最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件

药材粗粉提取混合物分离有效成分药材粗粉提取混合物分离有效成分提取分离方法●提取●分离溶剂提取法水蒸汽蒸馏法两相溶剂萃取法沉淀法透析法分馏法盐析法结晶法与重结晶法超临界流体萃取法色谱法提取分离方法●提取溶剂提取法水蒸汽蒸馏法两相溶剂萃取一、溶剂提取法第一节天然药物化学成分的提取1、溶剂的极性极性：指一根共价键或一个共价分子中电荷分布的不均匀性。如果电荷分布得不均匀，则称该键或分子为极性；如果均匀，则称为非极性。与介电常数成正相关。一、溶剂提取法第一节天然药物化学成分的提取1、溶剂的极性极H2O(水)78.5HCOOH(甲酸)58.5HCON(CH3)2(N,N-二甲基甲酰胺)36.7CH3OH(甲醇)32.7C2H5OH(乙醇)24.5CH3COCH3(丙酮)20.7n-C6H13OH（正己醇）13.3CH3COOH(乙酸)6.15

C6H6(苯)2.28CCl4(四氯化碳)2.24n-C6H14（正己烷）1.88介电常数介电常数由弱到强的顺序如下：石油醚(低沸点高沸点)<二硫化碳<四氯化碳<苯<二氯甲烷<氯仿<乙醚<醋酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<水选择溶剂的要点：能有效的提取成分；相似相溶，沸点适中易回收；低毒安全。由弱到强的顺序如下：石油醚(低沸点高沸点)<二硫化2、溶剂的类型水亲水性有机溶剂（极性溶剂）亲脂性有机溶剂（非极性溶剂）2、溶剂的类型水亲水性有机溶剂（极性溶剂）亲脂性有机溶剂（（1）水优点：溶解范围广、穿透能力强、易得、安全

缺点：a.有些苷类成分的酶解b.有些脂溶性成分溶解不完全c.水提液易发霉、变质d.水溶性杂质多，过滤困难e.沸点高，浓缩困难（1）水(2)亲水性有机溶剂优点：溶解范围广、水溶性杂质溶出少、提取液不易发霉、变质、大部分可回收利用。缺点：但有挥发性、易燃烧。(2)亲水性有机溶剂（3）亲脂性有机溶剂优点：对化合物溶解选择性较强、水溶性杂质少、易纯化。缺点：挥发性大、易燃烧，有毒、价格昂贵，对提取设备要求高穿透力较弱，提取时间长。（3）亲脂性有机溶剂3、被提取成分的性质极性（亲水性）非极性（亲脂性）中等极性（既有亲水性又有亲脂性）常见取代基的极性大小顺序：酸＞酚＞醇＞胺＞醛＞酮＞酯＞醚＞烯＞烷3、被提取成分的性质4、溶剂选择的原则（1）“相似相溶”，对有效成分溶解度大，对杂志溶解度小。（2）溶剂与所溶成分不发生化学反应，即使发生也是可逆的。（3）廉价、易得、使用安全、易于回收和浓缩。4、溶剂选择的原则（三）提取技术1、浸渍法适用于：有效成分遇热易破坏及含淀粉、果胶、粘液质、树胶等多糖物质较多的中药。（三）提取技术适用于：有效成分遇热易破坏及含淀粉、果胶、粘液2、煎煮法适用于：能溶于水且遇热稳定成分的提取。2、煎煮法适用于：能溶于水且遇热稳定成分的提取。3、渗漉法适用于：遇热易被破坏的成分。3、渗漉法适用于：遇热易被破坏的成分。4、回流提取法适用于：对热稳定的成分提取。4、回流提取法适用于：对热稳定的成分提取。5、连续回流提取法索氏提取器5、连续回流提取法索氏提取器溶剂提取法分类提取方法溶剂操作提取效率使用范围备注浸渍法水有机溶剂不加热，在常温下浸泡提取效率低各类成分，尤遇热不稳定成分出膏率低，易发霉，需加防腐剂渗漉法有机溶剂不加热渗漉筒—脂溶性成分消耗溶剂量大，费时长煎煮法水直火加热—水溶性成分易挥发、热不稳定不宜用回流提取法有机溶剂在回流装置中水浴加热提取—脂溶性成分热不稳定不宜用，溶剂量大连续回流提取法有机溶剂以索氏提取器水浴加热回流提取节省溶剂效率最高亲脂性较强成分时间长溶剂提取法分类提取方法溶剂操作提取效率使用范围备注浸渍法水不（四）影响提取效率的主要因素溶剂的选择（关键）提取技术浓度差药物的粉碎度温度、时间（四）影响提取效率的主要因素（五）提取液的浓缩1、蒸馏指将提取液加热浓缩，特点是不仅对回收的溶剂可再利用，降低成本，减少有机溶剂对环境的污染和对操作人员的危害。（五）提取液的浓缩2、蒸发通过加热使提取液中的溶剂气化并除去，从而提高提取液浓度。2、蒸发通过加热使提取液中的溶剂气化并除去，从而提高原理：被提取成分和水一起加热时，其蒸汽压与水蒸气压总和为一个大气压，液体沸腾，水蒸气将挥发性成分一并带出。范围：难溶于水或不溶于水的挥发性成分，加热不被破坏。如：挥发油、小分子的香豆素类、小分子的醌类成分。二、水蒸气蒸馏法：

