。其余约半数病人为自限性，可自动康复。结核杆菌通常指结核分枝杆菌和牛分枝杆菌〔Mycobacteriumtuberculosis〕是引起人类结核病的主要病原体。话时随呼吸道分泌物排出到空气中，或排菌的肺结核病人随地吐痰通过再生气溶胶(尘埃)，(尤其是痰涂片阳性未经治疗者)是结核病的主要传染源。一般结核病患者痰中结核杆菌越多，传播的危急性越大。患者排出的飞沫在1-10微米者，在空气中漂移时间长，传染性越大。患患者同处于空气不流通的室内的亲热接触者，受感染的可能性增大。猪、猫、狗等也都可以患结核病。2个月～20年才发病。典型肺结核起病缓慢，病程较长，有低热、倦怠、食欲不振、咳嗽及少量咯血。但多数患者病〔1〕病症①全身病症表现为午后低热、乏力、食欲不振、消瘦、盗汗等。②呼吸系统病症通常为干咳或带少量黏液痰；继发感染时，痰呈粘液脓性。约1/3患者有不同程度咯血，咯血后常有低热。大咯血时可发生失血性休克，偶因血块堵塞大而加重。假设并发气胸或大量胸腔积液，呼吸困难病症尤为严峻〔2〕体征早期病灶小或位于肺组织深部，多无特别体征。假设病变范围较大，患侧肺部呼吸运动减弱，叩诊呈浊音，听骨上下、肩胛区叩诊略浊，咳嗽后偶可闻及湿啰音，对诊断有参考意义。肺部病变发生广泛偿性肺气肿征。二、结核杆菌的生物学特性从分类学上看结核杆菌属于裂殖菌纲、放线菌目、分枝杆菌科、分枝杆菌属。1-4纳米，宽0.3-0.6V、T、Y”形排列，菌体多时细菌扭集一起呈绳索状、束状或丛状。此外结核杆菌菌体还具有多形态特征，受不良生长条件的影响可分别表现为杆菌型(根本形态)、滤过型、颗粒型和球菌型(L型)4种不同的类型。分枝杆菌生长缓慢，在人工培育基内生殖一代约需15-20小时，一般需2-4周或更长时间始8周以上才开头有菌落生长35-40℃，pH5.5-7.2生菌落形态、毒力、L型及药物耐药性变异，如在人工培育基上反复连续传代，可产生变异而致毒力降低。三、丙型肝炎病毒的检测与诊断一、试验室检查〔一〕血常规急性肝炎初期白细胞总数正常或略高，一般不超过10×109/L，黄疸期白，红细胞下降，血红蛋白下降。肝炎肝硬化伴脾功能亢进可有血小板、红细胞、白细胞削减的“三少”现象。〔二〕尿常规尿胆红素和尿胆原的检测是早期觉察肝炎的简易有效方法，同时有助于黄素为主。深度黄疸或发热患者，尿中除胆红素阳性外，还可消灭蛋白质、红、白细胞或管型。〔三〕肝功能检查1、血清酶测定1〕丙氨酸氨酶，曾称为谷丙氨酶：是目前林装上反映肝细胞功能的最常用指标。ALT在肝细胞损伤时释放入血流。血清ALT上升，对肝病诊断的特异性比天冬氨酸氨酶〔AST〕ALTASTALT明显上升，AST/ALT1ALTALT轻度或中度上升或反复特别，AST/ALT常大于1。比值越高，则预后愈差，病程中AST/ALT比值降低，提示未ALT胆分别现象，提示肝细胞大量坏死〕天冬氨酸转氨酶，曾称为谷草转氨酶：此酶在心肌含量最高，依次为肝、骨骼肌、肾、胰。在肝脏，AST80％存在于肝细细胞线粒体中20AST上升，与肝病严峻程度呈正相关。当病变长久且较严峻ASTAST持续在高水平，有转为慢性肝炎的可能。心肌其其他脏器细胞受损时，AST亦上升，应予以鉴别，以免此类疾病被肝炎病症所掩盖3Y谷氨酰胎酶Y：肝炎和肝癌患者可显著上升，在胆管堵塞的状况下更明显，YGT活性变化与肝病病理转变有良好的全都性〔5〕胆碱酯酶：由肝细胞合成，其活性降低提示肝细胞已有较明显损伤，其值愈低，提示病情愈重。