共水蒸馏法（即直接加热法）通水蒸气蒸馏法原理：被提取成分和水一起加热时，其蒸汽压与水蒸气压总和为一个适用于：具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏、与水不发生反应且不溶或难溶于水的成分的提取。适用于：具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏、与水不发生反应三、超临界流体萃取物质处于临界温度和临界压力以上状态时，成为单一相态，称超临界状态。兼具有气液两相性质（常用萃取剂CO2）：①液体相近的密度，强穿透力；②气体相近的扩散力，提取速率高。三、超临界流体萃取物质处于临界温度和临界压力以上状态时，成为最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件第二节天然药物化学成分的分离一、两相溶剂萃取法（一）基本原理液液萃取是以分配定律为基础分配定律：一定T、P下，溶质在两个互不相溶的溶剂中分配，平衡时，溶质在两相中浓度之比为常数。K-分配系数第二节天然药物化学成分的分离一、两相溶剂萃取法液液萃取是以杂质溶质原溶剂萃取剂杂质溶质原溶剂萃取剂实验室液液萃取过程实验室液液萃取过程（二）萃取剂的选择原则1、互不相溶2、分配系数相差越大越好3、水提取液中的有效成分是亲脂性的物质，一般多用亲脂性有机溶剂，如苯、氯仿或乙醚进行两相萃取；有效成分是偏于亲水性的物质，需用弱亲脂性的溶剂，例如乙酸乙酯、丁醇等。（二）萃取剂的选择原则溶剂萃取步骤溶剂体积为样品溶液的30％-35％。振荡几次打开活塞Gas蒸气逸出（也叫放气）溶剂萃取步骤溶剂体积为样品振荡几次打开活塞Gas蒸气逸出（也絮状物（乳化）有机相水相水相和絮状物静置分层激烈振摇1-2min絮状物有机相水相水相和絮状物静置分层激烈振摇有机相3～5次少量多次原则有机相3～5次少量多次原则二、沉淀法（一）酸碱沉淀法

利用天然药物中游离酸性（或碱性）成分可与碱性（或酸性）试剂反应生成盐而溶于水，再加酸（或碱性）试剂，重新生成原来的游离酸性（或碱性）成分而从溶液中沉淀析出的性质，滤过（或加有机溶剂萃取）而与其他成分或杂质分离的一种方法。（二）乙醇沉淀法

在浓缩后的水提液中，加入一定量的乙醇（使含醇量达80%以上），则难溶于高浓度乙醇的成分如蛋白质、淀粉、树胶等从溶液中析出，经过滤即可除去。二、沉淀法三、结晶法与重结晶法（一）基本概念三、结晶法与重结晶法（一）基本概念结晶：由非晶形经过结晶操作形成有晶形的过程。原理：根据混合物中各成分在某种溶剂中溶解度的差异。先加热溶液，蒸发溶剂成饱和溶液，此时降低热饱和溶液的温度，溶解度随温度变化较大的溶质就会呈晶体析出。关键---溶剂:被溶解成分的溶解度随温度不同有显著差别；与成分不产生化学反应；沸点适中；常用溶剂：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯结晶：由非晶形经过结晶操作形成有晶形的过程。（二）操作过程1、选择适宜的溶剂

根据欲结晶成分的性质及在溶剂中溶解度大小来选择。2、制备饱和的结晶溶液（1）过饱和溶液的形成（2）晶核生成（3）晶体的生长(1)冷却(2)溶剂蒸发（二）操作过程(1)冷却(2)溶剂蒸发3、趁热过滤3、趁热过滤最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件（三）结晶溶剂的选择（1）与被提纯的有机化合物不起化学反应。（2）对被提纯的有机物应具有热溶，冷不溶（3）杂质化合物的溶解性对温度变化不敏感（4）对要提纯的有机物能在溶剂中形成较整齐的晶体。（5）溶剂的沸点，不宜太低（易损），也不宜太高（难除）。（6）价廉易得无毒。（三）结晶溶剂的选择最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件四、盐析法

盐析法是在中草药的水提液中、加入无机盐至一定浓度，或达到饱和状态，可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而与水溶性大的杂质分离。盐析用的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。三七的水提取液中加硫酸镁至饱和状态，三七皂甙乙即可沉淀析出，自黄藤中提取掌叶防己碱，自三颗针中提取小檗碱在生产上都是用氯化钠或硫酸铵盐析制备。有些成分如原白头翁素、麻黄碱、苦参碱等水溶性较大，在提取时，亦往往先在水提取液中加入一定量的食盐，再用有机溶剂萃取。四、盐析法盐析法是在中草药的水提液中、加入无机盐五、透析法

透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过半透膜的性质，达到分离的方法。例如分离和纯化皂甙、蛋白质、多肽、多糖等物质时，可用透析法以除去无机盐、单糖、双糖等杂质。反之也可将大分子的杂质留在半透膜内，而将小分子的物质通过半透膜进入膜外溶液中，而加以分离精制。透析是否成功与透析膜的规格关系极大。

五、透析法最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件六、升华法

固体物质受热直接气化，遇冷后又凝固为固体化合物，称为升华。中草药中有一些成分具有升华的性质，故可利用升华法直接自中草药中提取出来。例如樟木中升华的樟脑（camphor），在《本草纲目》中已有详细的记载，为世界上最早应用升华法制取药材有效成分的记述。又如茶叶中的咖啡因具有升华性，可将茶叶放在大小适宜的烧杯中，上面用圆底烧瓶盛水冷却，然后加热，到一定温度（178℃），咖啡因可凝结于烧瓶底部，成白色针状结晶。六、升华法最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件七、分馏法

对沸点相近的混合物，在分馏柱内反复进行气化、冷凝、回流等程序而分离的一种方法。七、分馏法第三节色谱分离法第三节色谱分离法

1906年，俄国植物学家Tswett

目的：分离植物色素

过程：将植物绿叶的石油醚提取液倒入玻璃管中，并用石油醚不断淋洗，逐渐形成色带，各色素成分被分离

命名：分离方法为“色谱法”

称：玻璃管“色谱柱”

称：碳酸钙“固定相”

称：石油醚“流动相”

石油醚石油醚植物色素分离图示植物色素分离图示色谱分离法又称层析分离法：即是利用混合物中各组分的物理化学性质（分子的形状和大小，分子的极性，吸附力，分子的亲和力，分子的分配系数等）的不同，使各组分以不同程度分布在两相中，其中一相是固定的，称固定相；另一相是流动的，称流动相。当流动相流过固定相时，各组分以不同的速度移动，而达到分离。色谱分离法又称层析分离法：即是利用混合物中各组分的物理化分类按流动相分气相色谱液相色谱超临界流体色谱按机理分吸附色谱分配色谱离子交换色谱凝胶色谱分类按流动相分气相色谱按机理分吸附色谱分类吸附色谱——利用固定相中吸附剂表面对各组分不同的物理吸附能力(气—固色谱）分配色谱——不同组分在两相中有不同的分配系数(气—液色谱)离子交换色谱——利用离子交换原理(离子色谱)凝胶色谱——利用多空性物质对不同大小分子的排阻作用(液相色谱)分类一、吸附色谱法当溶液中某组分的分子在运动中碰到一个固体表面时，分子会贴在固定表面上，这就发生了吸附作用。一、吸附色谱法当溶液中某组分的分子在运动中碰到一个固体表面时1.分离原理各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心,利用吸附剂对不同组分的吸附能力差异而实现分离.经过吸附、解吸、再吸附、再解吸……最后混合物得到分离.

1.分离原理各组分与流动相分子争夺吸附剂2.固定相及其选择固定相是表面具有许多吸附中心的吸附剂，常用吸附剂硅胶表面的硅醇基为吸附中心。经典液相柱色谱和薄层色谱使用一般硅胶。（1）对吸附剂的要求

①有大的表面积和足够的吸附能力；②对不同的化学成分有不同的吸附力，能较好地把混合物分开；③与流动相、溶剂及样品中各成分不起化学反应；④在所用的溶剂及流动相中不溶解；⑤颗粒均匀，操作过程中不会碎裂。2.固定相及其选择固定相是表面具有许多吸（2）吸附剂的类别①有机类淀粉、葡萄糖、聚酰胺、纤维素等②无机类氧化铝、硅胶、活性炭、碳酸钙、硅藻土等（3）吸附剂的活度因含水使吸附剂活度，含水量，活性(活度)级别，活性（2）吸附剂的类别①有机类淀粉、葡萄糖、聚酰胺、纤维素等（4）吸附剂的选择a硅胶：为首选吸附剂。本身具微酸性，适用于分离酸性及中性物质，如有机酸、氨基酸、甾体等。b氧化铝：氧化铝具有分离能力强、活性可以控制等优点。

碱性氧化铝pH9～10适于分析碱性、中性物质中性氧化铝pH7.5适于分析酸性碱性和中性物质酸性氧化铝pH4～5适于分析酸性、中性物质C聚酰胺:氢键作用,氢键能力↑强，组分越后出柱

分离极性小的物质，一般选用活性大些的吸附剂；反之，分离极性大的物质，选用活性小的吸附剂。（4）吸附剂的选择a硅胶：为首选吸附剂。本身具微酸性，适3.流动相及其选择（1）要求

①应使用较纯试剂，含杂质会影响洗脱能力②与样品或吸附剂不发生化学反应③能溶解样品中各成分，且各被分离组分有不同的K值④粘度小，易流动（2）流动相流动相的洗脱能力主要由其极性决定，极性强的流动相分子占据极性中心的能力强，洗脱能力就强。流动相的选择要依据样品的极性、吸附剂的活性而定。3.流动相及其选择（1）要求（2）流动相（3）常用溶剂的极性石油醚<环己烷<二硫化碳<四氯化碳<三氯乙烷<苯<甲苯<二氯甲烷<乙醚<氯仿<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<吡啶<酸<水（4）流动相的选择用硅胶或氧化铝作色谱分离时，如被测成分极性较大，用活性较低的吸附剂，极性较大的冲洗剂；被测成分极性较小，选用活性较强的吸附剂，极性较小的冲洗剂（3）常用溶剂的极性石油醚<环己烷<二硫化碳<四氯化碳<4.洗脱顺序吸附弱的组分先被洗脱，吸附强的组分后被洗脱。吸附的强弱与组分的性质(极性、取代基的类型和数目、构型）有关。一般规律是：①非极性化合物，吸附弱。②基本母核相同，分子中取代基的极性越强，或极性基团越多，分子极性越强(但要考虑其他因素的影响)，吸附能力越强。③分子中双键数越多，则吸附力越强。④能形成分子内氢键的化合物，其吸附能力降低。

4.洗脱顺序吸附弱的组分先被洗脱，吸附强的组分后常见化合物的吸附能力的顺序如下：烷烃(-CH3、-CH2-)<烯烃(-CH=CH-)<醚类(-OCH3)<硝基化合物(-NO2)<二甲胺(-N(CH3)2)<酯类(-COOR)<酮类(>C=O)<醛类(-CHO)<硫醇(-SH)<胺类(-NH2)<酰胺(-NHCOCH3)<醇类(-OH)<酚类(Ar-OH)<羧酸类(-COOH)常见化合物的吸附能力的顺序如下：烷烃(-CH3、-CH2薄层色谱法

薄层色谱是在平面上进行分离的一种方法，又叫平面色谱法。通常将固定相(吸附剂)均匀地涂铺在表面洁净的玻璃、塑料或金属板形成薄层，制成薄板，进行样品分离。薄层色谱法

薄层色谱是在平面上进行分离的一种方法，又叫平(一)吸附色谱分离原理利用吸附剂对不同成分吸附力的大小及展开剂解吸附作用的差异进行分离。吸附牢的组分随展开剂移动慢，吸附弱的组分随展开剂移动快，一段时后，组分被分离。固定相:固体吸附剂流动相:液体展开剂一、基本原理(一)吸附色谱分离原理一、基本原理溶剂

前沿起始线ABabc（1）比移值Rf：Rf是薄层色谱法基本定性参数，一定条件时Rf为定值，在0～1之间，可用范围Rf值在0.2～0.8之间。组分极性越大，Rf越小,反之越大。（二）比移值与相对比移值溶剂

前沿起始线ABabc（1）比移值Rf：Rf是薄层色谱法硅胶、氧化铝薄层：被分离物质极性越大，越易被吸附。一般规律：（1）官能团极性越大，整个分子极性越大，越易被吸附；（2）形成分子内H键时，被吸附力减弱；（3）同系物中，分子量越大，极性越小，被吸附力越弱。被分离物质极性与吸附能力的关系硅胶、氧化铝薄层：被分离物质极性越大，越易被吸附。被分离物质硅胶薄层色谱规律总结被分离组分展开剂Rf被分离物洗脱顺序极性大极性大小后洗脱极性小极性小大先洗脱硅胶薄层色谱规律总结被分离组分展开剂Rf被分离物洗脱顺序极性（1）软板的制备软板：直接将吸附剂铺在玻璃板上制成，不加粘合剂要求：厚度→随分离要求而定，一般0.25～0.5mm玻璃棒推动速度不宜过快、也不应停顿→影响厚度均一性操作步骤（1）软板的制备软板：直接将吸附剂铺在玻璃板上制成，不加粘合2、点样（1）样品溶液的制备：