6〕碱性磷酸酶P或：正常人血清中TP测定主要用于肝病和骨病的临床诊ALP血清P活性上升。2、血清蛋白主要由比蛋白A，1、2、β及Y球蛋白组成。前4种主要由肝细胞合成，Y21型肝炎时消灭白蛋白下降，Y球蛋白上升，白/球〔A/G〕比例下降甚至倒置。血清蛋白电泳分析则从另一角度来检测白、球蛋白各成份的相比照值，起到一样的诊断作用。3慢，重型肝炎常超过171vmol/L。一般状况下，肝损程度与胆红素含量呈正相关。直接胆红素在总胆红素中的比例尚可反映淤胆程度。4、凝血酶原活动度〔PTA〕PTA凹凸与肝损程度成反比。＜40％是诊断重型肝炎的重要依据，亦是推断重型肝炎预后的敏感指标。5〔四〕其他生化指标检测1、电解质重型肝炎常见低KNaCICa2Mg2＋、低P2K＋。2、血糖超过40％的重型肝炎患者有血糖降低。临床上应留意低血糖昏迷与肝性脑病的鉴别。3、血浆胆固醇60％—80成削减，故血浆胆固醇明显下降，胆固醇愈低，预后愈险恶。梗阻性黄疸时胆固醇上升。4CH50C3补体对预后有评估作用。5、甲胎蛋白〔AFP〕HBVHCVHCC的发生有明显相关性，AFP含量的检测是HCCAFP均有不同程度的上升，应进展动态观看。急性重型肝炎AFP上升时，提示有肝细胞再生，为预后良好的标志。6、胆汁酸血清中胆汁含量很低，当肝炎活动时胆汁酸上升。由于肝脏对胆红素和胆汁酸的运转活动不同，检测胆汁酸有助于鉴别胆汁淤积和高胆红素血症。〔五〕肝纤维化指标一些检测工程已在临床上应用，如3型较胶原体，4型胶原、层连蛋白、透亮质酸、脯氨酰羟化酶等，对肝纤维化的诊断有肯定参考价值，但缺乏特异性。〔六〕病原学检查〔1〕HCVIgMHCVIgG：HCV抗体不是保护性抗体，HCV感染的标志。HCVIgmHCV感染，抗HCVIgG阳性提示现正感染或既往感染。抗HCVIgM的检测受较多因素的影响，如球蛋白、RF等，稳定性不如抗HCVIgG。目前国内多用酶免疫试验〔EIA〕HCVIgG，试剂质量与国外第三代诊断试剂持平。抗HCVIgG低滴度提示病毒处于静止，高滴度提示病毒复制活泼〔2〕HCVRNA：HCV在血液中含量很少，分PCRHCVRNAPCR以提高检出率。由于影响因素较多及技术要求较高易产生假阳性和假阴性，分析结果时应结合临床做出正确推断。HCRNAHCVRNAbDNA探针技术、竞争PCR法、荧光定量法等，定量测定有助于了解病毒复制程度、抗病毒治疗的选择及疗HCVRNA尚可进展基因分型，方法包括序列测定、PCR、酶切、探针杂交等，基因分型在流行病学和抗病毒治疗等方法有肯定意义，但不作为常规。HCVHBVHCVHCVRNA，一般单位难开展此工程。〔七〕影像学检查B型超声有助于鉴别堵塞性黄疸、脂肪肝及肝内占位性病变。对肝硬化有较高的诊断价值，能够反映肝脏外表变化，门静脉、脾静脉直径，脾脏大小，胆囊特别等。CT、MRI的应用价值根本同B超，但价格较昂贵，且有不同程度的损伤性，如应用增加剂，可加重病情〔八〕肝组织病理检查是明确诊断、衡量炎症活动度、纤维化程度及评估疗效的金标准。还可在肝组织中原位检测病毒抗原或核酸，以助确定病毒复制状态。二、诊断〔一〕流行病学资料有输血及血制品、静脉吸毒、血液透析、多共性伴侣、怀孕或哺HCV感染等病史的肝炎患者应疑心丙型肝炎。