2、点样（1）样品溶液的制备：2、点样（2）点样量：

与薄层板的关系太多太少的影响点样基线：距底边2.0cm样点直径：2-4mm点间距离：1.5-2.0cm2、点样（2）点样量：点样基线：距底边2.0cm2、点样（3）点样方法：

划线、样品记号点、点样

注：动作要轻，毛细管或点样器不能混用，斑点大小适当，可多次点样。平头50ul微量点样器全自动点样仪2、点样（3）点样方法：平头50ul微量点样器全自动点样仪3、展开展开缸（色谱缸）3、展开展开缸（色谱缸）3、展开（1）展开方式：a、近水平展开特点：速度快、适用于软板的展开。3、展开（1）展开方式：a、近水平展开特点：速度快、适用于软3、展开（1）展开方式：b、上行展开过程：预饱和（滤纸贴于展开槽内侧）、展开、标记溶剂前沿3、展开（1）展开方式：b、上行展开过程：预饱和（滤4、显色和定位一般规律：日光下观察、紫外灯下观察、加显色剂加显色剂：多喷雾，软板使用浸渍显色法紫外灯观察喷显色剂观察4、显色和定位一般规律：日光下观察、紫外灯下观察、加显色剂紫判断依据：Rf值四、结果计算和判断判断依据：Rf值四、结果计算和判断二、分配色谱法1.分离原理：将液体均匀地涂渍在惰性物质(载体)表面上作为固定相，利用被分离组分在固定相与流动相中的溶解度差别所造成的分配系数差别而被分离。二、分配色谱法1.分离原理：将液体均匀地涂渍在惰性物质(2.固定相和流动相要求：固定相→机械吸附在惰性载体上的液体,常用的固定液有水、稀硫酸、甲醇、甲酰胺等强极性溶剂

载体→惰性物质，无吸附性性质稳定，不与固定相和流动相发生化学反应常用的有吸水硅胶、纤维素、多孔硅藻土等。流动相→必须与固定相不为互溶石油醚、醇类、酮类、酯类、卤代烷及苯等。2.固定相和流动相要求：流动相→必须与固定相不为互溶石油醚、3.洗脱顺序正相色谱

固定相极性大于流动相极性,主要分离极性样品.极性弱的组分先被洗脱，极性强的组分后被洗脱。反相色谱

固定相极性小于流动相极性,主要分离非极性样品和中等极性样品.极性强的组分先出柱，极性弱的组分后出柱。3.洗脱顺序正相色谱固定相极性大于流动相极性,主要分

定义：

纸色谱分离法又称纸层析法，是根据不同物质在两相中的分配比不同而进行分离的一种微量分离方法。纸色谱法载体——层析纸（滤纸）；固定相——滤纸上的吸湿水分；流动相——有机溶剂（展开剂）。定义：纸色谱法载体——层析纸（滤纸）；实验步骤点样展开分离显色计算比移值实验步骤点样展开分离显色计算比移值79实验原理分离示意图AB上行法实验原理分离示意图AB上行法80实验原理原点展开后斑点溶剂前沿a1a2bAB实验原理原点展开后斑点溶剂前沿a1a2bAB81实验原理RF:

通常用比移值RF衡量各组分的分离程度：RF:0～1。RF值相差越大，分离效果越好。实验原理RF:RF:0～1。82RF：物质定性分析的依据。在进行分析工作时，可使用各组分相应的标准样品同时作对照实验。影响因素：主要是展开剂、滤纸质量、温度等实验条件。实验原理RF：物质定性分析的依据。实验原理83本实验分离和鉴定的氨基酸混合液：异亮氨酸、赖氨酸和谷氨酸。氨基酸是无色的，在层析后需在纸上喷洒显色剂茚三酮，斑点呈现蓝紫色。本实验分离和鉴定的氨基酸混合液：异亮氨酸、赖氨酸和谷氨酸。84主要仪器：（1）玻璃层析筒150mm×300mm(φ×h)。（2）层析纸条100mm×240mm。（3）毛细管直径1mm左右。（4）喷雾器仪器试剂主要仪器：仪器试剂85主要试剂：（1）展开剂正丁醇:甲酸:水＝60:12:8。（2）氨基酸标准溶液2g·L-1水溶液。（3）茚三酮1g·L-1乙醇溶液。（4）氨基酸混合试液将（2）配制的三种氨基酸等量混合。仪器试剂主要试剂：仪器试剂86实验步骤点样展开分离显色计算比移值实验步骤点样展开分离显色计算比移值87实验步骤

——点样2.0cm2.0cm1234异亮氨酸赖氨酸谷氨酸混合液各点φ≈2mm实验步骤

——点样2.0cm2.0cm1288实验步骤

——展开分离展开剂滤纸下端浸入展开剂约0.5cm，计时。一段时间后，前沿上升15cm左右记下展开停止时间实验步骤

——展开分离展开剂滤纸下端浸入展开剂约0.5cm，89实验步骤

——展开分离取出层析纸，画出溶剂前沿晾干或烘干展开剂实验步骤

——展开分离取出层析纸，画出溶剂前沿晾干或烘干展开90实验步骤

——显色在层析纸上均匀喷洒显色剂l00℃烘箱中，烘3～5min实验步骤

——显色在层析纸上均匀喷洒显色剂l00℃烘箱中，91实验步骤

——计算RF用铅笔描出各斑点的轮廓ba1a2a3实验步骤

——计算RF用铅笔描出各斑点的轮廓ba1a2a392

（1）计算RF。（2）定性分析。数据处理（1）计算RF。数据处理93三、聚酰胺吸附色谱法聚酰胺：固定相流动相三、聚酰胺吸附色谱法聚酰胺：94（3）吸附规律：

[1]形成氢键基团数目越多，则吸附能力越强[2]形成氢键基团位置不同，被吸附的强度也不同[3]分子芳香核、共轭双键越多，吸附越牢[4]化合物形成分子内氢键，则被吸附的强度减小[5]与溶剂介质有关.形成氢键能力:

水中最强,碱中最弱（3）吸附规律：

[1]形成氢键基团数目越多，则吸附能力四、离子交换色谱法要求：固定相→离子交换树脂流动相→水为溶剂的缓冲溶液被分离组分→离子型的有机物或无机物1.分离原理阳离子交换树脂

RSO3-H++X+→RSO3-X++H+

固定离子可交换离子待测离子依据被测组分与离子交换剂交换能力（亲和力）不同而实现分离四、离子交换色谱法要求：阳离子交换树脂固定离子可交换离子离子交换的基本过程：离子交换的基本过程：2.固定相和流动相

固定相是离子交换剂——常见的是离子交换树脂，是具有网状立体结构高分子的聚合物。如，苯乙烯和二乙烯苯聚合，其中二乙烯苯是交联剂。流动相——水、缓冲溶液、或加入少量的乙醇、四氢呋喃、乙腈等有机溶剂，提高选择性2.固定相和流动相固定相是离子交换剂——常见的是离子交换五、凝胶色谱法凝胶色谱是基于分子大小不同而进行分离的一种分离技术（分子筛）。它具有一系列优点：操作方便、不会使物质变性、适用于不稳定的化合物、凝胶不用再生、可反复使用。缺点：分离速度较慢。五、凝胶色谱法凝胶色谱是基于分子大小不同而进行分离的一种分离最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件凝胶过滤层析过程示意图小分子大分子凝胶基质凝胶珠凝胶过滤层析过程示意图小分子大分子凝胶基质凝胶珠六、其他色谱法（一）大孔树脂色谱法吸附原理——范德华引力＋分子筛大孔树脂具有吸附性及分子筛的双重作用，可分离天然药物中相对分子量大小及吸附力强弱不同的化学成分分离。

六、其他色谱法（二）气相色谱法

用气体作为移动相的色谱法。根据所用固定相的不同可分为两类：固定相是固体的，称为气固色谱法；固定相是液体的则称为气液色谱法。（二）气相色谱法高效液相色谱法(highpressureLiquidchromatography，HPLC)是利用物质在两相之间吸附或分配的微小差异达到分离的目的。当两相作相对移动时，被测物质在两相之间做反复多次的分配，这样使原来微小的差异产生了很大的分离效果，达到分离、分析和测定一些理化常数的目的。（三）高效液相色谱法

高效液相色谱法(highpressureLiquidcHPLC与经典LC区别经典液相色谱高效液相色谱常压或减压填料颗粒大柱效低分析速度慢色谱柱只用一次不能在线检测高压，40～50Mpa填料颗粒小，2～50μm柱效高，40000～60000块/m分析速度快色谱柱可重复多次使用能在线检测HPLC与经典LC区别经典液相色谱高效液相色谱常压或减压高流程及主要部件流程及主要部件液相色谱仪液相色谱仪液相色谱仪液相色谱仪药材粗粉提取混合物分离有效成分药材粗粉提取混合物分离有效成分提取分离方法●提取●分离溶剂提取法水蒸汽蒸馏法两相溶剂萃取法沉淀法透析法分馏法盐析法结晶法与重结晶法超临界流体萃取法色谱法提取分离方法●提取溶剂提取法水蒸汽蒸馏法两相溶剂萃取一、溶剂提取法第一节天然药物化学成分的提取1、溶剂的极性极性：指一根共价键或一个共价分子中电荷分布的不均匀性。如果电荷分布得不均匀，则称该键或分子为极性；如果均匀，则称为非极性。与介电常数成正相关。一、溶剂提取法第一节天然药物化学成分的提取1、溶剂的极性极H2O(水)78.5HCOOH(甲酸)58.5HCON(CH3)2(N,N-二甲基甲酰胺)36.7CH3OH(甲醇)32.7C2H5OH(乙醇)24.5CH3COCH3(丙酮)20.7n-C6H13OH（正己醇）13.3CH3COOH(乙酸)6.15

C6H6(苯)2.28CCl4(四氯化碳)2.24n-C6H14（正己烷）1.88介电常数介电常数由弱到强的顺序如下：石油醚(低沸点高沸点)<二硫化碳<四氯化碳<苯<二氯甲烷<氯仿<乙醚<醋酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<水选择溶剂的要点：能有效的提取成分；相似相溶，沸点适中易回收；低毒安全。由弱到强的顺序如下：石油醚(低沸点高沸点)<二硫化2、溶剂的类型水亲水性有机溶剂（极性溶剂）亲脂性有机溶剂（非极性溶剂）2、溶剂的类型水亲水性有机溶剂（极性溶剂）亲脂性有机溶剂（（1）水优点：溶解范围广、穿透能力强、易得、安全