〔二〕临床诊断1、急性肝炎起病较急，常有畏寒、发热、乏力、头痛、纳差、恶心、呕吐等急性感染或黄疸前期病症。肝大质偏软，ALT显著上升。黄疸型肝炎血清胆红素＞17.1umol/L，尿胆红素阳性。黄疸型肝炎的黄疸前期、黄疸期、恢复期三期经过明显，病程6个月以内。2者。常有乏力、厌油、肝区不适等病症，可有肝病面容、肝掌、痴、胸前毛系血管扩张、肝〔表3—1—2〕度。3、重型肝炎主要有：极度疲乏；严峻消化道病症如频繁呕吐、呃逆；黄疸快速加深消灭胆酶分别现象；肝脏进展性缩小；出血倾向，PTA＜40％，皮肤、粘膜出血；消灭肝性脑病，周内消灭Ⅱ度以上肝性脑病或其他重型肝炎表现者，为急性重型肝炎；15天至20周消灭上述表现者为性肝炎病史。乏力，腹胀，尿少，肝掌，痴，脾大，腹水，脚肿，胃底食管下段静脉曲张，白蛋白下降，A/G倒置等肝功能受损和门脉高压表现。〔三〕病原学诊断丙型肝炎具备急、慢性肝炎临床表现，抗HCVHCVRNA阳性，可诊断为丙型肝炎。无任何病症和体征，肝功能和肝组织学正常者为无病症HCV携带者。三、预后1、急性肝炎多数患者在350％—80％转为慢性或病毒携带。2、慢性肝炎轻度慢性肝炎患者一般预后良好；重度慢性肝炎预后较差，约80％五年内进展成肝硬化，少局部可转为HCC，病死率高达45％。中度慢性肝炎预后居于轻度和重度之间。慢性丙型肝炎预后较乙型肝炎好。3、重型肝炎预后不良，病死率50％—70％。年龄较小、治疗准时、无并发症病死率炎存活者多数转为慢性肝炎或肝炎后肝硬化；慢性重型肝炎病死率最高，可达80％以上，存活者病情可屡次反复。4、淤胆型肝炎急性者预后较好，一般都能康复。慢性者预后较差，简洁进展成胆汁性肝硬化。5、肝炎后肝硬化静止性肝硬化可较长时间维持生命。活动性肝硬化预后不良。细菌的试验室检查及其它检查①结核菌检查是确诊肺结核最特异性的方法药物敏感试验与菌型鉴定。但结核菌生长缓慢，培育较为费时，但准确牢靠，特异性高。假设涂片阴性或诊断有疑问时，培育尤其重要；而且，培育后可做药物敏感性测定，指导临床用药。PCR技术检测结核菌DNA快速、简便，并可鉴定菌型，缺乏之处是可能消灭假阳性或假阴性。②影像学检查胸部X线检查可以觉察肺内病变的部位、范围、有无空洞或空洞大小、洞X线对各类结核病的透过度不同X线检查能大致估量结核病灶的病理性质，X线表现包括：纤维钙化的硬结病灶、浸润性病灶以及干酪样病灶等。胸部CT检查对于觉察微小或隐蔽性病变，了解病变范围及病变鉴别等方面均有帮助。〔oldtuberculin,〕和结核菌素的纯化蛋白衍化物dn,D，现临床多用。皮内注射〔m为阳性反响。结核菌素试验有助于推断有无结核状况：结核菌在感染4～8周后才建立充分变态反响，在这之前，结核菌素试验可呈阴性；消逝。④其它检查结核病患者血像通常无转变，严峻病例常有继发性贫血，急性粟粒型肺结核时白细胞总数减低或消灭类白血病反响。血沉增快常见于活动性肺结核。用ELISA法检测患者取活组织作病理检查等，均有重要诊断价值。浅表淋巴结活检，有助于结核的鉴别诊断。诊断和鉴别诊断X线检查是诊断肺结核的必要手段，对早期诊断、确定病变部位、范围、性质、了解其演化及选择治范围及空洞部位、痰菌检查、活动性及转归。肺结核分为五型：Ⅰ型为原发型肺结核；Ⅱ型为血行播散型肺结核；Ⅲ型为浸润型肺结核；Ⅳ型为慢性纤维空洞型肺结核；Ⅴ型为结核性如伤寒、败血症、白血病、纵隔淋巴瘤及结节病等进展鉴别。