缺点：a.有些苷类成分的酶解b.有些脂溶性成分溶解不完全c.水提液易发霉、变质d.水溶性杂质多，过滤困难e.沸点高，浓缩困难（1）水(2)亲水性有机溶剂优点：溶解范围广、水溶性杂质溶出少、提取液不易发霉、变质、大部分可回收利用。缺点：但有挥发性、易燃烧。(2)亲水性有机溶剂（3）亲脂性有机溶剂优点：对化合物溶解选择性较强、水溶性杂质少、易纯化。缺点：挥发性大、易燃烧，有毒、价格昂贵，对提取设备要求高穿透力较弱，提取时间长。（3）亲脂性有机溶剂3、被提取成分的性质极性（亲水性）非极性（亲脂性）中等极性（既有亲水性又有亲脂性）常见取代基的极性大小顺序：酸＞酚＞醇＞胺＞醛＞酮＞酯＞醚＞烯＞烷3、被提取成分的性质4、溶剂选择的原则（1）“相似相溶”，对有效成分溶解度大，对杂志溶解度小。（2）溶剂与所溶成分不发生化学反应，即使发生也是可逆的。（3）廉价、易得、使用安全、易于回收和浓缩。4、溶剂选择的原则（三）提取技术1、浸渍法适用于：有效成分遇热易破坏及含淀粉、果胶、粘液质、树胶等多糖物质较多的中药。（三）提取技术适用于：有效成分遇热易破坏及含淀粉、果胶、粘液2、煎煮法适用于：能溶于水且遇热稳定成分的提取。2、煎煮法适用于：能溶于水且遇热稳定成分的提取。3、渗漉法适用于：遇热易被破坏的成分。3、渗漉法适用于：遇热易被破坏的成分。4、回流提取法适用于：对热稳定的成分提取。4、回流提取法适用于：对热稳定的成分提取。5、连续回流提取法索氏提取器5、连续回流提取法索氏提取器溶剂提取法分类提取方法溶剂操作提取效率使用范围备注浸渍法水有机溶剂不加热，在常温下浸泡提取效率低各类成分，尤遇热不稳定成分出膏率低，易发霉，需加防腐剂渗漉法有机溶剂不加热渗漉筒—脂溶性成分消耗溶剂量大，费时长煎煮法水直火加热—水溶性成分易挥发、热不稳定不宜用回流提取法有机溶剂在回流装置中水浴加热提取—脂溶性成分热不稳定不宜用，溶剂量大连续回流提取法有机溶剂以索氏提取器水浴加热回流提取节省溶剂效率最高亲脂性较强成分时间长溶剂提取法分类提取方法溶剂操作提取效率使用范围备注浸渍法水不（四）影响提取效率的主要因素溶剂的选择（关键）提取技术浓度差药物的粉碎度温度、时间（四）影响提取效率的主要因素（五）提取液的浓缩1、蒸馏指将提取液加热浓缩，特点是不仅对回收的溶剂可再利用，降低成本，减少有机溶剂对环境的污染和对操作人员的危害。（五）提取液的浓缩2、蒸发通过加热使提取液中的溶剂气化并除去，从而提高提取液浓度。2、蒸发通过加热使提取液中的溶剂气化并除去，从而提高原理：被提取成分和水一起加热时，其蒸汽压与水蒸气压总和为一个大气压，液体沸腾，水蒸气将挥发性成分一并带出。范围：难溶于水或不溶于水的挥发性成分，加热不被破坏。如：挥发油、小分子的香豆素类、小分子的醌类成分。二、水蒸气蒸馏法：

共水蒸馏法（即直接加热法）通水蒸气蒸馏法原理：被提取成分和水一起加热时，其蒸汽压与水蒸气压总和为一个适用于：具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏、与水不发生反应且不溶或难溶于水的成分的提取。适用于：具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏、与水不发生反应三、超临界流体萃取物质处于临界温度和临界压力以上状态时，成为单一相态，称超临界状态。兼具有气液两相性质（常用萃取剂CO2）：①液体相近的密度，强穿透力；②气体相近的扩散力，提取速率高。三、超临界流体萃取物质处于临界温度和临界压力以上状态时，成为最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件第二节天然药物化学成分的分离一、两相溶剂萃取法（一）基本原理液液萃取是以分配定律为基础分配定律：一定T、P下，溶质在两个互不相溶的溶剂中分配，平衡时，溶质在两相中浓度之比为常数。K-分配系数第二节天然药物化学成分的分离一、两相溶剂萃取法液液萃取是以杂质溶质原溶剂萃取剂杂质溶质原溶剂萃取剂实验室液液萃取过程实验室液液萃取过程（二）萃取剂的选择原则1、互不相溶2、分配系数相差越大越好3、水提取液中的有效成分是亲脂性的物质，一般多用亲脂性有机溶剂，如苯、氯仿或乙醚进行两相萃取；有效成分是偏于亲水性的物质，需用弱亲脂性的溶剂，例如乙酸乙酯、丁醇等。（二）萃取剂的选择原则溶剂萃取步骤溶剂体积为样品溶液的30％-35％。振荡几次打开活塞Gas蒸气逸出（也叫放气）溶剂萃取步骤溶剂体积为样品振荡几次打开活塞Gas蒸气逸出（也絮状物（乳化）有机相水相水相和絮状物静置分层激烈振摇1-2min絮状物有机相水相水相和絮状物静置分层激烈振摇有机相3～5次少量多次原则有机相3～5次少量多次原则二、沉淀法（一）酸碱沉淀法

利用天然药物中游离酸性（或碱性）成分可与碱性（或酸性）试剂反应生成盐而溶于水，再加酸（或碱性）试剂，重新生成原来的游离酸性（或碱性）成分而从溶液中沉淀析出的性质，滤过（或加有机溶剂萃取）而与其他成分或杂质分离的一种方法。（二）乙醇沉淀法

在浓缩后的水提液中，加入一定量的乙醇（使含醇量达80%以上），则难溶于高浓度乙醇的成分如蛋白质、淀粉、树胶等从溶液中析出，经过滤即可除去。二、沉淀法三、结晶法与重结晶法（一）基本概念三、结晶法与重结晶法（一）基本概念结晶：由非晶形经过结晶操作形成有晶形的过程。原理：根据混合物中各成分在某种溶剂中溶解度的差异。先加热溶液，蒸发溶剂成饱和溶液，此时降低热饱和溶液的温度，溶解度随温度变化较大的溶质就会呈晶体析出。关键---溶剂:被溶解成分的溶解度随温度不同有显著差别；与成分不产生化学反应；沸点适中；常用溶剂：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯结晶：由非晶形经过结晶操作形成有晶形的过程。（二）操作过程1、选择适宜的溶剂

根据欲结晶成分的性质及在溶剂中溶解度大小来选择。2、制备饱和的结晶溶液（1）过饱和溶液的形成（2）晶核生成（3）晶体的生长(1)冷却(2)溶剂蒸发（二）操作过程(1)冷却(2)溶剂蒸发3、趁热过滤3、趁热过滤最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件（三）结晶溶剂的选择（1）与被提纯的有机化合物不起化学反应。（2）对被提纯的有机物应具有热溶，冷不溶（3）杂质化合物的溶解性对温度变化不敏感（4）对要提纯的有机物能在溶剂中形成较整齐的晶体。（5）溶剂的沸点，不宜太低（易损），也不宜太高（难除）。（6）价廉易得无毒。（三）结晶溶剂的选择最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件四、盐析法

盐析法是在中草药的水提液中、加入无机盐至一定浓度，或达到饱和状态，可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而与水溶性大的杂质分离。盐析用的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。三七的水提取液中加硫酸镁至饱和状态，三七皂甙乙即可沉淀析出，自黄藤中提取掌叶防己碱，自三颗针中提取小檗碱在生产上都是用氯化钠或硫酸铵盐析制备。有些成分如原白头翁素、麻黄碱、苦参碱等水溶性较大，在提取时，亦往往先在水提取液中加入一定量的食盐，再用有机溶剂萃取。四、盐析法盐析法是在中草药的水提液中、加入无机盐五、透析法

透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过半透膜的性质，达到分离的方法。例如分离和纯化皂甙、蛋白质、多肽、多糖等物质时，可用透析法以除去无机盐、单糖、双糖等杂质。反之也可将大分子的杂质留在半透膜内，而将小分子的物质通过半透膜进入膜外溶液中，而加以分离精制。透析是否成功与透析膜的规格关系极大。

五、透析法最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件六、升华法

固体物质受热直接气化，遇冷后又凝固为固体化合物，称为升华。中草药中有一些成分具有升华的性质，故可利用升华法直接自中草药中提取出来。例如樟木中升华的樟脑（camphor），在《本草纲目》中已有详细的记载，为世界上最早应用升华法制取药材有效成分的记述。又如茶叶中的咖啡因具有升华性，可将茶叶放在大小适宜的烧杯中，上面用圆底烧瓶盛水冷却，然后加热，到一定温度（178℃），咖啡因可凝结于烧瓶底部，成白色针状结晶。六、升华法最新天然药物化学成分的提取和分离主题讲座课件七、分馏法

对沸点相近的混合物，在分馏柱内反复进行气化、冷凝、回流等程序而分离的一种方法。七、分馏法第三节色谱分离法第三节色谱分离法

1906年，俄国植物学家Tswett

目的：分离植物色素

过程：将植物绿叶的石油醚提取液倒入玻璃管中，并用石油醚不断淋洗，逐渐形成色带，各色素成分被分离

命名：分离方法为“色谱法”

称：玻璃管“色谱柱”

称：碳酸钙“固定相”

称：石油醚“流动相”

石油醚石油醚植物色素分离图示植物色素分离图示色谱分离法又称层析分离法：即是利用混合物中各组分的物理化学性质（分子的形状和大小，分子的极性，吸附力，分子的亲和力，分子的分配系数等）的不同，使各组分以不同程度分布在两相中，其中一相是固定的，称固定相；另一相是流动的，称流动相。当流动相流过固定相时，各组分以不同的速度移动，而达到分离。色谱分离法又称层析分离法：即是利用混合物中各组分的物理化分类按流动相分气相色谱液相色谱超临界流体色谱按机理分吸附色谱分配色谱离子交换色谱凝胶色谱分类按流动相分气相色谱按机理分吸附色谱分类吸附色谱——利用固定相中吸附剂表面对各组分不同的物理吸附能力(气—固色谱）分配色谱——不同组分在两相中有不同的分配系数(气—液色谱)离子交换色谱——利用离子交换原理(离子色谱)凝胶色谱——利用多空性物质对不同大小分子的排阻作用(液相色谱)分类一、吸附色谱法当溶液中某组分的分子在运动中碰到一个固体表面时，分子会贴在固定表面上，这就发生了吸附作用。一、吸附色谱法当溶液中某组分的分子在运动中碰到一个固体表面时1.分离原理各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心,利用吸附剂对不同组分的吸附能力差异而实现分离.经过吸附、解吸、再吸附、再解吸……最后混合物得到分离.

1.分离原理各组分与流动相分子争夺吸附剂2.固定相及其选择固定相是表面具有许多吸附中心的吸附剂，常用吸附剂硅胶表面的硅醇基为吸附中心。经典液相柱色谱和薄层色谱使用一般硅胶。（1）对吸附剂的要求

①有大的表面积和足够的吸附能力；②对不同的化学成分有不同的吸附力，能较好地把混合物分开；③与流动相、溶剂及样品中各成分不起化学反应；④在所用的溶剂及流动相中不溶解；⑤颗粒均匀，操作过程中不会碎裂。2.固定相及其选择固定相是表面具有许多吸（2）吸附剂的类别①有机类淀粉、葡萄糖、聚酰胺、纤维素等②无机类氧化铝、硅胶、活性炭、碳酸钙、硅藻土等（3）吸附剂的活度因含水使吸附剂活度，含水量，活性(活度)级别，活性（2）吸附剂的类别①有机类淀粉、葡萄糖、聚酰胺、纤维素等（4）吸附剂的选择a硅胶：为首选吸附剂。本身具微酸性，适用于分离酸性及中性物质，如有机酸、氨基酸、甾体等。b氧化铝：氧化铝具有分离能力强、活性可以控制等优点。

碱性氧化铝pH9～10适于分析碱性、中性物质中性氧化铝pH7.5适于分析酸性碱性和中性物质酸性氧化铝pH4～5适于分析酸性、中性物质C聚酰胺:氢键作用,氢键能力↑强，组分越后出柱

分离极性小的物质，一般选用活性大些的吸附剂；反之，分离极性大的物质，选用活性小的吸附剂。（4）吸附剂的选择a硅胶：为首选吸附剂。本身具微酸性，适3.流动相及其选择（1）要求

①应使用较纯试剂，含杂质会影响洗脱能力②与样品或吸附剂不发生化学反应③能溶解样品中各成分，且各被分离组分有不同的K值④粘度小，易流动（2）流动相流动相的洗脱能力主要由其极性决定，极性强的流动相分子占据极性中心的能力强，洗脱能力就强。流动相的选择要依据样品的极性、吸附剂的活性而定。3.流动相及其选择（1）要求（2）流动相（3）常用溶剂的极性石油醚<环己烷<二硫化碳<四氯化碳<三氯乙烷<苯<甲苯<二氯甲烷<乙醚<氯仿<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<吡啶<酸<水（4）流动相的选择用硅胶或氧化铝作色谱分离时，如被测成分极性较大，用活性较低的吸附剂，极性较大的冲洗剂；被测成分极性较小，选用活性较强的吸附剂，极性较小的冲洗剂（3）常用溶剂的极性石油醚<环己烷<二硫化碳<四氯化碳<4.洗脱顺序吸附弱的组分先被洗脱，吸附强的组分后被洗脱。吸附的强弱与组分的性质(极性、取代基的类型和数目、构型）有关。一般规律是：①非极性化合物，吸附弱。②基本母核相同，分子中取代基的极性越强，或极性基团越多，分子极性越强(但要考虑其他因素的影响)，吸附能力越强。③分子中双键数越多，则吸附力越强。④能形成分子内氢键的化合物，其吸附能力降低。