四、结核杆菌的防治及生物安全防护细菌的防治依据《中华人民共和国传染病防治法》和《试验室生物安全通用要求》中的有关规定，结核病属于乙类传染病，依据乙类传染病进展预防把握。源为主的综合性防治措施，努力做到“早觉察、早报告、早治疗源。临床上肺结核化学治疗的原则是早期、规律、全程、适量、联合。整个治疗方案分强化和稳固两个阶段。我国结核病防治规划指南规定承受统一标准的化学治疗方案。表1 国家防痨规划的结核病化疗方案疗程 化疗方案6个月 2RHZ/4RH2ERHZ/4RH4R2H22SRHZ/4RH4R2H28个月 2SRHZ/6TH或6EH2SRHZ/6S2H2Z2R代表利福平，H代表异烟肼，Z代表吡嗪酰胺，E代表乙胺丁醇，S代表链霉素，T代表丙2个月，斜线后字表示后几个月。2S(E)RHZ/4RH(E)治规章治疗失败的患者，可用2S3H3Z3E3/6H3R3E3；③慢性排菌者可用敏感的一线药与二线药联用，应严密观看药物不良反响，疗程以6～12个月为宜。组织形成及胸膜粘连。对咯血患者，应对症治疗，包括休息、止咳、冷静以及应用止血药如安络血等。五、细菌的试验室安全防护〔待公布〕结核杆菌属于二类，BSL-3。WHO将结核杆菌生物危害等级定为Ⅲ级。全部参与结核杆菌防治和争辩的试验室和试验室人员都必需遵核病诊断试验室检验规程安全防护被觉察与治疗。当进展大量活菌试验时，全部操作应在BSL-3级试验室生物安全柜中进展。器皿内送检。检验人员应穿戴防护服、口罩、手套等防护装备，严格遵守试验操作规程，试验室空气、试验台面应定时消毒。痰、尿标本找抗酸杆菌，应先高压灭菌后，再涂片染色。护。药物敏感性测定时，在磨菌、滴加菌液、接种培育物、烧灼接种环等操作过程有产生气溶胶和意外溅洒的可能，试验者有可能直接大剂量暴露细菌。因此该项操作肯定在BSL-3级试验室完成，且最好试验室内要有负压。并且操作者着二级生物防护用品。意外事故的处理结核杆菌的灭活方式有化学的和物理的方法。试验过程中：75%已乙醇溶液的卫生纸掩盖污染区，15分钟以后卫生纸方可移去；如污染物溅落到身体外表，或有割伤、刺伤、烧伤、烫伤等状况发生，应马上停顿试验工眼睛用无菌生理盐水冲洗；25%5%75%的乙醇溶液，2小时以上(其间适量添加溶液防止枯燥)，再经紫外灯近距离(1米内)2小时以上；75%2处理；进展紫外灯照耀消毒过夜；其次天对污染区域进展24小时封闭空气熏蒸消毒(乙醛消毒法：5ml乙醛+2g高锰酸钾/平方米空间)，直接被污染的区域可参照第3)条进展处理。5〕马上报告负责人。启动报告程序。试验室人员的防护工作，消灭以下状况，不能进入：身体消灭开放性损伤；患发热性疾病；感冒、上呼吸道感染、或其他导致抵抗力下降的状况；妊娠、已经在试验室把握区域内连续工作4h以上，或其他缘由造成的疲乏状态。从事结核杆菌检测工作人员可间隔数年接种卡介苗一次责人，实行早觉察、早报告、早治疗以把握治理传染源为主的综合性防治措施。六、试验室试验活动危害评估具体风险评估附表七、评估结论全部参与结核杆菌防治和争辩的试验室和试验室人员都必需遵条例》和《结核病诊断试验室检验规程防护要求操作，试验室技术人员经初审具备进展相关的试验活动的资格。结核分枝杆菌试验室活动风险评估表危害发生固有措施残留潜在危