4.洗脱顺序吸附弱的组分先被洗脱，吸附强的组分后常见化合物的吸附能力的顺序如下：烷烃(-CH3、-CH2-)<烯烃(-CH=CH-)<醚类(-OCH3)<硝基化合物(-NO2)<二甲胺(-N(CH3)2)<酯类(-COOR)<酮类(>C=O)<醛类(-CHO)<硫醇(-SH)<胺类(-NH2)<酰胺(-NHCOCH3)<醇类(-OH)<酚类(Ar-OH)<羧酸类(-COOH)常见化合物的吸附能力的顺序如下：烷烃(-CH3、-CH2薄层色谱法

薄层色谱是在平面上进行分离的一种方法，又叫平面色谱法。通常将固定相(吸附剂)均匀地涂铺在表面洁净的玻璃、塑料或金属板形成薄层，制成薄板，进行样品分离。薄层色谱法

薄层色谱是在平面上进行分离的一种方法，又叫平(一)吸附色谱分离原理利用吸附剂对不同成分吸附力的大小及展开剂解吸附作用的差异进行分离。吸附牢的组分随展开剂移动慢，吸附弱的组分随展开剂移动快，一段时后，组分被分离。固定相:固体吸附剂流动相:液体展开剂一、基本原理(一)吸附色谱分离原理一、基本原理溶剂

前沿起始线ABabc（1）比移值Rf：Rf是薄层色谱法基本定性参数，一定条件时Rf为定值，在0～1之间，可用范围Rf值在0.2～0.8之间。组分极性越大，Rf越小,反之越大。（二）比移值与相对比移值溶剂

前沿起始线ABabc（1）比移值Rf：Rf是薄层色谱法硅胶、氧化铝薄层：被分离物质极性越大，越易被吸附。一般规律：（1）官能团极性越大，整个分子极性越大，越易被吸附；（2）形成分子内H键时，被吸附力减弱；（3）同系物中，分子量越大，极性越小，被吸附力越弱。被分离物质极性与吸附能力的关系硅胶、氧化铝薄层：被分离物质极性越大，越易被吸附。被分离物质硅胶薄层色谱规律总结被分离组分展开剂Rf被分离物洗脱顺序极性大极性大小后洗脱极性小极性小大先洗脱硅胶薄层色谱规律总结被分离组分展开剂Rf被分离物洗脱顺序极性（1）软板的制备软板：直接将吸附剂铺在玻璃板上制成，不加粘合剂要求：厚度→随分离要求而定，一般0.25～0.5mm玻璃棒推动速度不宜过快、也不应停顿→影响厚度均一性操作步骤（1）软板的制备软板：直接将吸附剂铺在玻璃板上制成，不加粘合2、点样（1）样品溶液的制备：

2、点样（1）样品溶液的制备：2、点样（2）点样量：

与薄层板的关系太多太少的影响点样基线：距底边2.0cm样点直径：2-4mm点间距离：1.5-2.0cm2、点样（2）点样量：点样基线：距底边2.0cm2、点样（3）点样方法：

划线、样品记号点、点样

注：动作要轻，毛细管或点样器不能混用，斑点大小适当，可多次点样。平头50ul微量点样器全自动点样仪2、点样（3）点样方法：平头50ul微量点样器全自动点样仪3、展开展开缸（色谱缸）3、展开展开缸（色谱缸）3、展开（1）展开方式：a、近水平展开特点：速度快、适用于软板的展开。3、展开（1）展开方式：a、近水平展开特点：速度快、适用于软3、展开（1）展开方式：b、上行展开过程：预饱和（滤纸贴于展开槽内侧）、展开、标记溶剂前沿3、展开（1）展开方式：b、上行展开过程：预饱和（滤4、显色和定位一般规律：日光下观察、紫外灯下观察、加显色剂加显色剂：多喷雾，软板使用浸渍显色法紫外灯观察喷显色剂观察4、显色和定位一般规律：日光下观察、紫外灯下观察、加显色剂紫判断依据：Rf值四、结果计算和判断判断依据：Rf值四、结果计算和判断二、分配色谱法1.分离原理：将液体均匀地涂渍在惰性物质(载体)表面上作为固定相，利用被分离组分在固定相与流动相中的溶解度差别所造成的分配系数差别而被分离。二、分配色谱法1.分离原理：将液体均匀地涂渍在惰性物质(2.固定相和流动相要求：固定相→机械吸附在惰性载体上的液体,常用的固定液有水、稀硫酸、甲醇、甲酰胺等强极性溶剂

载体→惰性物质，无吸附性性质稳定，不与固定相和流动相发生化学反应常用的有吸水硅胶、纤维素、多孔硅藻土等。流动相→必须与固定相不为互溶石油醚、醇类、酮类、酯类、卤代烷及苯等。2.固定相和流动相要求：流动相→必须与固定相不为互溶石油醚、3.洗脱顺序正相色谱

固定相极性大于流动相极性,主要分离极性样品.极性弱的组分先被洗脱，极性强的组分后被洗脱。反相色谱

固定相极性小于流动相极性,主要分离非极性样品和中等极性样品.极性强的组分先出柱，极性弱的组分后出柱。3.洗脱顺序正相色谱固定相极性大于流动相极性,主要分

定义：

纸色谱分离法又称纸层析法，是根据不同物质在两相中的分配比不同而进行分离的一种微量分离方法。纸色谱法载体——层析纸（滤纸）；固定相——滤纸上的吸湿水分；流动相——有机溶剂（展开剂）。定义：纸色谱法载体——层析纸（滤纸）；实验步骤点样展开分离显色计算比移值实验步骤点样展开分离显色计算比移值187实验原理分离示意图AB上行法实验原理分离示意图AB上行法188实验原理原点展开后斑点溶剂前沿a1a2bAB实验原理原点展开后斑点溶剂前沿a1a2bAB189实验原理RF:

通常用比移值RF衡量各组分的分离程度：RF:0～1。RF值相差越大，分离效果越好。实验原理RF:RF:0～1。190RF：物质定性分析的依据。在进行分析工作时，可使用各组分相应的